指南与共识

  • 奇正~消痛贴膏临床应用专家共识

    温建民;童培建;詹红生;刘晓光;温冠楠;

    奇正~消痛贴膏系藏医传统验方,国家保密处方,具有活血化瘀、消肿止痛作用。自1993年上市以来,被骨科、风湿科、疼痛科、康复科等多个临床科室广泛应用于各类急慢性骨骼肌肉疼痛及各类脊柱、关节、软组织病变的治疗。但因其说明书上对于各类疾病具体使用方法缺乏详细说明,且已发布的指南、专著、临床报告中对奇正~消痛贴膏的临床应用优势病种、用法用量、疗程、安全性等的介绍不详尽或不规范,未形成统一的标准,临床应用无统一标准可依。该共识针对消痛贴膏在临床中的优势病种,在临床医生和患者调研分析、循证医学研究和评价的基础上,结合临床专家应用经验达成共识,规范了奇正~消痛贴膏在急慢性扭挫伤(软组织损伤)、骨关节炎、下腰痛、肩周炎、颈椎病、骨科术后恢复期止痛以及其他骨骼肌肉系统疾病治疗时的用法用量、疗程、联合用药、安全性等内容,以期为临床合理、安全使用奇正~消痛贴膏治疗各类急慢性骨骼肌肉疼痛上提供依据和参考,继而为消痛贴膏的规范应用带来帮助。

    2019年04期 v.44 629-635页 [查看摘要][在线阅读][下载 311K]
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野菊资源品质评价及其野生抚育研究专题

  • 野菊野生抚育研究

    虞放;汪涛;郭巧生;邹庆军;张亚静;韩正洲;魏民;刘晖晖;

    该研究通过分析比较野生抚育、人工栽培、野生条件下野菊种群在生物学、生态学、产量、品质方面的差异,为野菊花药材资源品质的形成提供理论依据。结果显示,野生抚育与大田栽培植株株高无显著差异,但均显著高于野生植株,大田栽培野菊茎粗与分枝数显著高于野生抚育与野生植株;野生抚育较大田栽培不易发生涝害,较野生环境不易发生病虫害;野生抚育样方平均产量显著高于大田栽培与野生样方; 3个样地中野菊头状花序性状指标无显著性差异,蒙花苷质量分数均高于2%,显著高于《中国药典》2015年版中规定的0. 80%。因此,人工补种以及适当人工管理的野生抚育是一种获得高品质、高产量野菊花药材的生产方式。

    2019年04期 v.44 636-640页 [查看摘要][在线阅读][下载 232K]
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  • 野菊对Cd元素吸收特性及其对药材品质的影响

    张亚静;汪涛;郭巧生;董小宁;覃美景;肖乃文;韩正洲;魏民;

    对栽培基质浇灌不同浓度Cd Cl2溶液从而对野菊植株进行镉(Cd)胁迫,测定收获期野菊不同部位和栽培基质中Cd元素含量及野菊花中蒙花苷、总黄酮的含量,分析野菊植株对Cd元素的吸收特性和Cd元素对药材品质的影响。研究结果表明,栽培基质Cd元素施加量在0~100 mg·kg~(-1)对野菊生物量影响不显著,根冠比呈现减小—增大—减小趋势。野菊不同部位Cd元素含量差异显著,整体上地上部分含量高于地下部分。野菊各部位对Cd元素富集系数变化趋势不同,地上部分富集系数大于地下部分,各部位及植株整体呈现先增大后减小趋势,整体富集系数均大于1。野菊植株地上部分/地下部分转移系数随着栽培基质中Cd元素施加量增加呈现减小—增大—减小—增大的趋势,并且转移系数均高于1。经过Cd胁迫处理后的野菊花活性成分蒙花苷、总黄酮含量均低于对照,整体表现为先降低后升高趋势,但仍显著低于对照,说明Cd污染会直接导致野菊花药材品质的降低。

    2019年04期 v.44 641-647页 [查看摘要][在线阅读][下载 340K]
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  • 短日照处理对野菊CO基因表达量的影响

    陈丹丹;邹庆军;郭巧生;汪涛;

    该实验研究了野菊光周期途径关键基因CO的表达模式,采用RT-PCR法克隆得到野菊CO基因的CDS序列,其开放阅读框长1 380 bp,编码459个氨基酸。生物信息学分析表明,野菊CO与甘菊、黄花蒿同源性较高,表现为CO在同科内较为保守。预测得到该蛋白的相对分子质量约为52. 04 k Da,理论等电点为4. 81,α螺旋占17. 65%,随机卷曲占76. 69%,延伸链占5. 66%,无β折叠,无信号肽。实验结果显示短日照处理可以提高野菊CO基因的表达量并诱导其开花; qRT-PCR结果显示CO基因在野菊不同组织及不同处理时期相对表达量差异显著。该文通过研究短日照处理对野菊光周期途径开花关键基因CO表达量的影响,为光周期调控野菊花期、采收期提供研究基础。

    2019年04期 v.44 648-653页 [查看摘要][在线阅读][下载 508K]
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  • 基于DNA条形码ITS2序列的野菊及其易混品鉴定研究

    陈芙蓉;汪涛;郭巧生;朱再标;邹庆军;贵书琪;赵舒艺;

