冬虫夏草研究专题

  • 冬虫夏草及虫草类产品DNA条形码鉴定研究

    苏燕燕;李文佳;杨俐;丁丹丹;向丽;

    冬虫夏草为我国名贵中药材,替代、掺伪、造假等现象普遍,为实现其准确鉴别,该研究采用DNA barcoding方法对6种116份虫草菌和146份寄主分别进行鉴定,并收集了6种29份虫草类产品,基于ITS序列设计虫草菌特异引物,结合虫体COⅠ序列鉴定,对冬虫夏草及其类似产品进行更精确的鉴定。结果表明,基于ITS序列和COⅠ序列均可实现冬虫夏草与虫草类物种及伪品的鉴别;通过2对ITS特异引物ITSSF1/ITSSR1和ITSSF2/ITSSR2,可分别特异扩增到297 bp和136 bp的冬虫夏草菌短片段,实现了冬虫夏草菌与易混淆物种的快速鉴别;而结合COⅠ序列可应用于粉末状态下冬虫夏草全草与人工培育菌丝的准确区分,并实现虫草类产品的快速检测。因此,ITS特异引物结合COⅠ序列,冬虫夏草与发酵菌丝及虫草类产品可快速、准确鉴别。

    2019年10期 v.44 1965-1973页 [查看摘要][在线阅读][下载 468K]
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  • 基于多指标成分含量的冬虫夏草冻干和晒干法比较

    昝珂;赵磊;过立农;郑健;马双成;

    该文建立HPLC同时测定冬虫夏草中主要核苷及碱基成分,考察冻干和晒干2种加工方法对其含量的影响。以次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷等6种主要核苷及碱基成分为对照品,采用GL Inertsustain AQ-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250mm,5μm);水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,0~1%B; 10~65 min,1%~3%B),流速1. 0 mL·min~(-1),检测波长260 nm,柱温30℃,进样量5μL。次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷分别在1. 025~20. 50(r=0. 999 8),0. 545~10. 90(r=0. 999 9),4. 051~81. 02(r=0. 999 8),4. 044~80. 88(r=0. 999 9),2. 075~41. 50(r=0. 999 9),4. 032~80. 64(r=0. 999 9)mg·L~(-1)呈良好的线性关系,平均回收率分别为102. 3%(RSD 2. 1%),101. 1%(RSD 2. 4%),97. 80%(RSD 1. 7%),101. 8%(RSD 1. 8%),98. 90%(RSD 2. 0%),98. 10%(RSD 1. 4%)。每批野生冬虫夏草样品采用冻干和晒干2种干燥方式干燥后用于比较研究。测定结果表明,不同干燥方式对冬虫夏草中的6种核苷及碱基类成分的含量存在一定影响,冻干法中核苷类成分的总含量高于晒干法。该研究为冬虫夏草干燥方式及质量评价提供了科学依据。

    2019年10期 v.44 1974-1977页 [查看摘要][在线阅读][下载 218K]
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  • 在线梯度提取-液相色谱法分析冬虫夏草中的化学成分

    李春红;黄琦;钱正明;李文佳;周妙霞;

    该研究建立了在线梯度提取-液相色谱法同时分析冬虫夏草中大极性和小极性类化学成分。将冬虫夏草样品与硅藻土均匀混合,置于提取罐中,并安装于高效液相系统中,于70℃下用流动相进行在线梯度提取。分析柱为Zorbax SB-AQ(4. 6 mm×150 mm,5μm),流动相为0. 1%甲酸水-甲醇,梯度洗脱,流速1 mL·min~(-1),柱温30℃,在260 nm波长下检测。结果发现,该方法可以同时提取和分离冬虫夏草中大极性和小极性类成分,并通过与对照品色谱峰进行比对的方法,鉴定了其中6个大极性成分(尿嘧啶、尿苷、胸腺嘧啶、肌苷、鸟苷、腺苷)和1个小极性成分(麦角甾醇)。结果表明,所建立的分析方法快速、稳定、环保,有助于提升冬虫夏草的综合质量评价水平。

    2019年10期 v.44 1978-1982页 [查看摘要][在线阅读][下载 284K]
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  • 不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响

    钱正明;樊娇娇;李春红;杨丰庆;李文佳;

    该研究采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和双向电泳(2-DE)技术分析比较了鲜冬虫夏草(S1)以及经过22℃阴干(S2)、37℃晒干(S3)和60℃烘干(S4)的冬虫夏草样品中蛋白质成分的变化。Bradford法蛋白含量测定结果显示,4种冬虫夏草样品总蛋白质量分数在1. 655~4. 493 mg·g~(-1),其中鲜冬虫夏草的蛋白含量最高。SDS-PAGE结果显示,冬虫夏草样品蛋白质的相对分子质量主要分布在10~100 kDa,含有的蛋白条带数28~41条,鲜冬虫夏草含有的蛋白条带数量最多。通过PDQuest软件处理冬虫夏草样品2-DE凝胶图谱,结果显示,冬虫夏草蛋白质的等电点主要分布在pI 4. 5~6. 5,相对分子质量主要分布在2个区域10~20 kDa和25~100 kDa,共检测到488~876个蛋白点,鲜冬虫夏草含有的蛋白点数量最多。因此,鲜冬虫夏草含有蛋白成分含量和总类最多,干燥过程会引起冬虫夏草蛋白含量和种类的减少,不同的干燥方法对药材蛋白的影响也不一样,该结果可为冬虫夏草干燥工艺的提升提供参考。

    2019年10期 v.44 1983-1988页 [查看摘要][在线阅读][下载 407K]
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综述

