- 安鑫;吴文如;来慧丽;杨璐;谭新宁;黄祖波;
分子生药学是生药学与分子生物学有机融合形成的新兴交叉学科,是一门在分子水平研究生药的分类与鉴定、栽培与保护及有效成分生产的科学。广藿香作为道地南药的研究热点,其在分子生药学方面的研究也一直受到学者们的关注,并在不断探索中取得了一定成果。该文综述了近年来广藿香的分子生药学相关研究,并对该领域进行了展望,以期为广藿香资源的保护、开发和利用提供参考。
2019年22期 v.44 4781-4785页 [查看摘要][在线阅读][下载 153K] [引用频次：0 ] |[下载次数：60 ] - 徐小蓉;张婷;李潘;许强;冯碧;谭鹏;曹俊涵;许润春;张定堃;韩丽;
药品质量一致性关乎临床疗效与安全,受到国家和相关行业的高度重视。与化学药相比,中药源于天然,受产地、栽培加工技术、气候等自然因素影响较大,质量一致性差。质量一致性已成为中药产业发展的痛难点,严重影响中医临床疗效的稳定可控及现代研究结果的可重复、被认可,也是中成药走向国际市场亟待解决的瓶颈问题。混批勾兑技术是其他行业与学科保障质量一致性的有效方法,在酿酒行业、烟草行业与香水行业广泛应用。在国外,混批勾兑技术在保障银杏叶制剂金纳多的质量一致性方面取得巨大成功,在日本汉方制剂生产应用30余年。近年来,混批勾兑技术被引入中药学领域,用于保障中药质量一致性,并取得了一定进展。该文回顾了混批勾兑技术在其他学科的应用概况,综述了国内外中药学或天然药物领域混批勾兑的算法原理与软件系统,阐述了混批勾兑技术的具体实施过程,展望了人工智能等新技术解决中药复杂物质体系质量一致性的应用前景,以期抛砖引玉,为解决中药质量一致性难题,推动中药产业在新时代高质量高水平发展提供新的思路与技术。
2019年22期 v.44 4786-4792页 [查看摘要][在线阅读][下载 187K] [引用频次：0 ] |[下载次数：38 ] - 李娜;余璇;于巧红;王萌;
多糖类化合物是由单糖组成的一类天然高分子化合物,其广泛存在于中药之中,是中药中重要的活性成分之一。现代药理研究表明中药多糖具有抗肿瘤、增强免疫、调节肠道微环境、抗氧化等作用。目前,诸如黄芪多糖注射液、人参多糖注射液、茯苓多糖口服液等多糖类制剂已广泛应用于临床,亦有诸如甘草多糖、川牛膝多糖、刺五加多糖等中药多糖由于其较强的生物活性,受到广泛关注与研究。与此同时,中药多糖类成分及其制剂作用机制的阐明及符合临床标准的制剂开发越发引起学界重视。然而由于中药多糖结构的复杂性,增加了中药多糖结构分析的难度,中药多糖及其制剂稳定性和质量控制研究的报道尚不多见。这阻碍了多糖新药的开发研究,降低了多糖的应用价值。该文从中药多糖的分类、应用现状及分析方法等不同角度入手对中药多糖及其制剂稳定性研究现状进行了综述,旨在为中药多糖类成分的成药性开发及其质量控制提供有效依据。
2019年22期 v.44 4793-4799页 [查看摘要][在线阅读][下载 162K] [引用频次：0 ] |[下载次数：90 ] - 魏珍珍;方晓艳;樊帅珂;彭孟凡;白明;苗明三;
由于中枢神经系统疾病发病率不断增加,特别是脑中风发病率以及死亡率不断增加,脑靶向给药日益受到重视。鼻腔给药作为脑靶向给药的途径之一,可有效地使药物绕过血脑屏障,靶向递送到脑部,为中枢神经系统疾病的治疗提供了新的思路,是一种极有发展前景的给药途径。中药经鼻给药治疗脑病已经成为近年来中药研究的热点。缺血性脑中风是危害人类健康的重要疾病之一,通过鼻腔给药治疗中风已有几千年的历史,现代医学研究证明,鼻腔与大脑间存在着微妙的联系,鼻腔复杂而巧妙的结构为药物经鼻入脑提供了可能。药物经鼻腔给药应用于以缺血性脑中风为代表的中枢神经系统疾病具有明显的优势。鼻腔给药具有非侵入、低感染、吸收迅速、脑靶向性等特点。笔者将从解剖学和生理学方面阐述鼻腔给药脑靶向的理论基础,对药物经鼻入脑的转运通路,"鼻-脑"通路的体外、体内实验研究基础,中药鼻腔给药防治脑缺血的临床应用等方面进行综述。为更好地研究药物经"鼻-脑"通路防治脑缺血损伤提供参考,并为"鼻-脑"通路研究的深入奠定基础。
2019年22期 v.44 4800-4805页 [查看摘要][在线阅读][下载 165K] [引用频次：0 ] |[下载次数：15 ]
- 陈芙蓉;郭巧生;杨锋;朱再标;汪涛;
通过发掘ITS2二级结构所隐藏的额外系统发育信息,运用ITS2片段作为DNA条形码,探讨利用ITS2核酸序列和ITS2二级结构信息识别野菊及其近缘种的可能性。提取12份样品的基因组DNA,对ITS2片段进行PCR扩增、双向测序,获得ITS2序列信息,并从GenBank上下载野菊近缘种序列28条,对所有40条ITS2序列进行比对,ITS2二级结构预测及结构比较,ITS2二级结构信息编码,ITS2结构数据信息与核酸信息分析,构建MP系统进化树。结果显示,所有ITS2序列的二级结构共有模型为典型的一环四臂结构,不仅具有植物中ITS2二级结构的共性特征,还具有较多其他保守序列,其整体保守性较高;样品间的ITS2二级结构具有明显差异;联合矩阵的变异位点数与核酸序列相比增加了近90%,极大丰富了变异位点信息量;其信息分析将野菊与其近缘种区分开,明显提高了进化树支系的支持率和物种的鉴别率;虽然未能区分开紫花野菊和药用菊2个物种,但有效鉴别出黄花小山菊、小山菊和异色菊。因此,作者建议将ITS2序列结合其二级结构数据信息的分析方法运用于野菊及其近缘种的鉴别研究,并广泛推广到DNA条形码研究中。