    利用DNA条形码技术通过ITS2序列分析,建立一种快速鉴定野菊及其易混品的方法。提取22份样品的基因组DNA,对ITS2片段进行PCR扩增、双向测序,获得其ITS2序列信息;并从Gen Bank上下载同科或同属序列14条;运用MEGA7. 0对所有36条ITS2序列进行比对、计算种内种间遗传距离,构建Neighbor Joining(NJ)系统进化树,并比较样本ITS2序列间的二级结构差异。结果显示,野菊、条叶旋覆花、蒲儿根、千里光的种内最大遗传距离远小于种间最小遗传距离,具有明显的条形码间距(barcoding gap),而野菊与药用菊的遗传距离重合; NJ树显示野菊、条叶旋覆花、蒲儿根、千里光单独聚为一支,且多数药用菊与部分野菊聚为一亚支;二级结构显示野菊、条叶旋覆花、蒲儿根、千里光之间的二级结构差异显著,且野菊与药用菊共用A和B 2个二级结构;同时也发现野菊是药用菊进化来源之一。因此,ITS2序列作为DNA条形码能准确、快速的鉴别野菊及其易混品,为其种质资源鉴定及临床用药安全提供了重要依据。

    2019年04期 v.44 654-659页 [查看摘要][在线阅读][下载 368K]
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  • 基于DNA条形码psbA-trnH,matK,trnL对不同地理居群野菊和药用菊的鉴定研究

    陈芙蓉;汪涛;郭巧生;朱再标;杨锋;邹庆军;张亚静;

    利用DNA条形码技术通过psbA-trnH,mat K,trn L序列分析,建立一种快速鉴定野菊和药用菊的方法。提取21份样品的基因组DNA,对psbA-trnH,mat K,trn L片段进行PCR扩增,双向测序,获得其psbA-trnH,mat K,trn L序列信息;运用MEGA 7. 0对所有样品的psbA-trnH,mat K,trn L序列共63条进行比对、计算种内种间遗传距离,分析psbA-trnH+mat K+trn L组合序列SNPs分布,构建Neighbor-Joining(NJ)系统进化树。结果显示,野菊,野菊(菊花脑)和药用菊的种内种间遗传距离重合; psbA-trnH+mat K+trn L组合序列的SNPs分析显示其组合序列共有19个核苷酸多态性位点(SNPs),野菊较野菊(菊花脑)、药用菊呈现更为明显的序列多态性,psbA-trnH序列表现出较为明显的长度变异; NJ树显示药用菊与野菊、野菊(菊花脑)区别开来,其中编号为C2~C5的药用菊单独聚为一亚支,置信度为62%,编号为Z9,Z10的野菊均采自甘肃省,单独聚为一支,置信度为77%;同时也发现来自西北地域的野菊样品,其psbA-trnH和trn L序列信息变化与地域和环境之间有明显的相关,野菊与野菊(菊花脑)具有明显的分化,同时还是药用菊的进化来源。因此,将psbA-trnH+mat K+trn L组合序列作为DNA条形码能准确、快速的鉴别野菊和药用菊,为其种质资源鉴定及物种鉴别提供了重要依据。

    2019年04期 v.44 660-665页 [查看摘要][在线阅读][下载 356K]
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综述

  • 调控TGF-β1/Smads信号通路抗肝纤维化的中药有效成分研究进展

    王乐;丁腾;龚伟玲;杨长花;刘峰;

    肝纤维化是多种因素影响的肝损伤愈合反应,其形成与多种细胞因子和多条信号通路有关,转化生长因子β1(trans-forming growth factor beta1,TGF-β1)是目前已知最强的促纤维化细胞因子之一,几乎参与了肝纤维化的所有关键环节。TGF-β1/Smads信号通路是TGF-β1发挥促纤维化作用最经典的途径,也是肝纤维化形成过程中最重要的信号通路之一,近年来就该信号通路的研究取得了一系列的科研成果。中药具有"多成分-多靶点-副作用小"的优势,在肝纤维化临床治疗中广泛应用。中药有效成分是从中药中提取纯化的单体化合物,其分子生物学的研究已成为当今热点,运用现代先进技术方法和手段,能直接阐明其作用的靶点和调控的信号通路,揭示了中药治病的机制,更有助于中药产业现代化和国际化发展。该文总结了TGF-β1/Smads信号通路的结构、功能及其在抗肝纤维化进展中的应用,并归纳分析了近5年来各类中药有效成分调控TGF-β1/Smads信号通路干预治疗肝纤维化的作用方式及其可能的机制,为靶向治疗肝纤维化的中药新药的创新开拓思路。

    2019年04期 v.44 666-674页 [查看摘要][在线阅读][下载 470K]
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  • 中药有效成分抗宫颈癌作用机制的研究进展

    苏敏;龚小见;周欣;

    宫颈癌是威胁女性健康的第二大癌症,因其极高的死亡率而备受国内外研究者的关注。目前,大多采用放射性治疗及化学药物治疗癌症的副作用较大,而中药有效成分在抗肿瘤方面有着多途径、多环节、多靶点、毒副作用小等优势,已成为抗癌药物的重点研发对象。近年来,相关科研人员对中药有效成分作用于人宫颈癌细胞的体外抑制活性及作用机制研究尤为活跃。文章拟从中药提取物、多糖、生物碱、皂苷、黄酮类、萜类、醌类、挥发油、酯类、酚类、砷剂类、蛋白组分等中药有效成分为出发点,以抗宫颈癌作用机制即抑制细胞增殖,诱导癌细胞凋亡;抑制细胞侵袭、迁移及黏着斑激酶(FAK)磷酸化;抑制血管内皮生长因子(VEGF)过表达;干扰细胞有丝分裂;抑制端粒酶活性;调节细胞信号通路;下调HPV E6基因表达;调节机体免疫能力为主要内容,对宫颈癌细胞的体外抑制活性与作用机制进行综述,以期为抗宫颈癌药物的研发与利用提供理论参考。

    2019年04期 v.44 675-684页 [查看摘要][在线阅读][下载 409K]
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  • 《中国药典》收载的钩藤基原植物吲哚生物碱研究进展

    张建钢;陈纪军;耿长安;