  • 黄精属植物化学成分及药理活性研究进展

    张娇;王元忠;杨维泽;杨美权;张金渝;

    黄精属Polygonatum植物是百合科Liliaceae多年生草本植物,国内外报道有60余种,中国有32种,主要分布于北温带。主要化学成分为甾体皂苷类、多糖类、黄酮类、生物碱类等,具有抗衰老、抗肿瘤、免疫调节、抗菌抗病毒、降血糖血脂等作用。随着大健康产业的发展,药食兼用的黄精在近几年受到人们的极大关注,成为研究的热点之一。但其功效物质基础不够明确、产品质量参差不齐,严重制约产业快速升级。该文综述了黄精属植物系统分类、化学成分和药理活性机制的研究现状,以期为该属植物的合理开发利用提供理论依据。

    2019年10期 v.44 1989-2008页 [查看摘要][在线阅读][下载 1448K]
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资源与鉴定

  • 酸枣仁加工过程中黄曲霉毒素及污染真菌调查

    张西梅;高微微;郝燕红;焦晓林;郭宝林;薛亚林;白建廷;雷振宏;

    酸枣仁是中药材中黄曲霉毒素污染比较重的品种,为了揭示酸枣仁黄曲霉毒素污染的主要来源并明确产毒菌,收集了采收、加工、贮藏过程的32份酸枣仁样品,利用免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生法测定黄曲霉毒素含量,通过稀释平板法分离污染真菌,结合形态学和分子生物学特征对菌株进行鉴定。结果表明,共28份样品有黄曲霉毒素检出,污染样品分布在从采收到贮藏的每个生产环节,其中有3份样品仅黄曲霉毒素B_1(AFB_1)超出《中国药典》限量标准,2份样品的AFB_1及总黄曲霉毒素(AFs)均超标,为水漂后及贮藏的样品。水漂后的样品AFB_1和AFs最高检出量分别达到94. 79,121. 43μg·kg~(-1)。所有样品均有真菌污染,新采收的鲜酸枣枣仁污染真菌总数最低,为2. 20×10~2CFU·g~(-1),随着加工过程的推进逐渐增加,水漂后样品的真菌总数升至1. 16×10~6CFU·g~(-1)。共分离鉴定了321株真菌,分属于17属,酸枣仁上黄曲霉毒素污染来源主要是采收加工环境中的黄曲霉Aspergillus flavus,并证实其中1株可以产AFB_1,AFB_2。酸枣采收后的堆沤环节真菌数量明显增加,脱去内果皮后的枣仁上曲霉属Aspergillus真菌成为优势菌群。堆沤和水漂环节增加了黄曲霉毒素污染风险。

    2019年10期 v.44 2009-2014页 [查看摘要][在线阅读][下载 298K]
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  • 生防细菌NJ13与化学农药复配对人参镰刀菌根腐病菌的抑制作用

    陈长卿;闫东;姜云;许朋;褚逸轩;高洁;

    为了明确甲基营养型芽孢杆菌NJ13及与化学药剂混配对人参根腐病菌的毒力及其抑制作用,该研究采用生长速率法、孙云沛法测定分析了菌株NJ13及与化学药剂混配对人参根腐病菌的室内抑菌效果及共毒系数;并采用混合培养法、对峙培养法及显微观察分别测定了菌株NJ13对病原菌产孢量、孢子萌发、菌丝生长量、菌丝形态的抑制作用。室内毒力测定结果表明,与4种化学杀菌剂相比,菌株NJ13对人参根腐病菌抑制效果最好,EC_(50)为0. 071 mg·L~(-1);菌株NJ13分别与丙环唑、苯醚甲环唑在配比为1∶4~4∶1对病原菌抑菌效果均具有增效作用,抑菌最佳配比皆为1∶1,共毒系数分别为848. 70,859. 73。菌株NJ13对人参根腐病菌的产孢量、孢子萌发、菌丝生长均有抑制作用。

    2019年10期 v.44 2015-2019页 [查看摘要][在线阅读][下载 308K]
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  • 干旱胁迫诱导半夏倒苗的细胞程序性死亡研究

    黄文静;孙晓春;李铂;王楠;岳正刚;张永强;赵振宇;唐志书;

    为进一步了解半夏干旱倒苗的机制,以30%PEG 6000模拟干旱胁迫,检测了不同处理时间下半夏细胞的生理和形态变化。结果表明:随着干旱胁迫时间的延长,半夏茎的叶绿素含量及水势不断下降,相对电导率、可溶性糖和MDA的含量则不断升高。干旱处理4 d,半夏开始倒苗,至8 d时大幅度倒苗,倒苗程度约为73%。干旱处理2 d,半夏细胞核核染色质开始凝集,核固缩边缘化,呈新月状等不规则形状,表现出明显的细胞程序性死亡特征。腺苷酸转移酶(ANT)基因表达逐渐受到干旱的抑制,随着Caspase-3酶活性急剧升高,细胞死亡率不断增加。由此可见,半夏干旱倒苗的本质是细胞发生程序性死亡,这可能是一种半夏抵御不良环境的自我休眠保护机制。

    2019年10期 v.44 2020-2025页 [查看摘要][在线阅读][下载 348K]
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  • 白木香重要害虫黄野螟的触角感器超微结构研究

    乔海莉;陆鹏飞;刘赛;徐常青;郭昆;徐荣;陈君;

