中国中药杂志

2019, v.44(17) 3622-3626

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高卢蜜环菌PCR-RFLP快速鉴别方法研究
Molecular identification of Armillaria gallica by PCR-RFLP analysis

梁宇庭;蒋超;周骏辉;胡启跳;袁媛;

摘要(Abstract):

蜜环菌是名贵中药天麻、猪苓栽培过程中必备的共生菌,蜜环菌的菌索侵入天麻块茎或猪苓菌核后被后者消化利用,成为它们重要的营养源。不同性质的蜜环菌影响天麻、猪苓的生长。作者收集了13个地区的市售蜜环菌,经过IGS鉴定均为高卢蜜环菌。在基因水平和代谢水平上筛选出了蔗糖含量具有显著差异的2种高卢蜜环菌,命名为A型和B型,并建立了简单、准确的高卢蜜环菌DNA分子标记鉴定方法。通过比较高卢蜜环菌A型和B型蔗糖酶基因序列差异,根据差异片段设计聚合酶链反应-限制性内切酶酶切长度多态(PCR-RFLP)鉴别方法,即引物ZTM.F/ZTM.R可扩增高卢蜜环菌A型和B型,产生约304 bp长度条带,限制性内切酶EcoR V可以识别高卢蜜环菌A型和B型的差异序列,仅高卢蜜环菌B型可以被酶切形成2个片段,从而特异性鉴别高卢蜜环菌为B型。该实验建立的PCR-RFLP可以作为高卢蜜环菌A型和B型的DNA鉴别方法。在天麻和猪苓的栽培过程中,可根据品种、生长阶段、生态环境等不同需要,选择合适的菌株,因地制宜提升它们的产量和品质。

关键词(KeyWords): 高卢蜜环菌;聚合酶链反应-限制性内切酶酶切长度多态性;分子鉴定

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家科技基础性工作专项(2015FY111500);; 国家自然科学基金重大项目(81891013,81891010);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(ZZ10-008,ZZ11-116);; 中央本级重大增支减项目(2060302)

作者(Author): 梁宇庭;蒋超;周骏辉;胡启跳;袁媛;

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