    茜草科Rubiaceae钩藤属Uncaria植物全世界有34种,我国11种、1变型,《中国药典》收载钩藤U. rhynchophylla、大叶钩藤U. macrophylla、毛钩藤U. hirsuta、华钩藤U. sinensis和无柄果钩藤U. sessilifructus作为中药钩藤的基原植物。钩藤属植物特征性成分为吲哚生物碱,此外还含有三萜、木脂素、黄酮等。为了进一步明确中药钩藤的活性物质基础以及不同部位化学成分差异,该文对以上5种钩藤基原植物中的吲哚生物碱研究进展进行综述。

    2019年04期 v.44 685-695页 [查看摘要][在线阅读][下载 991K]
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资源与鉴定

  • 氮素水平对三叶青生长和茎叶化学成分含量及抗氧化活性的影响

    付立忠;赵利梅;吕惠卿;颜美秋;郑艳秋;刘骞;金亮;程俊文;卢廷高;王利英;

    该文研究了氮素不同水平对三叶青生长和其茎叶化学成分(多糖、总黄酮、总酚)含量和抗氧化活性(ABTS和FRAP)的影响。结果表明:适量氮素对三叶青大部分生物学性状具有促进作用,氮素水平过高对三叶青的生长不利。随着氮素水平的降低,三叶青茎叶中多糖的含量无明显变化,而总黄酮、总酚含量和抗氧化活性均呈稳定上升趋势。抗氧化活性与总黄酮、总酚含量呈极显著正相关。三叶青种植应避免过量施用氮肥。

    2019年04期 v.44 696-702页 [查看摘要][在线阅读][下载 317K]
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分子生药学

  • 响应地黄连作障碍LncRNA-RgAGT2的克隆及表达分析

    王潇然;王玉红;李炜玺;李振;刘方明;张重义;陈新建;

    连作障碍严重影响地黄的产量和品质,对其分子机制的探寻是地黄研究领域的重要问题之一。该研究基于前期数字表达谱(DGE)分析筛选到的特异响应连作障碍转录本Unigene29334_All,利用hi TAIL-PCR和RACE技术克隆到长度为1 573 bp的完整转录产物。借助ORF Finder预测发现,克隆产物所有ORF均小于300 nt,证实此转录产物为长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)。与地黄转录组数据库比对发现,此LncRNA与丙氨酸-乙醛酸转氨酶2基因(Rg AGT2)部分区域同源,因此命名为LncRNA-RgATG2。为进一步研究LncRNA-RgAGT2的功能,该研究检测了LncRNA-RgAGT2与Rg AGT2基因在头茬和连作地黄生长发育5个关键时期(苗期,拉线期,膨大前期,膨大中期,膨大后期)的表达模式,结果暗示,LncRNA-Rg AGT2可能与地黄Rg AGT2基因存在调控关系。同时,连作地黄LncRNA-RgAGT2表达水平在各个时期均发生不同程度的变化,可以作为地黄连作障碍的"诊断标签"。该研究首次证实LncRNA-RgAGT2参与地黄连作障碍应答及调控过程,是对地黄连作障碍分子机制的有力补充。

    2019年04期 v.44 703-711页 [查看摘要][在线阅读][下载 1235K]
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化学

  • 铁刀木化学成分研究

    王闪闪;黄文忠;曾广智;朱鸿;张再;李干鹏;蒋孟圆;高雪梅;

    对决明属植物铁刀木Cassia siamea茎叶的化学成分进行研究。运用硅胶、HPLC等多种色谱技术从铁刀木90%乙醇提取物中分离得到10个单体化合物,根据化合物的理化性质及波谱数据分析,将其分别鉴定为(2'S)-2-(propan-2'-ol)-5,7-di-hydroxy-benzopyran-4-one (1)、chrobisiamone A (2)、2-(2'-羟丙基)-5-甲基-7-羟基色酮(3)、2,5-二甲基-7-羟基色酮(4)、2-甲基-5-丙酮基-7-羟基色原酮(5)、3-O-methylquercetin (6)、3,5,7,3',4'-pentahydroxyflavonone (7)、毛地黄黄酮-5,3'-二甲酯(8)、4-(反式)-乙酰基-3,6,8-羟基-3-甲基-二氢萘酮(9)、6-羟基蜂蜜曲霉素(10),其中1是个新色原酮类化合物,3,4,6,8为首次从该植物中分离得到。

    2019年04期 v.44 712-716页 [查看摘要][在线阅读][下载 300K]
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  • 滇南乌头中C_(19)二萜生物碱化学成分研究

    胡疆;吕涛;蔡建;高秀;张丽芳;景年华;彭天凤;史俊友;郝珊瑚;

    采用硅胶、反向硅胶、Sephadex LH-20及MCI柱色谱等多种色谱技术和方法对滇南乌头Aconitum austroyunnanense进行化学成分研究,并利用1H-NMR,13C-NMR和MS等波谱学方法并结合文献对分离得到的化合物进行结构鉴定。从该植物地下根的95%乙醇提取液的乙酸乙酯萃取部分中分离得到8个C_(19)二萜生物碱,分别鉴定为14α-benzoyloxy-13β,15α-dihydroxy-1α,6α,8β,16β,18-pentamethoxy-19-oxoaconitan (1),N-deethylaconitine (2),spicatine B (3),leucanthumsine A (4),acofamine B(5),macrorhynine B(6),aconitilearine(7)和ambiguine(8)。其中,化合物1为新化合物,化合物2~8为首次从该植物中分离得到。采用MTT比色法对部分生物碱进行体外抗肿瘤活性测试,实验结果表明化合物1对人类肿瘤细胞系A-549,Hep G2,He La具有一定的细胞毒活性(IC_(50)<20μmol·L~(-1))。

    2019年04期 v.44 717-722页 [查看摘要][在线阅读][下载 296K]
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  • 北豆根中化学成分及其抗缺氧活性研究

    邵佳;师超峰;魏金霞;李雅潇;郭兴杰;