    黄野螟在我国白木香种植区重发、频发,导致被害树光秃无叶,呈现大片枯死状。前期发现黄野螟成虫触角感受器在其寄主定位、交配和产卵过程中起着重要作用。该研究采用扫描电镜技术对黄野螟触角感受器的类型、结构、数量、分布及雌雄之间的差异进行了系统观察和描述。结果显示,黄野螟触角呈丝状,包括柄节、梗节和鞭节3部分。其中柄节粗长,梗节短小,鞭节由约64个亚节组成,鞭节仅背面覆盖有大量鳞片。雌雄成虫触角上存在8种类型的感受器,即毛形感器、刺形感器、锥形感器、腔锥形感器、栓锥形感器、耳形感器、鳞形感器和B?hm氏鬃毛。不同类型的感受器在触角各亚节上的分布和数量各不相同,感器主要着生于触角鞭节腹面和侧面,柄节和梗节上仅有B?hm氏鬃毛和少许鳞形感器。毛形感器Ⅲ是雄虫触角所特有的感受器,其余各类型感受器在雌雄成虫触角上均有分布,但分布数量存在差异。上述结果为进一步研究黄野螟对寄主和配偶的识别机制,实现利用信息化学物质对其监测和防治奠定基础。

    2019年10期 v.44 2026-2031页 [查看摘要][在线阅读][下载 561K]
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  • 多花黄精组织培养体系的研究

    何艳;朱玉球;肖波;付顺华;斯金平;

    为加快多花黄精优良种苗的繁育,通过叶片叶龄及部位、基本培养基和植物生长调节剂等关键因子的综合调控,建立多花黄精的组培快繁体系并通过细胞学观察解析愈伤组织形成与分化。结果表明:30 d龄多花黄精试管苗叶基部在MS+6-BA 1. 50 mg·L~(-1)+2,4-D 0. 20 mg·L~(-1)培养基上愈伤组织诱导率最高,为80. 00%,愈伤组织脱分化启动及愈伤组织的形成是多起源的;不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA 4. 00 mg·L~(-1)+2,4-D 0. 20 mg·L~(-1),分化率达90. 33%,每块愈伤组织平均分化芽数5. 16个,不定芽有外起源和内起源2种发生方式,分别由愈伤组织近表层细胞和愈伤组织内部拟分生组织形成;采用正交试验设计筛选出不定芽最佳增殖培养基为MS+6-BA 2. 00 mg·L~(-1)+NAA 0. 10 mg·L~(-1)和MS+6-BA 2. 00 mg·L~(-1)+NAA0. 20 mg·L~(-1);切分三叶无菌苗接入培养基1/2 MS+IBA 2. 00 mg·L~(-1)中,生根率最高,为94. 00%;移栽于泥炭-蛭石1∶1的基质中生长良好,存活率达85. 00%以上。该研究为多花黄精工厂化育苗提供了关键解决途径。

    2019年10期 v.44 2032-2037页 [查看摘要][在线阅读][下载 512K]
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分子生药学

  • 丹参类黄酮3-O糖基转移酶基因Sm UF3GT的克隆、亚细胞定位及时空表达分析

    李红艳;刘景玲;金伟波;梁宗锁;

    类黄酮3-O糖基转移酶家族(UFGT)是植物细胞中催化不稳定花青素转化成稳定花青素苷的关键酶。该研究基于同源克隆和转录组数据库从丹参花瓣中克隆得到了UFGT家族基因之一,命名为SmUF3GT。该基因包含一个1 353 bp的开放阅读框,编码450个氨基酸,并进行了生物学信息分析。初步定位于细胞质膜,细胞核,以及细胞基质中的过氧化物酶体、高尔基体上。qRT-PCR分析表明,SmUF3GT在丹参和白花丹参中除了根的其他组织器官均有不同丰度的表达;在花发育进程中,在丹参花瓣中的表达呈现先升后降的趋势,而在白花丹参花瓣中呈现先急剧下降后缓慢下降的趋势。该研究为进一步探讨SmUF3GT基因在丹参类黄酮次生代谢产物的合成积累机制中的作用奠定基础。

    2019年10期 v.44 2038-2045页 [查看摘要][在线阅读][下载 613K]
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  • 产哈巴苷和哈巴俄苷玄参内生真菌的分离及鉴定

    沈湛云;朱波;张泉龙;秦路平;

    从玄参根、主茎、侧枝、叶片中分离得到内生真菌,采用高效液相和液质联用的方法对内生真菌的代谢产物进行分析,筛选能够产哈巴苷或哈巴俄苷的内生真菌,根据菌株的形态学特征,结合分子生物学的系统进化分析进行菌株鉴定。结果表明从玄参中共分离得到内生真菌210株,合并为46个形态型,分属于2纲、9目、13科、17属。HPLC初步筛选出2株内生真菌能够分别产哈巴苷和哈巴俄苷,LC-MS进一步验证得到了能产哈巴俄苷的目标菌株ZJ17,鉴定为Alternaria alternate;以及能产哈巴苷的目标菌株ZJ25,鉴定为A.gaisen。

    2019年10期 v.44 2046-2050页 [查看摘要][在线阅读][下载 337K]
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制剂与炮制

  • 不同产地葛根饮片的UPLC指纹图谱结合多成分含量测定研究

    黄紫炎;沈钱能;李平;苏联麟;陈丽红;陆兔林;毛春芹;