2019年22期 v.44 4813-4819页 [查看摘要][在线阅读][下载 528K] [引用频次：0 ] |[下载次数：13 ] - 张声祥;施圆圆;单春苗;王涛;汪振兴;汪胜松;吴家文;
蕲蛇是一种传统名贵中药材,具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、镇痛等药理作用,临床主要用于治疗类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、干燥综合征和肿瘤等疾病。蕲蛇毒腺中分泌的蛇毒蛋白具有凝血、抗癌、抗栓、改善微循环和神经毒性等功能。为挖掘蕲蛇中蛇毒蛋白功能基因,利用基因工程技术在体外实现大量蛇毒蛋白的表达和纯化,该研究利用高通量测序平台对蕲蛇毒腺进行了转录组测序,组装获得了32 862条unigene,其中26 589条被公共数据库成功注释,2 695条被注释到62个转录因子家族中,并且预测出5 920个SSR位点。对分泌性磷脂酶A_2和C型凝集素进行序列分析和同源建模,结果显示分泌性磷脂酶A_2是同源二聚体,每个单体中包含5个保守的氨基酸构成了酶的催化活性中心; C型凝集素则有一个保守的糖基化结合位点,可以特异结合N-乙酰-D-葡萄糖胺。该研究对蕲蛇毒腺进行转录组测序,为蕲蛇毒腺中蛇毒蛋白功能的研究奠定了基础,将促进蕲蛇基因资源的开发和利用。
2019年22期 v.44 4820-4829页 [查看摘要][在线阅读][下载 582K] [引用频次：0 ] |[下载次数：8 ] - 李雯瑞;白朕卿;刘景玲;梁宗锁;
GRAS转录因子在调控植物根生长与GA信号通路中起着重要作用。该研究克隆得到了SmGRAS3基因,其开放阅读框2 247 bp,编码748个氨基酸。运用生物信息学软件对该基因编码的蛋白进行了理化性质与结构分析。该基因属于GRAS家族中的SCL9亚家族,其启动子序列主要包含光响应、胁迫响应与激素响应等元件,并可能与GA信号通路及抗逆反应相关蛋白互作。亚细胞定位显示SmGRAS3蛋白主要定位于细胞核。表达模式分析结果显示该基因的表达量在根中最高,茎中最低,光和低温均会诱导SmGRAS3的高表达。该研究为进一步探讨SmGRAS3基因在丹参根生长与抗逆过程中的作用奠定了基础。
2019年22期 v.44 4830-4836页 [查看摘要][在线阅读][下载 426K] [引用频次：0 ] |[下载次数：11 ] - 孙思雅;方昀;来梦茹;葛宇清;张光霁;程汝滨;
利用性状鉴别与DNA条形码联用的方法对药用海马棘海马进行系统研究,为棘海马快速准确的鉴定奠定基础。结合文献与样品观察获得的棘海马典型鉴别特征包括棘刺发达、短吻,具有单或双颊刺,育儿袋接壤的棘刺更加尖锐。提取棘海马和其他海马样品的基因组总DNA,对COⅠ和ATP6基因序列进行PCR扩增和双向测序,通过Blast对序列的准确性进行检验,利用MEGA 7计算序列的GC量,种内种间距离以及采用邻接法构建NJ系统发育树。结果显示,COⅠ序列和ATP6序列长度分别为649 bp和602～603 bp,GC碱基平均量分别为39. 96%,35. 37%,COⅠ序列和ATP6序列的最小种间遗传距离均大于最大种内遗传距离,存在明显的条形码间隔。基于COⅠ基因序列和ATP6基因序列构建的NJ系统发育树结果显示,棘海马样品单独聚为一个大分支,明显区分于其他海马样品,且与线纹海马亲缘最近。此外棘海马的种内存在3个稳定的亚群结构,提示COⅠ和ATP6序列可用于后续棘海马的地理生态学研究。该研究表明,通过性状鉴别和DNA条形码序列联用的方法确定了棘海马的典型性状和分子鉴别特征,为棘海马的准确鉴定和后续应用提供了技术保证,并为扩大海马药用资源和保证海马药材临床用药安全提供了新的依据。
2019年22期 v.44 4837-4843页 [查看摘要][在线阅读][下载 309K] [引用频次：0 ] |[下载次数：16 ]
- 邵静媛;郭俊林;郭尚鑫;舒志恒;瞿海斌;龚行楚;
采用分析质量源于设计(AQb D)过程,以高效液相色谱-紫外检测技术建立了三叶糖脂清汤剂的定量指纹图谱分析方法。首先确定需要优化的方法参数为柱温、流速和流动相梯度条件,再通过确定性筛选设计明确关键方法评价指标(CMAs)为峰个数、共有峰面积占总峰面积的百分比和最后一个峰的保留时间,然后采用逐步回归法建立CMAs与方法参数的定量模型。以模拟实验测定误差法计算基于达标概率的设计空间并成功验证。优化分析条件后,定量测定绿原酸、芍药苷、芦丁、金丝桃苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和丹酚酸B 6种成分。指纹图谱中含共有峰19个,共有峰面积占总峰面积比例为96%。指纹图谱和定量检测分析方法均通过方法学考察,并用于新样品测定。
2019年22期 v.44 4844-4851页 [查看摘要][在线阅读][下载 280K] [引用频次：0 ] |[下载次数：22 ] - 王珊;李友连;朱晶晶;梁耀华;王智民;