    采用制备薄层色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱、D101大孔树脂柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等色谱分离方法,对北豆根的75%乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定。从北豆根的75%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为N-methylcorydaldine(1)、白蓬草福林(2)、千金藤啶碱(3)、阿克吐明(4)、蝙蝠葛苏林碱(5)、阿克吐米定(6)、蝙蝠葛新苛林碱(7)、蝙蝠葛辛碱(8)、6-O-去甲基蝙蝠葛波酚碱(9)、蝙蝠葛定碱(10)、蝙蝠葛糖苷(11)、刺五加苷D(12)、马兜铃内酯(13)、马兜铃酸萜酯Ⅰ(14)和马兜铃酸(15),化合物12~15为首次从蝙蝠葛属植物中分离得到。利用MTT法对所分得量较大的6种生物碱进行了抗缺氧活性研究,结果表明6种生物碱均具有较显著的抗缺氧活性。

    2019年04期 v.44 723-729页 [查看摘要][在线阅读][下载 316K]
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  • 以脱水穿心莲内酯为内参物建立中药穿心莲“一测多评”质量控制方法

    陈两绵;高慧敏;胡雪花;朱晶晶;冯伟红;闫利华;刘晓谦;张永欣;王智民;

    针对中药穿心莲现有研究中,以穿心莲内酯为内参物建立的"一测多评"(QAMS)方法存在色谱分离的分离度不佳,相对校正因子的耐用性不强及含量测定结果的准确度不高等问题,该研究通过色谱条件的优化和方法学的系统考察,首次采用脱水穿心莲内酯为内参物,建立同步测定穿心莲中穿心莲内酯(A)、新穿心莲内酯(B)、14-去氧穿心莲内酯(C)和脱水穿心莲内酯(S)等4种二萜内酯的"一测多评"质量控制方法。在当前HPLC色谱条件下,待测成分分离度良好(R>1. 5),方法学考察符合定量分析的要求。该法确立的相对校正因子(RCFs)分别为:fA/S=0. 65,fB/S=0. 54,fC/S=0. 78,相对校正因子在3种品牌HPLC仪、5种品牌C18柱、不同流速(0. 9,1. 0,1. 1 m L·min~(-1))和不同柱温(25,30,35℃)下的RSD分别为1. 3%~5. 1%,0. 25%~0. 33%,0. 070%~0. 15%,0. 070%~0. 22%,表明相对校正因子的耐用性良好。采用相对保留值法对待测成分的色谱峰进行定位,其相对保留值分别为:rA/S=0. 44,rB/S=0. 86,rC/S=0. 97,相对保留值在不同仪器不同色谱柱下的RSD为0. 030%~1. 6%,表明待测成分的色谱峰定位准确。分别采用QAMS法和外标法(ESM)对6批穿心莲药材和18批穿心莲饮片中的上述4种成分进行含量测定,2种方法所得结果的相对误差均<2. 0%,无显著性差异,表明当前QAMS法的准确度良好。因此,该研究以脱水穿心莲内酯为内参物建立了4种二萜内酯类成分同步测定的"一测多评"方法,该法准确度高,耐用性强,能有效控制穿心莲的内在质量,可以为穿心莲行业标准的制订及药典标准的完善提供技术依据。

    2019年04期 v.44 730-739页 [查看摘要][在线阅读][下载 395K]
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  • 不同产区天麻近红外光谱多变量选择及二维相关光谱识别研究

    侯英;袁天军;徐娟;刘祥义;

    不同产区天麻药材的功效和质量具有较大差异,产区鉴别有助于药材的科学合理利用。采用近红外光谱结合方差光谱、主成分分析、间隔偏最小二乘、遗传算法对云南省外、省内(除昭通)及昭通天麻特征光谱进行提取,分别建立了i PLS-DA和GA-SVM模式识别模型,并对模式识别模型的适配性进行验证。结果显示,建立的i PLS-DA模型的预测正确率为96. 15%,R2,RMSECV,RMSEP分别为0. 893,0. 224,0. 321; GA-SVM的预测正确率为100%,RMSECV为0. 719 4,i PLS-DA和GA-SVM方法均能较好识别不同产区天麻样品。进一步将i PLS和GA提取的特征光谱进行二维相关光谱分析。结果表明,省外和省内天麻差异性光谱主要位于多糖类、芳香烃类、酰胺类和淀粉等物质的C-H,C-N,O-H,N-H键的伸缩、弯曲及倍频吸收区;省外与昭通天麻差异性光谱主要分布在植物蛋白、芳香烃类、多糖类及醇类物质的C-H,O-H,N-H键的伸缩、弯曲及倍频吸收区;省内与昭通天麻差异光谱主要集中于木质素、芳香烃类、醇类、多糖类及脂肪族类物质的CHO,N-H,C-H,O-H,HOH伸缩、弯曲、变形及倍频吸收区。应用近红外光谱结合多变量选择及二维相关光谱,可有效识别不同产区天麻及探析天麻组分的差异特征,对天麻的合理开发与高效利用奠定基础依据。

    2019年04期 v.44 740-749页 [查看摘要][在线阅读][下载 831K]
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  • 当归中禁限用农药多残留检测方法的建立

    李安平;刘志荣;杨平荣;金红宇;

    建立当归50种农药多残留的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,并应用于182批次样品初步筛查。依据风险控制的基本原则选择我国禁限用、高毒、高风险及当归种植中常用的农药品种为检测指标。对样品前处理方法、色谱质谱条件都进行了优化,最终经乙腈提取、以液相色谱分离,在串联质谱多反应监测(MRM)模式下测定。并采用内标法计算以提高结果的准确性。以当归为考察对象,该方法在1~100μg·L~(-1)线性良好,相关系数R2> 0. 990,3水平加标回收率试验中93. 9%以上农药平均回收率在60%~140%,符合痕量测定的要求。该方法以我国常用大宗药物当归为研究对象,有针对性地检测了当归中高风险、高毒性的农药品种,涵盖了绝大多数禁限用农药,检测方法快速、准确,适用于农药残留风险监测和日常检测。