    建立不同产地葛根饮片的UPLC指纹图谱和同时测定6种异黄酮类化合物含量的UPLC分析方法。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2. 1 mm×50 mm,1. 7μm),流动相乙腈-0. 05%甲酸,梯度洗脱;检测波长250 nm;流速0. 2 mL·min~(-1);柱温30℃;进样量2μL;采用中药指纹图谱相似度评价系统进行相似度评价,并使用Simca-P软件中的主成分分析(PCA)与偏最小二乘法判别(OPLS-DA)寻找3个产地的差异成分。29批样品相似度均在0. 90以上,表明样品一致性良好,经PCA与OPLS-DA分析,葛根聚集为3组,并发现了葛根芹菜糖苷、大豆苷、大豆苷元等6个差异成分。对其中3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、葛根芹菜糖苷、大豆苷、大豆苷元6种异黄酮的含量测定结果表明,同一成分在各产地葛根饮片中的含量差异明显,不同成分的波动范围不同;各产地6种异黄酮质量分数为安徽11. 21%>河南10. 97%>陕西9. 38%。构建的不同产地葛根饮片UPLC指纹图谱结合多成分含量测定方法为完善葛根饮片的质量控制和品质评价提供了更全面的参考。

    2019年10期 v.44 2051-2058页 [查看摘要][在线阅读][下载 464K]
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  • 复方丹参片中酚酸类成分一测多评方法的建立及在质量传递规律中的应用

    李紫阳;匡艳辉;冯伟红;李祥溦;张东;朱晶晶;王智民;王德勤;

    为构建中成药大品种复方丹参片药材-饮片-中间体-制剂全产业链质量管理模式,建立复方丹参片生产关键环节的质量标准和质量控制体系,该文以丹酚酸B为内参物,平行建立3套丹酚酸B与其他酚酸类成分间的相对校正因子,求取平均值获得校正因子。通过研究质量传递过程,优化丹参提取液浓缩环节。研究结果表明:所建立的3套相对校正因子之间RSD在1. 7%~4. 1%,丹参药材及制剂中酚酸类各成分一测多评的计算结果与外标法测定结果无显著差异;此外,质量传递研究表明,随着浓缩温度升高,酚酸类成分的含量发生变化,当浓缩温度高于80℃,对丹酚酸B成分影响显著,建议工业生产中合理控制浓缩温度。该研究结果为复方丹参片全产业链质量控制体系的建立提供方法学,为药材及成药产品质量的提升提供质量控制方法。

    2019年10期 v.44 2059-2064页 [查看摘要][在线阅读][下载 294K]
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  • 牡丹皮配方颗粒的质量评价体系研究

    杜新刚;姜慧洁;张慧;颜继忠;

    建立科学完善的牡丹皮配方颗粒质量评价体系,包括含量测定方法、特征图谱方法和质谱分析方法。利用高效液相色谱法对牡丹皮配方颗粒进行含量测定,颗粒中的芍药苷平均质量分数为1. 72%,丹皮酚平均质量分数为1. 42%。利用特征图谱对牡丹皮配方颗粒进行整体定性,包含7个特征峰,分别为没食子酸,对羟基苯甲酸,氧化芍药苷,芍药苷,四没食子酰葡萄糖,1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖,丹皮酚。利用质谱分析进行化学成分分析,共鉴定牡丹皮配方颗粒中40个化合物,包括没食子酸类、芍药苷类、丹皮酚类、黄酮类及苯甲酸类化合物。该研究将多种分析手段应用于牡丹皮配方颗粒的质量评价体系中,对提高质量评价和过程质量控制水平起到积极的促进作用。

    2019年10期 v.44 2065-2071页 [查看摘要][在线阅读][下载 385K]
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  • 靶向及pH敏感仿脂蛋白结构纳米载体运载紫杉醇的体内抗肿瘤研究

    陈聪慧;刘孟瑜;

    紫杉醇作为广谱抗癌药物具有良好的抗肿瘤活性,但存在的许多问题限制了其临床应用。该研究利用制备的具有靶向及pH敏感功能的新型仿脂蛋白结构纳米载体(FA-BSA-LC/DOPE),包载紫杉醇(paclitaxel,PTX)进行体内抗肿瘤效果研究。通过小动物活体成像技术,考察载近红外荧光染料的新型脂蛋白结构纳米载体在荷瘤裸鼠体内不同时间的肿瘤靶向效果及在各组织的不同分布情况;对各组不同载药制剂进行荷瘤裸鼠的体内抗肿瘤研究并对各组治疗后的肿瘤组织进行病理染色分析,考察其体内抗肿瘤效果。结果表明,新型仿脂蛋白结构纳米载体在肿瘤组织具有明显靶向能力且具有相对长的保留时间;在体内抗肿瘤活性研究中,FA-BSA-LC/DOPE-PTX组表现出显著的荷瘤裸鼠的肿瘤抑制作用,肿瘤生长抑制率为79. 3%,并且通过各组肿瘤组织切片经HE染色后的组织学形态观察发现,FA-BSA-LC/DOPE-PTX组具有严重的细胞坏死区域。因此,FA-BSA-LC/DOPE作为具有生物相容性,肿瘤靶向以及pH敏感释药功能的一种新型脂蛋白结构纳米载体运载紫杉醇,在体内具有显著的抗肿瘤效果。

    2019年10期 v.44 2072-2077页 [查看摘要][在线阅读][下载 419K]
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  • 盐补骨脂饮片标准汤剂分析研究

    李祥溦;吕新林;李紫阳;蒋彤;张永欣;朱晶晶;史辑;