该文对亳菊硫磺熏蒸过程中硫磺的剂量对亳菊褐变酶活性和化学成分的影响及其相关性进行了研究。采用紫外分光光度法测定了0,4,8,16,50,150,200 g·kg~(-1)(硫磺量/鲜亳菊量) 7个不同剂量硫熏亳菊样品中褐变酶——多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性;同时采用HPLC测定这7个不同剂量硫熏亳菊样品中7种化学成分的含量。通过褐变酶的活性和化学成分的含量、菊花的外观性状等综合评价不同硫熏剂量对亳菊品质的影响。结果发现随着硫熏剂量增加,亳菊中PPO,POD酶活性显著降低,当硫熏剂量为4 g·kg~(-1)时,PPO,POD酶活性显著降低,当硫熏剂量大于8 g·kg~(-1)时,PPO酶即可达到完全失活。考察不同硫熏剂量对化学成分的影响,通过比较发现,硫熏剂量为8 g·kg~(-1)时,绿原酸的质量分数要高于4 g·kg~(-1)和未硫熏的样品,此后增加硫熏剂量,绿原酸的含量不变;推测其主要原因为亳菊在采收时鲜花组织被破坏,导致褐变氧化酶被激活,而硫磺熏蒸过程明显降低了褐变氧化酶的活性,从而阻止了反应底物(绿原酸和异绿原酸等)中的酚转化为醌类物质,使得奎宁酸类成分得以较好的保留,但是当硫熏剂量达到8 g·kg~(-1)或16 g·kg~(-1)时,奎宁酸类成分含量不再变化,表明此时硫熏已达到饱和剂量。同样,硫熏剂量较高时,亳菊中黄酮类成分木犀草苷含量高,而其他黄酮苷元类成分的含量低,推测硫熏抑制了亳菊体内水解酶的活性,减少了黄酮苷水解为苷元,其反应机理有待进一步深入验证。该研究发现硫磺熏蒸虽然可以明显抑制褐变,但是不同剂量硫熏对亳菊样品化学成分影响差异较大,影响药材质量的均一性和疗效的稳定性,过度使用硫磺易造成亳菊药材有大量SO2残留,因此不同硫熏剂量对菊花品质的影响显著,生产中不建议采用;小剂量硫熏即可达到防止酶促褐变,当硫磺剂量增加到一定程度,可达饱和状态,在迫不得已需要硫熏时,建议小剂量使用。该文通过研究,明确了硫熏剂量与酶活性、菊花主要化学成分的相关性,为规范菊花采收加工,保证其品质提供指导。
2019年22期 v.44 4852-4856页 [查看摘要][在线阅读][下载 150K] [引用频次：0 ] |[下载次数：11 ] - 郭思旖;陈桂添;时军;吴艳婷;赖建辉;许小琪;
研制具有防治增生性瘢痕药效的丹皮酚-蜗牛黏液纳米凝胶(PAE-HAM-Gels),对其皮肤穿透能力、真皮滞留量及刺激性进行评价,并初步考察其对兔耳增生性瘢痕的防治作用。采用改良Franz扩散池,分别以离体乳猪、SD大鼠及KM小鼠腹部皮肤进行离体透皮实验,考察丹皮酚真皮滞留量、透皮速率及累积透过率,并绘制体外渗透曲线;采用同体左右对比法,选取新西兰兔背部正常皮肤连续给药7 d,HE染色后光镜下观察皮肤生理状态;建立兔耳增生性瘢痕模型,将新西兰兔随机分为空白组、模型组、阳性药物组、PAE-Gels组与PAE-HAM-Gels组,连续给药28 d后计算各组的瘢痕增生率及瘢痕增生指数(SEI),取瘢痕组织进行Masson染色,光镜下观察胶原纤维及肌纤维增生情况,检测各组TGF-β1的表达水平。PAE-HAM-Gels在水溶液中的Qn较符合Higuchi方程,其在不同动物皮肤的透皮速率、累积透过量及真皮滞留量均高于PAE-Gels;给药组皮肤完整,未出现红斑、水肿等现象,光镜下观察表皮细胞排列整齐,厚薄均匀,皮下组织排列整齐,与空白组对比无差异; PAEHAM-Gels组的瘢痕增生率为62. 50%,SEI为2. 17±0. 33,TGF-β1为(815. 4±34. 69) ng·L~(-1),与模型组差异具有统计学意义(P<0. 01); Masson染色显示,与模型组相比,PAE-HAM-Gels组胶原纤维与肌纤维数目较少且排列疏松整齐,软骨细胞排列较规则,炎症细胞及微血管数目较少。PAE-HAM-Gels安全性好,透皮性能及真皮滞留能力良好,对兔耳增生性瘢痕具有良好的防治作用。
2019年22期 v.44 4857-4863页 [查看摘要][在线阅读][下载 377K] [引用频次：0 ] |[下载次数：20 ]
- 卢小锋;林鹏程;訾佳辰;樊晓娜;
采用硅胶柱色谱、Pharmadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色谱以及HPLC色谱对印楝干燥种子95%乙醇提取物中的柠檬苦素类化合物进行分离纯化,并运用波谱方法对所分离的化合物进行结构鉴定,得到15个该类化合物:nimbocinol(1),17β-hydroxynimbocinol(2),1α,3α,7α-triacetylvilasinin(3),7α-benzoyltrichilinin(4),1,3-diacetyl-7-tigloyl-12-hydroxyvilasinin(5),3-deacetylsalannin(6),1-O-acetyl-1-detigloylsalannin (7),2'(R),3'-dihydrosalannin (8),2'(S),3'-dihydrosalannin (9),2,3-dihydronimbolide (10),6-homodesacetylnimbin (11),gedunin (12),7-deacetyl-7-epi-dihydrogedunin (13),7-deacetoxy-7α-hydroxygedunin(14)和nimbinene(15)。化合物7为新天然产物,化合物4,8,9,13和14为首次从印楝属中分离得到。在体外抗菌活性筛选中,化合物2对大肠杆菌和表皮葡萄球菌具有一定抑制活性,MIC分别为32,128 mg·L~(-1)。化合物10对表皮葡萄球菌有中等抑制活性,MIC为64 mg·L~(-1)。化合物11对大肠杆菌和绿脓杆菌有一定抗菌活性,MIC为128 mg·L~(-1)。化合物15对绿脓杆菌有一定抑菌活性,MIC为128 mg·L~(-1)。