    2019年04期 v.44 750-757页 [查看摘要][在线阅读][下载 403K]
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药理

  • 大黄素对急性肾损伤大鼠肠道菌群的调节作用

    孙蒋;罗静雯;姚文杰;骆晓婷;苏辰霖;魏颖慧;

    该文研究大黄素对急性肾损伤(AKI)大鼠肠道菌群的调节作用。36只健康雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(盐酸贝那普利5 mg·kg~(-1))和大黄素低(10 mg·kg~(-1))、中(25 mg·kg~(-1))、高(50 mg·kg~(-1))剂量组。除正常组外,其余各组采用腹腔注射硫酸庆大霉素损伤肾组织构建急性肾损伤模型,连续注射7 d,1次/d,腹腔注射2 h后,除模型组和正常组用生理盐水灌胃,其余各组分别用相应剂量药物灌胃给药,持续给药15 d。收集各组大鼠尿液和粪便分别测定尿蛋白总量和4种菌属含量;采集各组大鼠血液进行血液生化指标测定; HE染色观察各组大鼠肾脏组织形态学改变。结果显示,与正常组相比,模型组体质量、尿蛋白总量(UTP)、血浆细菌内毒素、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、血清D-乳酸水平以及4种细菌含量均有显著变化(P<0. 05);与模型组相比,阳性对照组和大黄素各剂量组尿蛋白总量、尿素氮、血清D-乳酸水平、肌酐和血浆细菌内毒素均有所下降,以大黄素高剂量组下降最为显著(P<0. 01),肾脏病理修复情况最好;除大黄素低剂量组外,各给药组大肠杆菌及肠球菌数量显著下降(P<0. 05),乳酸菌及双歧杆菌明显升高(P<0. 05),以大黄素高剂量组变化最为明显(P<0. 01)。研究发现急性肾损伤大鼠(AKI)存在较明显的肠道菌群失调,大黄素对AKI大鼠肠道菌群失衡有一定的调节作用,这可能是其治疗急性肾损伤的作用机制之一。

    2019年04期 v.44 758-764页 [查看摘要][在线阅读][下载 472K]
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  • 迭鞘石斛乙醚提取物对肺癌细胞抑制机制的定量蛋白质组学研究

    张雪琴;李莹;刘静;赵庭梅;赵若茜;郑世刚;淳泽;胡亚东;

    迭鞘石斛Dendrobium denneanum作为名贵中药材具有悠久的使用历史,研究发现其乙醚提取物相比传统的醇或水提取物对肺癌细胞具有更强的抑制作用,具备更好的开发前景。该研究采用基于SILAC(stable isotope labeling with amino acids incell cultures)的定量蛋白质组学方法,从蛋白质组层面对迭鞘石斛乙醚提取物抑制人肺癌细胞A549的作用机制进行了系统研究,共检测到A549细胞的4 855种蛋白。数据分析显示迭鞘石斛乙醚提取物导致A549细胞中237种蛋白的表达出现明显差异,其中193种蛋白含量出现明显的上调,44种蛋白含量出现明显的下调。差异表达蛋白主要与细胞内生物大分子的合成运输及代谢、分子伴侣、DNA修复、氧化还原酶、细胞黏附、细胞周期、细胞凋亡与自噬等功能相关。结果显示,迭鞘石斛乙醚提取物会严重紊乱肺癌细胞内蛋白等物质的代谢过程,诱发内质网应激反应,同时使细胞的自我修复机制出现异常,导致细胞的黏附与增殖功能受损。另一方面,乙醚提取物会引起肺癌细胞内ROS水平的剧烈升高,同时使细胞内的氧化还原系统发生紊乱。在上述多重因素的影响下,肺癌细胞启动细胞凋亡和细胞自噬等多种进程,加速细胞的死亡。该研究结果从蛋白质组层面系统阐释了迭鞘石斛乙醚提取物抑制肺癌细胞的作用机制,为迭鞘石斛乙醚提取物的抑癌作用研究提供了理论基础,有利于从迭鞘石斛乙醚提取物中开发出新型的抗癌药物。

    2019年04期 v.44 765-773页 [查看摘要][在线阅读][下载 557K]
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  • 覆盆子提取物对ConA致小鼠急性肝损伤的保护作用研究

    季宇彬;包晓威;单宇;杨淑贤;张丽梅;侯思远;李立勇;曹丽;

    该实验研究了覆盆子提取物的抗氧化能力及其对ConA致小鼠肝损伤的保护作用。将雄性Balb/C小鼠随机分为6组:正常组,模型组,双环醇阳性对照组(200 mg·kg~(-1))及覆盆子提取物低(200 mg·kg~(-1))、中(400 mg·kg~(-1))、高(800 mg·kg~(-1))剂量组。各组按照体质量灌胃给药,1次/d,7 d后,除正常组外其余各组尾静脉注射ConA溶液(20 mg·kg~(-1))建立急性肝损伤模型,8 h后处取血、取材。计算脏器指数;检测血清中ALT,AST,LDH活性及肝组织中SOD,MDA,CAT,GSH水平; HE染色观察肝组织病理变化; Western blot法检测Bax,Bcl-2,Nrf2,Keap-1蛋白的表达; CAA法测定覆盆子提取物抗氧化活性。结果表明,与模型组相比,覆盆子提取物给药组可明显改善肝脏病理变化,可显著降低肝损伤小鼠血清中ALT,AST,LDH活性(P<0. 01),高剂量组肝脏组织匀浆上清中SOD和CAT活性升高,GSH含量升高,MDA含量明显降低(P<0. 01),同时可致肝组织中Bax,Keap-1蛋白水平减少和Bcl-2,Nrf2蛋白水平增加。CAA结果显示,覆盆子提取物有较强的抗氧化能力。因此,覆盆子提取物对ConA所致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,并与其抗氧化活性相关。