    中药饮片标准汤剂是以中医理论为指导,临床应用为基础,参考现代提取方法,经标准化工艺制备而成的单味中药饮片水煎剂,其质量标准的建立有利于临床用药的规范化。该研究通过对盐补骨脂饮片的标准汤剂进行研究,制备了12批盐补骨脂饮片标准汤剂,并对其中补骨脂素、异补骨脂素进行含量测定,计算转移率,测定出膏率及pH,同时建立了HPLC特征图谱分析方法。由研究结果可得,12批合格的盐补骨脂饮片标准汤剂中补骨脂素和异补骨脂素转移率分别为17. 10%~26. 40%,14. 70%~22. 70%,干膏得率14. 7%~27. 0%,pH 5. 4~6. 9,并用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A)软件进行指纹图谱分析,确定了7个共有峰,对12批盐补骨脂饮片标准汤剂分别进行相似度评价,其相似度均大于0. 9。该研究中盐补骨脂标准汤剂制备方法规范,标准汤剂指纹图谱相似度高,其方法精密度、稳定性、重复性及加样回收率均良好,建立了便捷、可靠的质量评价方法,可为盐补骨脂标准汤剂及配方颗粒质量控制提供参考。

    2019年10期 v.44 2078-2083页 [查看摘要][在线阅读][下载 301K]
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  • 基于寒热证模型大鼠研究五倍子发酵百药煎的药性变化和归属

    王瑞生;张振凌;陈祎甜;夏云岭;林秀敏;张江山;闫梦真;

    研究五倍子与百药煎对寒、热证模型大鼠的影响,揭示五倍子发酵为百药煎的药性变化和归属。建立左甲状腺素钠片灌胃给药诱导大鼠热证模型和冰水刺激诱导大鼠寒证模型,分别灌胃给予五倍子和百药煎不同剂量水煎液15 d,观察记录体征指标的变化,测定大鼠肝脏中丙酮酸(PA)含量和ATP酶活力,血清中大鼠多巴胺(DA)、甲状腺激素(T4)、磷酸腺苷(cAMP)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、17-羟皮质类固醇(17-OHCS)、促甲状腺激素释放激素(TRH)和促甲状腺激素(TSH)含量。结果热证模型组大鼠肛温、饮食饮水量及体质量升高,模型组cAMP,NE,17-OHCS,TRH,PA含量显著升高(P<0. 05),TSH,Na-K ATPase,Ca-Mg ATPase含量较空白组极显著升高(P<0. 01),5-HT含量较空白组显著降低(P<0. 05);五倍子高剂量(WG)及百药煎高剂量组(BG) T4,DA,NE,TSH,TRH,cAMP,17-OHCS含量极显著降低(P<0. 01),PA,Ca-Mg ATPase较模型组含量显著降低(P<0. 05),且五倍子高剂量组(WG)含量低于百药煎高剂量组,但无显著性差异;五倍子高剂量组及百药煎高剂量组大鼠血清5-HT含量较模型组均升高,且五倍子高剂量组含量高于百药煎高剂量组,但无显著性差异;热证模型组大鼠各脏器指数与空白组比较未出现明显改变,给药组大鼠脏器指数与模型组比较,未见显著性差异。寒证模型组、五倍子组和百药煎组大鼠均出现肛温、饮食饮水量及体质量降低,DA,T4,cAMP,NE,17-OHCS,TRH,TSH,PA,Na-K ATPase,CaMg ATPase含量较空白组均显著降低(P<0. 05),5-HT含量较空白组均显著升高(P<0. 05),心、肺、肾脏指数较空白组显著升高(P<0. 05)。五倍子和百药煎均能明显改善左甲状腺素钠所致的热症模型大鼠症状,且五倍子的效果优于百药煎,但均不能改善冰水刺激引起的寒证模型大鼠症状,提示五倍子与百药煎药性同为寒凉,但百药煎寒性弱于五倍子,发酵炮制的百药煎寒性缓和,结合临床应用药性归属"微寒"比"平"更为准确。

    2019年10期 v.44 2084-2089页 [查看摘要][在线阅读][下载 280K]
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化学

  • 海洋放线菌Streptomyces sp.MDW-06中1个新的聚酮类化合物

    王聪;邱子言;雷福厚;谭学才;姜明国;李浩;李小燕;

    分离鉴定海洋放线菌Streptomyces sp.MDW-06的次级代谢产物。利用柱色谱等方法对发酵产物进行分离、纯化,运用质谱、核磁共振和比旋光等手段鉴定化合物的结构,采用药敏纸片法和DPPH法评价了化合物的抗菌活性和抗氧化活性。从海洋放线菌Streptomyces sp.MDW-06的发酵产物中分离鉴定了6个化合物(1~6):streptopentanoic acid(1),germicidin A(2),germicidin B(3),isogermicidin A(4),isogermicidin B(5)以及oxohygrolidin(6)。其中化合物1为新化合物。化合物1在100 mg·L~(-1)下显示有弱的DPPH自由基清除活性,清除率为36. 4%。

    2019年10期 v.44 2090-2095页 [查看摘要][在线阅读][下载 346K]
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  • 小黄皮枝叶中化学成分研究

    胡时;郭嘉铭;张文浩;张明明;刘艳萍;付艳辉;