2019年22期 v.44 4864-4873页 [查看摘要][在线阅读][下载 294K] [引用频次：0 ] |[下载次数：13 ] - 田丹丽;梁春坡;罗刚;陈虹;
该文以鬼臼毒素或4'-去甲基表鬼臼毒素为先导化合物,通过药物设计拼合原理,以鬼臼毒素或4'-去甲基表鬼臼毒素和醛类化合物为起始原料,设计合成了一系列含亚胺结构的鬼臼毒素衍生物,以期望得到高效低毒的抗肿瘤化合物。合成了9个目标化合物6a～6i,其结构经~1H-NMR,HR-ESI-MS及熔点测定分析确证。以依托泊苷为阳性对照,采用MTT法考察了9个目标化合物对人宫颈癌细胞HeLa细胞的生长抑制活性。结果表明目标化合物6b,6d,6e,6f,6g,6i的生长抑制活性均优于阳性对照药VP-16,对进一步开展鬼臼毒素的结构改造和抗肿瘤活性研究具有一定的参考价值,值得深入研究。
2019年22期 v.44 4874-4879页 [查看摘要][在线阅读][下载 223K] [引用频次：0 ] |[下载次数：19 ] - 王璇璇;李晓波;彭崇胜;
运用高分辨电喷雾串联质谱(HR-ESI-MS/MS)测定芹菜素-6,8-C-二葡萄糖苷(1)、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-鼠李糖苷(2)正、负2种离子模式下的一、二级质谱,根据精确质荷比确定各离子的元素组成,对碎片离子和裂解途径进行全面解析,探讨芹菜素-6,8-二碳糖苷共同诊断离子、不同糖基特征离子和裂解规律。结果发现负离子电喷雾质谱[ESI(-)-MS]碎片离子m/z 353,325,311,297和正离子电喷雾质谱[ESI(+)-MS]碎片离子m/z 355,325,307,295可作为芹菜素-6,8-C-二葡萄糖苷诊断离子; ESI(±)-MS母离子产生不同的中性丢失可用于区分不同糖基取代,如葡萄糖的C_4H_8O_4(120),C_3H_6O_3(90),C_2H_4O_2(60),鼠李糖的C_4H_8O_3(104),C_3H_6O_2(74),C_2H_4O(44)中性丢失; ESI(-)-MS仅见脱去1分子水,ESI(+) MS则出现连续脱去5～6分子水生成系列脱水碎片离子,可用于不同糖基取代的鉴别; ESI(+)-MS出现连续CH_2O分子中性丢失,ESI(-)-MS未观测到; ESI(-)-MS脱CO发生在侧链,ESI(+)-MS脱CO发生在母核; ESI(+)-MS丢失4个碳单位中性分子(C_4H_8O_4,C_4H_8O_3)优先发生在8C-糖基。以上质谱裂解规律和诊断离子应用于铁皮石斛茎提取物成分分析,通过UPLC-Q-TOF-HRESIMS/MS各峰一、二级质谱数据解析,鉴定出4个黄酮碳苷类成分芹菜素-6,8-C-二葡萄糖苷,芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷,芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷,芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-阿拉伯糖苷和和1个黄酮氧苷芦丁。
2019年22期 v.44 4880-4887页 [查看摘要][在线阅读][下载 353K] [引用频次：0 ] |[下载次数：12 ] - 木盼盼;安琪;张彦昭;郭龙;郭梅;郑玉光;张丹;
建立葛根中9个异黄酮含量测定的一测多评方法,并验证该方法的准确度及可行性。采用高效液相色谱法(HPLC),以葛根素为内标物,建立3'-羟基葛根素、葛根素芹菜糖苷、3'-甲氧基葛根素、葛根素-6″-O-木糖苷、大豆苷、染料木苷、芒柄花素和大豆苷元与葛根素的相对校正因子,计算与其他8种成分的质量分数。同时采用外标法和一测多评法分别测定11批样品中的9个异黄酮的含量,比较外标法与一测多评法的结果,以验证一测多评方法的准确性及可行性。实验结果表明,在不同的实验条件下相对校正因子重现性好,9个成分的外标法与一测多评法的含量测定结果无显著差异。因此,以葛根素为内标物,同时测定3'-羟基葛根素、葛根素芹菜糖苷、3'-甲氧基葛根素、葛根素-6″-O-木糖苷、大豆苷、染料木苷、芒柄花素和大豆苷元的一测多评法准确可行,可用于葛根药材的质量控制。
2019年22期 v.44 4888-4895页 [查看摘要][在线阅读][下载 203K] [引用频次：0 ] |[下载次数：23 ]
- 颜美秋;苏洁;俞静静;杨志远;王婷;陈素红;吕圭源;