    2019年04期 v.44 774-780页 [查看摘要][在线阅读][下载 495K]
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  • 逍遥散对LPS所致海马神经元细胞损伤的保护作用及机制研究

    石博宇;饶志粒;罗杰;刘小波;方洋;曹海娟;曾南;

    该文探讨逍遥散抗抑郁作用发挥与干预海马神经生长的关系。采用脂多糖(LPS)诱导的海马神经元细胞炎症损伤模型,给予逍遥散含药血清(终浓度4%,8%)干预,采用免疫荧光双标法检测细胞增殖活力,ELISA法检测模型细胞上清BD-NF,β-NGF水平,PCR法检测细胞裂解液中BDNF,NGF,Trk B,Trk A,CREB mRNA表达,Western blot法检测细胞裂解液中Trk B,CREB,p-CREB,SYP蛋白表达水平,揭示逍遥散的保护作用及作用机制。结果表明,8%逍遥散含药血清能明显提高损伤海马神经元细胞Brdu/Neu N的比值(P<0. 01),促进细胞增殖。4%,8%逍遥散含药血清明显上调模型细胞上清BDNF,β-NGF水平(P<0. 05或P<0. 01),上调模型细胞BDNF,NGF,Trk B,Trk A,CREB mRNA及Trk B,CREB,p-CREB,SYP蛋白的表达水平(P<0. 05或P<0. 01)。综上,可认为逍遥散对LPS诱导的海马神经元细胞损伤有一定保护作用,其保护作用的发挥与促进海马神经生长相关,是其抗抑郁作用机制之一。

    2019年04期 v.44 781-786页 [查看摘要][在线阅读][下载 450K]
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  • 基于Sirt1-FXR通路探究京尼平苷酸对胆汁淤积大鼠胆汁酸肝肠循环的影响

    陈浩;李甲;胡蕾;赵威;俞浩;刘汉珍;马世堂;

    通过体内外结合的方式探究京尼平苷酸(GPA)对胆汁淤积大鼠胆汁酸肝肠循环作用影响及其基于去乙酰化酶1(Sirt1)-法尼醇X受体(FXR)通路的作用机制探究。将60只SD大鼠随机分为6组,分别为空白对照组、α-萘异硫氰酸酯(ANIT)模型组、阳性对照组(100 mg·kg~(-1)·d-1UDCA),以及100,50,25 mg·kg~(-1)·d-1GPA高、中、低剂量组,每组10只,给药10d。在第8天药后,除空白大鼠其余均一次性灌胃65 mg·kg~(-1)ANIT,末次药后,测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)和碱性磷酸酶(ALP)活性以及总胆红素(TB)和总胆汁酸(TBA)的含量; RT-PCR法检测肝组织中胆汁酸肝肠循坏关键基因Sirt1,FXR,多药耐药相关蛋白2(MRP2),胆盐输出泵(BSEP),钠离子-牛磺胆酸协同转运多肽(NT-CP),回肠中顶端钠-胆汁酸转运体(ASBT),回肠胆汁酸结合蛋白(IBABP) mRNA转录水平的影响;免疫荧光三染法检测MRP2,BSEP和NTCP在肝脏中表达,ASBT,IBABP在回肠中表达; Western blot法检测肝组织中Sirt1,FXR表达;体外培养原代肝细胞观察GPA对EX 527(Sirt1抑制剂)抑制与否,RT-PCR和Western blot法检测细胞中Sirt1和FXR的mRNA和蛋白表达。在体实验表明,GPA能显著降低或改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠血清ALT,AST,γ-GGT,ALP活性和TB,TBA的含量(P<0. 01)以及肝组织病理损伤; GPA能显著升高肝组织Sirt1,FXR,MRP2,BSEP,NTCP和回肠中ASBT,IBABP mRNA转录水平和蛋白表达(P<0. 01);体外原代肝细胞实验表明,EX-527能通过抑制原代肝细胞中Sirt1基因和蛋白功能来抑制FXR基因和蛋白表达(P<0. 01),GPA可显著提高改善EX-527抑制的原代肝细胞中Sirt1和FXR基因和蛋白的表达(P<0. 01)。以上结果发现GPA的改善作用呈剂量正相关性。GPA可改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的胆汁酸肝肠循环发挥保肝利胆作用,其可能机制是GPA通过激活改善氧化应激损伤关键调控基因Sirt1来激活核受体FXR,激活的FXR再调控胆汁酸肝肠循环的相关蛋白来实现。

    2019年04期 v.44 787-795页 [查看摘要][在线阅读][下载 784K]
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  • 梓醇对TNF-α诱导的HAECs细胞损伤抑制作用的机制研究

    徐粲瑶;张玉坤;孙慧君;张红;

    梓醇是从中药地黄的根中提取出的一种环烯醚萜葡萄糖苷类化合物,据报道有抗氧化应激作用。腺苷5'磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)在抑制氧化应激方面起到重要作用。该研究通过对氧化应激相关指标的检测探讨梓醇对TNF-α诱导的人主动脉内皮细胞(human aorta epithelial cells,HAECs)细胞损伤的抑制作用,通过siRNA技术检测其调控氧化应激与AMPK的关系。采用比色法测定细胞中SOD,MDA,GSH和LDH水平,流式细胞仪测定ROS生成水平。免疫印迹(Westernblot)法检测细胞中AMPK,磷酸化AMPK和NOX4的表达。RNA干扰技术敲低AMPK水平,通过再次检测各项指标探讨梓醇抑制氧化应激与其激活AMPK的相关性。结果表明,TNF-α诱导损伤的HAECs磷酸化AMPK表达下降,而梓醇上调AMPK的磷酸化水平。未转染AMPK siRNA前,梓醇能够抑制TNF-α诱导的NOX4蛋白表达上调,并减少ROS生成,AMPK siRNA作用后,梓醇对ROS过度生成、NOX4蛋白表达上调的抑制作用均减弱。以上结果提示,梓醇通过激活AMPK抑制细胞中氧化应激,进而抑制TNF-α诱导的HAECs细胞损伤。