    综合运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型高效液相色谱等现代色谱分离技术对芸香科黄皮属植物小黄皮Clausena emarginata枝叶中的化学成分进行系统研究。根据化合物的理化性质和波谱数据,并通过与文献对照,鉴定了从小黄皮枝叶的90%乙醇提取物中分离得到的16个化合物,分别鉴定为:siamenol (1),murrastanine A(2),3-formyl-1,6-dimethoxycarbazole (3),3-methoxymethylcarbazole (4),3-methylcarbazole (5),murrayafoline A (6),3-formylcarbazole (7),3-formyl-1-hydroxycarbazole (8),3-formyl-6-methoxycarbazole (9),murrayanine (10),murrayacine (11),girinimbine (12),nordentatin (13),chalepin (14),8-hydroxy-6-methoxy-3-pentylisocoumarin (15)和ethyl orsellinate (16),其中化合物1~12为咔唑生物碱类化合物,化合物13和14为香豆素类化合物,化合物15和16为酚酸类化合物。化合物1~4,14~16为首次从小黄皮中分离得到,其中化合物1,2,15和16为首次从黄皮属植物中分离得到。对分离得到的所有化合物的细胞毒活性进行了评价,评价结果表明化合物12和14对5株人肿瘤细胞株(HL-60,A549,SMMC-7721,MCF-7和SW480)均显示出了较为显著的生长抑制活性,其细胞毒活性与抗肿瘤阳性对照药阿霉素的活性相当。

    2019年10期 v.44 2096-2101页 [查看摘要][在线阅读][下载 278K]
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  • 决明子萘骈吡喃酮类对照提取物中主要化学成分UPLC-MS~n分析及定值研究

    王路;周德勇;蒋丽娟;张金华;张薇;姜艳艳;刘斌;

    以含量明确、化学组成相对固定的决明子萘骈吡喃酮类对照提取物为研究对象,对其主要化学成分进行分析,并开展定值研究。分别采用超高效液相色谱-LTQ-Orbitrap XL质谱联用技术和高效液相色谱分析方法,从主要化学成分组成及主要指标成分定值2个层面对决明子对照提取物展开系统研究。结果表明,决明子萘骈吡喃酮类对照提取物化学组成相对固定,鉴定出7个萘骈吡喃酮类成分;其中决明子苷B_2、决明子苷C_2、红镰霉素-6-O-β-D-龙胆二糖苷和决明子苷C为主要化学成分的定值结果及不确定度分别为(11. 40±0. 26)%,(11. 68±0. 24)%,(16. 60±0. 22)%,(28. 8±0. 48)%。该研究实现了对决明子对照提取物的准确赋值,为决明子萘骈吡喃酮类对照提取物应用于决明子药材质量控制奠定基础,同时也为中药对照提取物替代单一化学对照品提供新思路。

    2019年10期 v.44 2102-2109页 [查看摘要][在线阅读][下载 354K]
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  • 基于UPLC-LTQ-Orbitrap-MS及网络药理学的复方黄柏液治疗糖尿病足活性成分研究

    李欣;王欢欢;许静;唐力英;李德凤;张毅;贾蔷;杨洪军;吴宏伟;张晶晶;

    该研究采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)对复方黄柏液化学成分进行定性分析,色谱柱为Waters HSS T3-C_(18)色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm),流动相为0. 1%甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速0. 3 mL·min~(-1)。根据化合物的母离子、子离子的质谱信息,对照品比对、文献信息进行成分鉴定。在此基础上,利用网络药理学研究方法,对复方黄柏液化学成分进行靶标预测、功能富集以及分子对接验证,筛选出与糖尿病足相关的活性成分、阐释其作用机制。结果表明,从复方黄柏液中共鉴定了138种化合物,包括:生物碱28种,黄酮类16种,苯乙醇苷类11种,环烯醚类9种,环已基乙醇衍生物11种,酚酸及衍生物28种,木脂素类3种,萜类4种,挥发油及其他28种。从中共筛选出36种与糖尿病足相关的活性成分。靶标功能富集结果表明复方黄柏液主要从调控炎症反应、生长因子等7个功能方面实现对糖尿病足的治疗。该研究结合LTQ-Orbitrap-MS质谱分析与网络药理学研究方法,为复方黄柏液的有效成分的识别、质量标志物的筛选以及解析其作用机制提供参考。

    2019年10期 v.44 2110-2117页 [查看摘要][在线阅读][下载 666K]
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药理

  • 补骨脂素和异补骨脂素下调NF-κB活性改善LO2细胞脂代谢紊乱的机制研究

    周俪姗;鄢素琪;熊小丽;黄娟;秦欢;张领领;张林利;汤建桥;

    探讨补骨脂素和异补骨脂素对正常人肝细胞(LO2)内脂质沉积的改善及作用机制。建立棕榈酸(PA)诱导的人LO2细胞非酒精性脂肪肝模型,给予补骨脂素和异补骨脂素干预,酶法检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,细胞上清液谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量; ELISA法检测细胞上清液促炎因子(IL-6,TNF-α)及趋化因子(IL-8,MCP-1)的表达; Western blot法检测细胞内核因子κB(NF-κB) p65磷酸化(p-p65)及非磷酸化蛋白(p65)、转化因子(TGF)β1蛋白表达。结果显示,与模型组比较,补骨脂素组细胞内TG,TC含量降低(P<0. 01,P<0. 05),细胞上清液中ALT和AST含量、促炎因子及趋化因子分泌水平均有降低(P<0. 01,P<0. 05),细胞内p-p65/p65比值及TGF-β1蛋白表达明显下降(P<0. 01);异补骨脂素组细胞内TG含量无明显变化,其余检测指标均有降低(P<0. 01,P<0. 05)。补骨脂素疗效优于异补骨脂素(P<0. 01,P<0. 05)。结果表明,补骨脂素对PA诱导LO2细胞脂肪变性具有改善作用;补骨脂素和异补骨脂素均对PA诱导LO2细胞损伤具有缓解作用,可抑制NF-κB的活性减轻炎症反应并下调TGF-β1表达。

    2019年10期 v.44 2118-2123页 [查看摘要][在线阅读][下载 345K]
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  • 基于网络药理学探索生化汤治疗小腹痛的药理机制