目前铁皮石斛降压作用研究侧重于对血压单指标的作用,且多认为粗多糖是其药效物质基础。该实验采用高糖高脂复合饮酒致代谢性高血压大鼠模型,明确铁皮石斛粗多糖及醇提取物对代谢性高血压大鼠血压及糖脂紊乱的作用及特点,并进一步阐述醇提取物的物质基础,为铁皮石斛粗多糖外成分的综合利用提供依据。实验模拟人类"过食肥甘醇酒",采用高糖高脂复合饮酒复制代谢性高血压大鼠模型,以血压-血糖-血脂为综合指标评价铁皮石斛粗多糖及醇提物的作用,明确各自作用特点。进一步采用上述大鼠模型,筛选醇提取物的有效部位,考察有效部位长期给药对血液流变学、氧化相关指标及血管结构方面的作用,并采用HPLC-DAD-MS鉴别和归属有效部位的主要成分。与模型组相比,铁皮石斛粗多糖和醇提取物均能显著降低模型大鼠SBP和Glu,此外醇提取物还能显著降低TG。醇提取物3个不同极性萃取部位中,中等极性的正丁醇部位能稳定且持久地降低SBP,且能同时降低TG,Glu,UA水平;长期给药能显著降低模型大鼠全血还原黏度,降低模型大鼠血清MDA水平、升高GSH-Px水平,并提高总抗氧化能力,减轻主动脉胶原沉积及中膜重构。经HPLC-DAD-MS鉴别和归属得到芹菜素为苷元的黄酮碳苷类8个,槲皮素为苷元的黄酮氧苷1个。综上,铁皮石斛醇提物对代谢性高血压具有综合改善作用,富含特征性芹菜素为苷元的黄酮碳苷类成分的中等极性部位是其药效部位。
2019年22期 v.44 4896-4904页 [查看摘要][在线阅读][下载 357K] [引用频次：0 ] |[下载次数：55 ] - 石丹宁;崔丽霞;赵丕文;孙丽萍;陈梦;牛建昭;
基于G蛋白偶联雌激素受体(GPER)及其介导的PI3K/AKT途径探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)诱导人乳腺癌细胞凋亡的效应及其分子机制。选用核ER阴性、GPER阳性人乳腺癌SKBR-3细胞,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测CPT对细胞凋亡率的影响,Western blot法检测CPT对凋亡效应蛋白caspase-3表达的影响; Western blot及免疫荧光技术检测CPT对GPER介导的PI3K/AKT通路上关键蛋白表达的调控效应;同时,为进一步明确GPER介导的PI3K/AKT信号通路在CPT诱导SKBR-3细胞凋亡中的作用,选用GPER特异性激动剂G1、特异性拮抗剂G15及PI3K特异性抑制剂LY294002进行干预。结果显示,5,10μmol·L~(-1)CPT作用48 h后,SKBR-3细胞的凋亡率上升为46. 1%,69. 0%(P<0. 01),caspase-3表达则随着CPT浓度增加而升高(P<0. 01)。PI3K,AKT,p-AKT蛋白表达均可被CPT抑制(P<0. 05或P<0. 01),G1与5μmol·L~(-1)CPT联合作用48 h后可见AKT与p-AKT的表达量进一步降低(P<0. 05),而G15与5μmol·L~(-1)CPT联合作用后AKT与p-AKT表达的下降被明显抑制(P<0. 05); 1μmol·L~(-1)LY294002干预下,可见AKT,p-AKT的表达受到了更为明显的抑制(P <0. 01)。AKT与p-AKT的荧光表达强度同样能够受到CPT抑制,G1,G15,LY294002的干预与Western blot结果一致(P <0. 05或P <0. 01)。此外,CPT对SKBR-3细胞中GPER表达具有一定的抑制效应(P<0. 01),加入G1可相对抑制CPT对GPER表达的下调作用;加入G15可使CPT对GPER表达的抑制作用进一步增强。综上,隐丹参酮可诱导人乳腺癌SKBR-3细胞凋亡,其分子途径可能与隐丹参酮对GPER表达及其介导的PI3K/AKT信号通路的调控作用有关。
2019年22期 v.44 4905-4911页 [查看摘要][在线阅读][下载 432K] [引用频次：0 ] |[下载次数：101 ] - 宗佳琪;王烁阳;苏萍;孙贝贝;郭马娣;刁光华;王静;王海华;
通过腹腔注射细菌脂多糖复制内毒血症大鼠模型,观察雷公藤甲素(triptolide,TP)对其心血管功能的作用及其可能作用机制。将雄性SD大鼠随机分成6组:正常组(NC组)、内毒血症模型组(LPS组)、TP低浓度干预组(LPS+TP-L组)、TP中浓度干预组(LPS+TP-M组)、TP高浓度干预组(LPS+TP-H组)和多黏菌素B组(LPS+PMX-B组)。用LPS 10 mg·kg~(-1)腹腔注射处理6 h复制内毒血症大鼠模型。TP干预组在大鼠腹腔注射LPS前15 min进行预处理。各组大鼠行颈总动脉插管测量血流动力学指标,检测各组大鼠血清中BNP,CK-MB,c Tn-Ⅰ的含量;血浆中TNF-α和IL-6的含量;大鼠心肌组织中p65的含量,胸主动脉血管组织中i NOS,e NOS,TLR4,p65的含量。与NC组比较,LPS组大鼠血流动力学指标均显著下降,血清中BNP,CK-MB,c Tn-Ⅰ的含量,血浆中TNF-α和IL-6的含量,心肌组织中p65的含量,血管组织中i NOS,e NOS,TLR4,p65的含量均明显增高。与LPS组相比,LPS+TP-M组、LPS+TP-H组与LPS+PMX-B组大鼠血流动力学指标均显著改善;各组大鼠血清中BNP,CK-MB,cTn-Ⅰ的含量,血浆中TNF-α和IL-6的含量,心肌组织中p65的含量,血管组织中i NOS,eNOS,TLR4,p65的含量均显著降低。雷公藤甲素呈剂量依赖性保护内毒血症大鼠心血管功能损伤作用,可能是通过TLR4/NF-κB p65信号通路改善内皮功能实现的。
2019年22期 v.44 4912-4917页 [查看摘要][在线阅读][下载 258K] [引用频次：0 ] |[下载次数：13 ]