    2019年04期 v.44 796-802页 [查看摘要][在线阅读][下载 523K]
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  • 以网络药理学技术挖掘、发现“黄连-厚朴”药对中活性组分

    吴海宁;于桂红;赵风至;贾晓斌;封亮;石心红;

    基于网络药理学技术,挖掘、发现"黄连-厚朴"药对中防治疾病的活性组分,并对潜在的靶点与机制进行整合与分析。采用TCMSP数据库筛选活性成分、利用TTD和Drug Bank数据库配合文献挖掘潜在靶点进行预测、利用通路注释技术对黄连和厚朴活性组分及潜在靶点进行通路的富集与分析。通过该技术的应用共筛选出"黄连-厚朴"药对具有潜在靶点活性成分29个,其中主要包括氢化小檗碱、小檗碱、黄连碱、巴马汀等在内的12个生物碱类组分;厚朴酚、和厚朴酚以及和厚朴新酚在内的3个木脂素类组分;α-桉叶醇,β-桉叶醇,桉油等在内的6个挥发油类组分以及含有槲皮素和新橙皮苷的黄酮类组分。另外,筛选出与之相对应的作用靶点199个,主要包含PTGS2,PTGS1,NCOA2,Hsp90AB1等;共涉及疾病信号通路72条,如前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌等在内的8条肿瘤类通路;催产素信号通路、胰岛素信号通路、甲状腺激素信号通路等在内的9条内分泌类通路以及炎症等相关通路。该研究初步挖掘发现了"黄连-厚朴"药对的主要活性组分及潜在靶点,为组分中药制剂研究提供了物料来源。

    2019年04期 v.44 803-810页 [查看摘要][在线阅读][下载 739K]
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  • 人参中性多糖对小鼠肠道菌群组成及多样性的影响

    祁玉丽;李珊珊;曲迪;陈丽雪;宫瑞泽;高坤;孙印石;

    探讨人参多糖中的中性多糖级分对抗生素相关性腹泻(antibiotic associated diarrhea,AAD)小鼠的治疗作用及对肠道菌群组成和多样性的影响。通过水提、醇沉,从人参根中得到水溶性人参多糖(WGP),再通过离子交换色谱纯化和制备人参中性多糖(WGPN)。利用灌胃盐酸林可霉素建立AAD小鼠模型,随后灌胃生理盐水(自然恢复组,NR)或给药WGPN(WGPN组) 1周,观察并记录小鼠体重变化、精神状态和腹泻情况。末次给药12 h后,收集小鼠肠道内容物进行16S rRNA高通量测序,并取回肠进行组织学检查。结果表明,WGPN能够减轻腹泻小鼠症状,改善小鼠回肠组织水肿和炎症情况,增加肠绒毛长度。与NR组相比,属水平上,WGPN能够增加乳杆菌属相对丰度,显著降低拟杆菌属、链球菌属、苍白杆菌属和假单胞菌属的相对丰度。因此,WGPN可通过促进AAD小鼠肠道结构修复,调节小鼠肠道菌群的组成和多样性,达到重建肠道微生态的作用。

    2019年04期 v.44 811-818页 [查看摘要][在线阅读][下载 505K]
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药代动力学

  • 玳玳果黄酮降脂提取物效应组分大鼠肝肠微粒体代谢特性研究

    曾华平;陈红;陈丹;马国萍;朱仙慕;刘秀棉;洪丽婷;

    该文比较玳玳果黄酮降脂提取物效应组分新橙皮苷、柚皮苷在大鼠肝脏及肠道微粒体中的代谢差异,探讨效应组分在肝脏及肠道的Ⅰ相代谢特性。采用UPLC-MS/MS技术建立效应组分在肝肠微粒体Ⅰ相代谢孵育体系中的定量分析方法,并以差速离心法制备大鼠肝、肠微粒体,构建Ⅰ相代谢孵育体系,通过将各时间点药物剩余百分率的自然对数ln(X)对时间t作图计算代谢消除半衰期,比较效应组分的代谢特征。结果表明,所建立的UPLC-MS/MS定量分析方法专属性、标准曲线及线性范围良好,方法准确度与精密度、定量下限均符合规定,该方法能够满足大鼠肝肠微粒体Ⅰ相代谢孵育体系下效应组分的定量检测需要;大鼠肝微粒体Ⅰ相孵育体系中新橙皮苷代谢消除半衰期为(2. 20±0. 28) h,大于柚皮苷的底物消除半衰期(1. 97±0. 28) h,但差异无统计学意义;大鼠肠微粒体Ⅰ相孵育体系中新橙皮苷的代谢消除半衰期为(3. 68±0. 54) h,大于柚皮苷的底物消除半衰期(2. 26±0. 13) h,且差异有统计学意义(P<0. 05);提取物效应组分在肝微粒体中的消除半衰期均小于肠微粒体。该研究发现,玳玳果黄酮降脂提取物效应组分在大鼠肝、肠微粒体Ⅰ相代谢孵育体系中具有不同的消除半衰期,提示二者在大鼠肝脏及肠道中具有不同的代谢特征,肝脏可能为玳玳果黄酮降脂提取物效应组分的主要代谢部位,且提取物效应组分柚皮苷的Ⅰ相代谢强度大于新橙皮苷的代谢强度,推测导致该代谢特征差异的原因可能与黄酮苷B环羟基结合位点及甲氧基数量有关。为进一步指导玳玳果黄酮降脂提取物制剂的深度开发及临床开发应用等提供重要的实验依据。