    王煊;于河;白辰;徐竞男;甄建华;谷晓红;

    《傅青主女科》中所记载的生化汤为产后常用方,广泛应用于产后及妇科诸症,但其治疗小腹痛的作用机制尚不明确。该文应用网络药理学,探索生化汤治疗小腹疼痛的作用机制,为临床更好的使用生化汤提供数据支持。在SymMap中分别检索小腹痛和生化汤药物的靶标,运用String和Cytoscape进行富集分析,构建症-药-靶标生物网络。结果显示,生化汤中含有靶标400个,其中11个与小腹痛的疾病基因重合;经String分析,得到基因间互作关系18个;经模块化处理后,得到含有6个基因的1个模块;经String富集分析,得到biological process富集结果 170条、molecular function富集结果 2条、KEGG pathways富集结果 30条。生化汤可能通过神经-内分泌-免疫、代谢等多方面参与小腹痛的治疗过程,其机制为通过加快子宫内组织细胞的修复增长,改善微循环,促进子宫内膜细胞更新及炎症消退,加速子宫复旧,同时调节自身免疫力,应用信号通路在部分天然免疫细胞抗感染过程中的功能和调控作用,补益正气,引邪外达,而达到治疗小腹痛的效果。

    2019年10期 v.44 2124-2130页 [查看摘要][在线阅读][下载 486K]
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  • 甘草调和大黄“泻下攻积”作用的量-毒-效关系研究

    陈艳琰;曹玉洁;唐于平;陈嘉倩;乐世俊;李佳佳;张赛;周桂生;段金廒;

    该文研究甘草对不同剂量大黄"泻下攻积"效应及毒副作用的调和之性。将108只ICR小鼠分为空白组,模型组,阳性药物组,低、中、高剂量大黄组,低、中、高剂量大黄甘草汤组,以盐酸洛哌丁胺连续给药6 d复制小鼠便秘模型后,各组分别给予乳果糖、不同剂量大黄及大黄甘草汤水提液14 d。给药结束后比较各组小鼠排便特征,血液生化,肝、肾、结肠病理学改变情况,并基于因子分析给出的客观权重,采用多指标评分法综合分析大黄-甘草配伍前后的量-毒-效关系。通过因子分析提取了2个公因子,分别代表效应和毒性。结果显示,大黄在《中国药典》高限1/2,2,8倍剂量下均能产生较好的泻下效果,增加小鼠排便量及肠道推进率,减少口肛传输时间,增加粪便含水量;与甘草配伍能缓和其泻下作用,在《中国药典》高限的1/2剂量下尤为明显。而《中国药典》高限2,8倍剂量下大黄表现出明显的肝脏及结肠毒性,能够使小鼠ALT,AST升高,肝细胞空泡变性,结肠系数增加;与甘草配伍能显著降低其毒性。结果表明甘草对大黄具有"调和"作用,一方面能够缓和大黄的"泻下攻积"之效,另一方面则能减弱大黄峻猛之性导致的肝肠毒性。

    2019年10期 v.44 2131-2138页 [查看摘要][在线阅读][下载 631K]
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药代动力学

  • 基于代谢组学研究熟三七发挥补血作用的机制

    张银;费倩倩;汪晶;朱粉霞;陈彦;汤道权;陈斌;

    该文运用高效液相色谱-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)技术研究熟三七(蒸制三七)对乙酰苯肼(APH)致溶血性贫血大鼠血浆中内源性标志物的影响,旨在发现熟三七对溶血性贫血大鼠补血作用的潜在生物标记物及可能的补血作用机制。采用熟三七、药对(熟三七-人参)和复方(三七养血胶囊)分别干预APH诱导的溶血性贫血模型大鼠,测定红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)等血液常规指标以及相关脏器指标。与空白组比较,模型组大鼠RBC,Hb水平显著降低(P<0. 01),肝、脾脏器指数升高(P<0. 05),血常规和脏器指标测定结果表明血虚证大鼠造模成功。而熟三七能显著升高大鼠RBC水平(P<0. 01),各给药组的相关指标均有良好的回调趋势,验证了熟三七的补血作用。对收集的血浆样品应用UPLC-Q-TOF-MS技术,并结合主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),对正常组、模型组之间的代谢谱进行分析,筛选出26个溶血性贫血的潜在生物标记物。血虚大鼠体内视黄醇、L-缬氨酸、花生四烯酸等9个代谢物下调,原卟啉Ⅸ、烟酰胺等17个代谢物上调。大鼠给予熟三七、药对、复方后可使生物标志物代谢水平向正常状态转归,推测熟三七可能从改善缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成、视黄醇代谢、花生四烯酸代谢等8条代谢途径发挥补血的作用。

    2019年10期 v.44 2139-2148页 [查看摘要][在线阅读][下载 546K]
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  • 麻黄汤有效组分配伍在发热大鼠体内的药动学研究

    万嘉洋;田彦芳;万海同;虞立;周惠芬;李畅;何昱;