- 毕欣宁;戚婧;黄运芳;魏桂杰;张婷;王宏雅;王淑琪;李志慧;郑伟;汪祺;张玉杰;
建立超高效液相色谱-串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)同时测定大鼠脑、肝、肾、肾上腺、血清和尿液中8种神经递质的含量,包括五羟色胺、五羟吲哚乙酸、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、谷氨酸、γ-氨基丁酸、乙酰胆碱,并以此考察神经递质在大鼠组织和血、尿中的分布特性。选用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 7μm),以0. 3%甲酸水-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,采用大气压电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应监测(MRM)扫描方式建立神经递质的液质方法并进行方法学研究;将正常大鼠血浆、尿及组织经匀浆、离心、除蛋白等前处理后的上清液2μL进样分析。结果显示8种神经递质可在7 min内准确测定,线性相关系数均大于0. 99,准确度高,精密度良好,专属性、稳定性、提取回收率和基质效应等均符合生物样品分析要求;在大鼠脑、肝、肾、肾腺、血、尿中含量最多的递质分别是γ-氨基丁酸、谷氨酸、谷氨酸、肾上腺素、谷氨酸和多巴胺。该方法灵敏快捷、精密准确、专属稳定,可用于生物样品中8种神经递质的同时定量分析。考察递质在大鼠体内的分布比例关系对疾病的防治具有重要意义。
2019年22期 v.44 4918-4923页 [查看摘要][在线阅读][下载 184K] [引用频次：0 ] |[下载次数：92 ] - 王璐;范珊珊;徐风;刘广学;尚明英;蔡少青;
该实验通过高效液相色谱-二极管阵列-电喷雾-离子阱-飞行时间质谱联用(HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MS~n)技术,对当归乙醇提取物正丁醇和水溶性部位的主要成分及其在大鼠体内的代谢产物进行分析。采用Agilent Zorbax SB-C18(4. 6 mm×250 mm,5μm)的色谱柱,以柱温为28℃,流动相为0. 1%甲酸水-甲醇(梯度洗脱),流速为1. 0 m L·min~(-1),检测波长为280 nm的条件进行样品分析。通过对当归正丁醇和水溶性部位中的成分进行分析,共指认25个化合物,其中11个苯酞糖苷类成分为当归中首次报道;从大鼠含药尿液中共指认出19个化合物,包括2个原形成分和17个代谢产物,其中17个代谢产物为新代谢产物。HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MS~n能准确、快速地指认药材提取物中主要成分及生物样品中的代谢产物,该实验的研究结果为阐明当归的药效物质及显效形式(原形、代谢产物或两者兼有)提供了科学依据。
2019年22期 v.44 4924-4931页 [查看摘要][在线阅读][下载 304K] [引用频次：0 ] |[下载次数：95 ] - 周严严;顾欣如;李涛;边宝林;王宏洁;司南;赵海誉;
该研究建立了大鼠灌胃蒲地蓝消炎口服液(PDL)后血浆中黄芩苷、汉黄芩苷和紫堇灵的LC-MS含量测定方法,分析了3个成分在大鼠体内的药代动力学过程,并探讨了PDL对大鼠肝脏中药物代谢酶的影响。液相色谱分离采用C18色谱柱;流动相为乙腈-水(含0. 2%甲酸),梯度洗脱;质谱检测采用电喷雾(ESI)离子源,多反应监测模式(MRM),正负离子交替模式检测。使用小动物自动采血仪进行血浆样品采集。Win Nonlin软件计算药代动力学参数。BCA法和分光光度法测定大鼠肝微粒体总蛋白浓度和CYP450总酶含量。方法学经专属性、线性范围、回收率、精密度和样品稳定性等考察,确证该实验建立的LC-MS分析方法简单、专属、准确、可靠,可满足大鼠灌胃PDL后血浆中黄芩苷、汉黄芩苷和紫堇灵的含量测定需求。药时曲线显示黄芩苷和汉黄芩苷有双峰现象,药代动力学参数表明PDL中黄芩苷、汉黄芩苷和紫堇灵具有一定的类药属性。PDL连续服用7 d,大鼠肝脏系数、肝微粒总蛋白和CYP450酶含量有升高趋势但是无显著性差异,表明PDL基于CYP酶发生药物-药物相互作用的可能性较小。该实验结果可为PDL体内药效及药物相互作用研究和临床应用提供参考。
2019年22期 v.44 4932-4939页 [查看摘要][在线阅读][下载 197K] [引用频次：0 ] |[下载次数：178 ] - 夏伯候;白璐;张英帅;熊苏慧;李亚梅;林丽美;龚云;
采用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、β溶血链球菌等混合菌体制备盆腔炎性疾病大鼠模型,基于气相色谱-质谱(GCMS)检测技术结合PCA,PLS-DA和OPLS-DA等多元统计分析方法的代谢组学方法,分析妇科千金胶囊对大鼠血清中内源性小分子代谢物的影响。结果发现妇科千金胶囊可显著改善模型大鼠的炎症性病理特征和组织损伤;基于VIP>1和P<0. 05的原则筛选得到6个共有的差异标志物,分别是:L-缬氨酸(L-valine),L-异亮氨酸(L-isoleucine),L-苏氨酸(L-threonine),丁二酸(butanedioic acid)、丝氨酸(serine)和D-葡萄糖(D-glucose)。给药后这6个差异代谢物的含量均有显著回调,进一步通过KEGG等数据库进行代谢物通路分析,显示妇科千金胶囊可能通过影响甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢途径、氨基酰tRNA合成途径以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸合成途径达到治疗的作用,提示妇科千金胶囊可能通过调控氨基酸及其衍生代谢等途径治疗混合菌诱导的盆腔炎。