    2019年04期 v.44 819-826页 [查看摘要][在线阅读][下载 383K]
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  • 基于~1H-NMR的艾叶挥发油急性肝毒性机制的代谢组学研究

    刘红杰;董含秋;詹莎;陈亮;肖雅;

    该文采用~1H-NMR为基础的尿液代谢组学技术结合生化指标分析,研究艾叶挥发油(Artemisia argyi essential oil,AAEO)的急性肝毒性机制。为进一步探索艾叶肝毒性机制,通过采集橄榄油组和艾叶挥发油高、低剂量组不同时间段内的大鼠尿液进行核磁数据检测,利用主成分分析法(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonalpartial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA)对大鼠尿液内源性小分子代谢产物进行分析处理来研究艾叶挥发油对正常大鼠代谢过程的影响。结果表明,橄榄油组和艾叶挥发油组区别明显,PCA得分图显示橄榄油组在0~6,6~12,12~24h大鼠尿液未发生明显的分离趋势,各代谢组分呈聚集模式分布;艾叶挥发油组在0~6,6~12,12~24 h大鼠尿液代谢轨迹发生明显的分离趋势。实验证明,通过~1H-NMR对代谢物的分析发现艾叶挥发油能导致大鼠体内代谢紊乱,产生急性肝毒性。经过代谢物差异性对比,推测艾叶挥发油产生急性肝毒性机制可能是参与到了三羧酸循环和能量代谢,而柠檬酸盐和齐墩果酸是其比较可能的生物标志物。该研究探讨了艾叶挥发油的急性肝毒性机制,为艾叶临床规范用药提供了实验数据基础。

    2019年04期 v.44 827-832页 [查看摘要][在线阅读][下载 326K]
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临床

  • 灯盏花素注射剂治疗糖尿病性肾病的有效性和安全性:随机对照试验的系统评价和Meta分析

    赵君;支英杰;赵晖;于丹丹;

    系统评价灯盏花素注射剂治疗糖尿病性肾病的有效性和安全性。全面检索国内外八大电子数据库及临床试验注册库,搜集关于灯盏花素注射剂(以下简称"灯盏花素")治疗糖尿病性肾病(diabetic nephropathy,DN)的随机对照试验。根据Cochrane系统评价标准进行资料筛选、提取和质量评价。对最终纳入的文献采用Rev Man5. 3软件进行Meta分析或仅做描述性分析。本研究共纳入29篇文献,包含37个研究,涉及2 097例患者,试验组为1 054例,对照组为1 043例。所纳入的临床研究总体质量偏低。Meta分析显示:①在DNⅢ期中,常规治疗+灯盏花素在总有效率,24 h UTP,SCR,BUN,UEAR,ALB,m ALB方面优于常规治疗(RR总有效率=1. 60,95%CI[1. 32,1. 93],P<0. 000 01; SMD24 h UTP=-1. 21,95%CI[-1. 56,-0. 87],P<0. 000 01; MDSCR=-6. 33,95%CI[-9. 20,-3. 46],P<0. 000 1; MDBUN=-6. 6,95%CI[-1. 10,-0. 22],P=0. 003; MDUEAR=-20. 30,95%CI[-28. 14,-12. 46],P <0. 000 01; MDALB=0. 47,95%CI[0. 42,0. 52],P <0. 000 01; MDmALB=-10. 03,95%CI[-10. 62,-9. 46],P<0. 000 01)。②在DNⅣ期中,常规治疗+灯盏花素在总有效率(1个研究),24 h UTP,SCR,BUN方面优于常规治疗(RR总有效率=1. 57,95%CI[1. 10,2. 25],P=0. 01; SMD24 h UTP=-0. 52,95%CI[-0. 71,-0. 33],P <0. 000 01;MDSCR=-35. 38,95%CI[-48. 57,-22. 19],P<0. 000 01; MDBUN=-1. 89,95%CI[-3. 01,-0. 77],P<0. 000 01)。③在DNⅤ期中,常规治疗+灯盏花素在SCR方面优于常规治疗(MD=-26. 35,95%CI[-47. 45,-5. 24],P=0. 01),而在24 h UTP,BUN,ALB方面与常规治疗对比无统计学差异。④目前无法从现有证据中获得灯盏花素注射剂治疗该病所发生的不良反应具体判断信息。基于现有证据,灯盏花素注射剂联合常规治疗治疗糖尿病性肾病有一定的疗效,特别是DNⅢ,Ⅳ期的研究较多,所改善的结局指标有较明显的疗效优势,而该药的安全性尚需进一步探讨。由于纳入研究质量普遍偏低,影响结果的精确性,尚需更多设计严紧、高质量、多中心随机双盲对照试验为临床实践提供证据支撑。

    2019年04期 v.44 833-844页 [查看摘要][在线阅读][下载 873K]
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  • 全国名中医范永升教授运用虫类药治疗痹病经验探析

    吴国琳;李天一;范永升;

    全国名中医范永升教授在治疗痹病方面具有很高造诣,临床常辨病与辨证结合,药性与病证相应,用药灵活多变,疗效显著,特别是在运用虫类药方面积累了丰富的临床经验。范教授常根据中医痹病主要证候、病变部位,并结合辨识体质,适当选择全蝎、蜈蚣、地龙、蜂房、僵蚕、穿山甲、白花蛇、乌梢蛇、蕲蛇、蝉衣、九香虫、土鳖虫、蚕砂等虫类药,同时注重虫类药之间及其与祛风湿药、活血药、补益药的相互配伍,在安全、有效应用的前提下在痹病的治疗中发挥虫类药搜剔通利、活络止痛之功效。

    2019年04期 v.44 845-848页 [查看摘要][在线阅读][下载 201K]
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