2019年22期 v.44 4940-4946页 [查看摘要][在线阅读][下载 473K] [引用频次：0 ] |[下载次数：42 ] - 于现阔;罗寒燕;鲁亚奇;张晓;吴宏伟;唐力英;王祝举;
首次建立了UPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷(QGG)和芥子酸的浓度,并用于炮制对葶苈子中这2个药效成分的药代动力学影响研究。以沙苑子苷A为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白,UPLC-MS/MS分析,方法经专属性、线性范围、准确度、精密度、提取回收率和基质效应、稳定性等确证该方法可靠,适用。分别灌胃给予等量生药量的生品或炮制品葶苈子60%乙醇提取物后,于不同时间点采血,测定血药浓度,采用DAS 3. 2. 6软件非房室模型法计算药代动力学参数,SPSS 23. 0进行统计学分析,绘制血药浓度-时间曲线图。结果显示,炮制品组QGG各药代动力学参数较生品组无显著性差异,而芥子酸曲线下面积较生品组显著升高,平均驻留时间延长。结果表明,炮制有利于葶苈子中芥子酸的吸收,并减缓排泄时间,对QGG的吸收程度无明显影响。
2019年22期 v.44 4947-4952页 [查看摘要][在线阅读][下载 209K] [引用频次：0 ] |[下载次数：13 ]
- 杨昊昕;苟金;黄坡;戴雁彦;张秀文;辛玉;赵国桢;李博;
系统评价八宝丹胶囊联合常规治疗对病毒性肝炎的疗效和安全性。检索中国知网数据库(CNKI)、万方数据资源系统、维普中文科技期刊全文数据库(VIP)、中国生物医学文献服务系统(Sino Med)、PubMed和Cochrane图书馆,检索时限均从建库至2018年11月11日。由2名研究者独立根据纳排标准筛选文献、提取资料,采用根据GRADE系统推荐分级方法,对纳入研究的质量进行严格评价和资料提取,对符合标准的RCT进行Meta分析。共纳入6篇随机对照试验,包含受试者520名,干预措施为八宝丹胶囊加常规治疗,对照措施为单纯使用常规治疗。结果显示,八宝丹胶囊联合常规治疗在降低总胆红素(MD=-16. 25,95%CI[-19. 86,-12. 63])、丙氨酸氨基转移酶(MD=-26. 62,95%CI[-41. 18,-12. 06])、总胆汁酸(MD=-46. 02,95%CI[-49. 18,-42. 85])及提高临床有效率(RR=1. 34,95%CI[1. 13,1. 59])方面显著优于单纯常规治疗。此外,八宝丹胶囊联合常规治疗可在一定程度上延缓肝纤维化进展,定性分析结果显示联合治疗方案缓解临床症状的疗效更加明显。在升高白蛋白、凝血酶原活动度的疗效上2种方案间无明显差异。在常规治疗的基础上联合使用八宝丹胶囊并无不良反应发生。该研究发现,针对病毒性肝炎患者,与单纯西医常规治疗相比,联合使用八宝丹胶囊在降低总胆红素、丙氨酸氨基转移酶和总胆汁酸水平方面更具优势,且对病毒性肝炎患者的临床症状具有更显著的改善作用,临床有效率明显提高,无严重不良反应发生,临床可考虑辨证使用。限于原始研究数量和质量的问题,仍需更多多中心、高质量的随机对照试验进一步加以证实。
2019年22期 v.44 4953-4961页 [查看摘要][在线阅读][下载 410K] [引用频次：0 ] |[下载次数：5 ] - 李盼盼;谢雁鸣;师伟;王连心;
评价康妇消炎栓治疗盆腔炎性疾病的有效性和安全性。系统全面检索CNKI,VIP,Wan Fang,Sino Med中文数据库和Cochrane Library,Medline,Clinical Trail.gov英文数据库,检索时间为各数据库建库至2018年6月。按照预先设定的纳排标准筛选出康妇消炎栓治疗盆腔炎性疾病的随机对照试验,应用Cochrane风险评估工具进行研究质量评价,提取数据并运用RevMan 5. 3软件进行Meta分析。共检索出675篇文献,最终纳入56个研究,总样本量6 228例,试验组3 267例,对照组2 961例,所纳入研究总体质量普遍偏低。根据干预措施、结局指标将纳入研究分为不同的亚组进行分析。Meta分析主要结果:康妇消炎栓联合抗生素治疗盆腔炎性疾病复发率低于单用抗生素;康妇消炎栓联合抗生素在缓解腹痛症状、白带异常好转时间、腹部包块吸收时间、疼痛好转时间方面优于单用抗生素。安全性方面,康妇消炎栓联合抗生素不良反应发生率低于单用抗生素。该分析结果表明康妇消炎栓治疗盆腔炎性疾病具有一定疗效,尤其康妇消炎栓联合抗生素复发率低于单用抗生素,远期效果显著。未见严重不良反应发生。但受所纳入研究质量限制,上述结论还需进一步开展高质量、大样本、多中心的临床研究以进行验证。
2019年22期 v.44 4962-4974页 [查看摘要][在线阅读][下载 732K] [引用频次：0 ] |[下载次数：215 ] - 孙元隆;阮小芬;李益萍;王肖龙;
电子文献检索中国知网、万方、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普、PubMed、Cochrane Library。检索关键词筛选符合条件的研究,根据量表评价文献质量,应用Rev Man 5. 3软件进行Meta分析、亚组分析,应用Stata 12. 0软件进行Meta回归,经上述方法系统性评价芪苈强心胶囊治疗缺血性心力衰竭在有无辨证用药2种情况下疗效区别。共纳入22项研究,共计1 942例患者,文献质量偏低。Meta分析结果显示:与单纯使用西药常规治疗相比,西药常规治疗加用芪苈强心胶囊,能提高缺血性心力衰竭的临床疗效(RR=1. 21,95%CI[1. 16,1. 27],P<0. 000 01),且辨证用药组的合并效应量大于无辨证组(P=0. 03,I~2=78. 9%),Meta回归结果(sig=0. 9,P=0. 057);左室射血分数(WMD=7. 28,95%CI[5. 18,9. 38],P<0. 000 01),且辨证用药组的合并效应量大于无辨证组(P=0. 01,I~2=83. 2%),Meta回归结果(I~2=81. 09%,R2=29. 08%,sig=0. 47,P=0. 029);6 min步行试验(WMD=33. 20,95%CI[24. 70,41. 70],P <0. 000 01);左室舒张末期内径(WMD=-4. 61,95%CI[-5. 38,-3. 84],P<0. 000 01);左室舒张末期容积(WMD=-34. 43,95%CI[-38. 81,-30. 05],P <0. 000 01);左室收缩末期容积(WMD=-9. 60,95%CI[-13. 16,-6. 05],P<0. 000 01);芪苈强心胶囊组描述11例不良反应,对照组描述20例不良反应,均可耐受,未发现有明显肝肾功能异常。缺血性心力衰竭患者应用芪苈强心胶囊安全有效,较单纯常规治疗可进一步提高临床疗效。结合辨证论治应用芪苈强心胶囊疗效较不辨证用药更显著,提示临床用药辨证施治疗效更佳。上述结论仍需建立在更多高质量、大样本量的文献基础上加以论证。
2019年22期 v.44 4975-4984页 [查看摘要][在线阅读][下载 618K] [引用频次：0 ] |[下载次数：14 ] - 张彧;吴东升;徐寅;喻斌;
整理分析中西医结合治疗幽门螺杆菌(Hp)相关性胃病中的中药用药规律,为临床治疗Hp相关性胃病提供参考。检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据知识服务平台(Wan Fang)、维普网(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)中中西医结合治疗Hp相关性胃病的文献为数据源,筛选并用Excel软件和中医传承辅助平台建立方剂数据库进行统计分析及挖掘用药规律。共纳入合格文献178篇,其中77篇明确中医证型,脾胃湿热证出现频次最高;共使用方剂207次,其中经典方剂使用100次,半夏泻心汤使用频次最多;共使用中药3 027次,包括不同中药207味,使用频次前三的单味中药分别是甘草、黄连、半夏。中药四气以寒温并见,五味以苦辛居多,多归属于脾经、胃经和肝经;运用数据挖掘技术挖掘核心药物组合21个,得到新方12首。运用数据挖掘技术可以发现治疗Hp相关性胃病主要从"驱邪"及"补虚"两方面进行,同时注重调畅气机,用药具有寒温并用、辛开苦降的配伍特点。这对于优化临床处方、提高疗效及新药研发有一定参考作用。
2019年22期 v.44 4985-4991页 [查看摘要][在线阅读][下载 174K] [引用频次：0 ] |[下载次数：208 ]
- 杜茂波;
该文针对首批公布的100首经典名方中存在的剂量问题进行探讨,主要针对《伤寒论》涉及的剂量单位进行探讨。剂量涉及3个方面:质量单位、容积单位及长度单位,容积单位、长度单位基本上没有争议,存在较多问题的是质量单位。通过文献考据、实测数据及国家计量总局出土文物进行推算,明确了汉代度量衡产生的依据,那就是黍。质量衡制度为"铢两"制,度量质量时用的黍米的质量,"1两=24铢=240絫=2 400黍"。容量衡制度为"升合"制,度量容积时用的黍米的体积,即"1升=10合=20龠=24 000黍"。度量长度时用的是黍米的宽度,"1尺=10寸=100分=100黍"。同时,明确了《伤寒论》中剂量单位与现代剂量的换算关系,即"1斤=250 g,1两=15. 625 g,1铢=0. 65 g","1合=20 m L,1升=200 m L","1尺=23 cm,1寸=2. 3 cm"。通过研究发现,汉代表示质量的质量衡是"黍米制",即以"黍米"为基准,这就为解决经典名方中存在的质量争议问题提供了有力的钥匙。通过文献考证及实物测试相结合的方法可以更快的消除争议,在质量问题上形成"专家共识"。《伤寒论》中药物剂量的明确,可以为临证制方提供方便,同时为经典名方开发提供剂量依据。
2019年22期 v.44 5012-5016页 [查看摘要][在线阅读][下载 149K] [引用频次：0 ] |[下载次数：45 ]