    该研究以注射干酵母制备大鼠发热模型,灌胃给予麻黄汤组方药味主要有效组分(麻黄总生物碱、桂枝挥发油、苦杏仁苷、甘草总黄酮+甘草总皂苷)正交剂量配比不同的9个组方,然后运用LC-MS方法测定麻黄汤7种主要有效成分(盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、盐酸甲基麻黄碱、桂皮酸、苦杏仁苷、甘草苷以及甘草酸)在不同时间点的血药浓度。在非房室模型拟合药动学参数的基础上,计算总量零阶距AUCt和总量一阶距MRTt,探讨配伍对总量统计矩参数的影响。结果显示麻黄汤有效组分正交配伍给药后,7种有效成分在发热大鼠体内的药代动力学特征存在差异。正交分析说明不同配伍组分对总量统计矩参数有不同的影响,麻黄汤各组分对AUCt的贡献率大小依次为:麻黄总生物碱>桂枝挥发油>苦杏仁苷>甘草总黄酮+甘草总皂苷,而对MRTt的贡献率大小依次为:麻黄总生物碱>甘草总黄酮+甘草总皂苷>苦杏仁苷>桂枝挥发油,其中麻黄总生物碱对两者的影响均最为显著。各组分对AUCt的最优组合为A_3B_3C_2D_1,对MRTt的最优配伍为A_1B_1C_1D_1。

    2019年10期 v.44 2149-2155页 [查看摘要][在线阅读][下载 336K]
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  • UPLC-Q-TOF-MS/MS分析荭草花有效组分在大鼠血清和尿液中的原型成分及其代谢产物

    陈思颖;夏涛;郑林;李月婷;巩仔鹏;黄勇;李勇军;赵平;

    应用超高效液相色谱串联电喷雾飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析SD大鼠灌胃给予荭草花有效组分后所得血清和尿液中的原型成分及代谢产物。采用Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm),以0. 1%甲酸水(A)-0. 1%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾正负离子模式下获取生物样品中化学成分的质谱数据,通过比较空白样品、给药样品和两者的差异图谱确认灌胃后大鼠血清和尿液中原型成分及其代谢产物。利用TOF/MS得到的准确相对分子质量,多级质谱裂解信息,结合对照品及相关文献报道结果对比,对尿液和血清中荭草花原型成分和代谢产物进行鉴定。结果发现,在大鼠血清、尿液中分别检测到12,26个代谢产物(含交叉成分),代谢途径主要包括以氢化还原、开环裂解、羟基化、甲基葡萄糖醛酸化、葡萄糖醛酸化、硫酸化等。该实验建立的方法可靠、有效,可用于荭草花有效部位在血清和尿液中的代谢研究,研究结果为该药材今后的药效物质基础研究提供了理论参考。

    2019年10期 v.44 2156-2162页 [查看摘要][在线阅读][下载 492K]
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  • 基于在体肠灌流模型的四妙勇安汤活性成分拆方配伍研究

    于潇;迟森森;焦其树;蒋丽娟;王卫华;姜艳艳;刘斌;

    采用大鼠在体单向肠灌流模型,以UPLC-MSn测定四妙勇安汤水提物中绿原酸、甘草苷、金丝桃苷、安格洛苷C和异绿原酸C 5种抗炎活性成分在不同拆方配伍组合及不同肠段中的含量,通过计算所得到的肠吸收参数为指标对上述成分在多种配伍组合中的肠吸收情况进行评价。结果显示,四妙勇安汤5种活性成分中,除甘草苷回肠吸收参数在单味甘草中最高,其余4种成分在回肠和十二指肠中的肠吸收参数均配伍组合时高。其中,绿原酸在全方配伍时回肠和十二指肠吸收参数均处于最高水平,异绿原酸C在全方及金银花-玄参-甘草3药配伍组合时吸收参数处于较高水平,而不同配伍组合中的金丝桃苷和安格洛苷C的肠吸收情况在回肠和十二指肠中截然相反。该研究通过考察四妙勇安汤中5种活性成分在不同拆方配伍组合的肠吸收情况,揭示了活性成分的吸收往往会因配伍组合方式及肠段的不同而有所差异。同时也表明了通过复方配伍,可明显促进活性成分的吸收,从生物学角度为四妙勇安汤配伍规律的研究奠定了一定的基础。

    2019年10期 v.44 2163-2170页 [查看摘要][在线阅读][下载 396K]
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临床

  • 三子养亲汤加味治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的系统评价

    郑文江;彭紫荆;陈淑婉;洪榆;黄慧婷;廖慧丽;刘小虹;

    电子检索中国学术期刊全文数据库(CNKI),PubMed等7大中英文数据库,检索时间为自建库至2018年12月25日,检出所有三子养亲汤加味治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者(试验组)的临床随机对照试验(RCTs),由2名研究员各自独立严格按照纳入和排除标准进行纳入研究的质量评价和资料提取,用Stata/SE 14. 0进行Meta分析、TSA 0. 9. 5. 10Beta软件进行试验序贯分析,系统评价三子养亲汤加味治疗AECOPD患者的临床疗效和安全性。共纳入22个RCT包括2 012例患者。Meta分析:与对照组相比,试验组可以更好地改善AECOPD患者的临床症状(RR=1. 19,95%CI[1. 15,1. 24],P=0);改善肺功能,包括第1秒用力呼气量(FEV_1)(SMD=0. 96,95%CI[0. 39,1. 52],P=0. 001)、FEV_1占预计值的百分比(FEV_1%)(SMD=0. 80,95%CI[0. 20,1. 41],P=0. 009)、用力肺活量(FVC)(SMD=0. 69,95%CI[0. 06,1. 31],P=0. 032)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV_1/FVC)(SMD=0. 81,95%CI[0. 64,0. 97],P=0);并且能提高患者动脉血氧分压(PaO_2)(SMD=0. 87,95%CI[0. 41,1. 32],P=0)、降低动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)(SMD=-0. 91,95%CI[-1. 33,-0. 49],P=0);此外,试验组的不良反应发生率低,且无严重不良反应事件。试验序贯分析(TSA)显示临床有效率累积纳入的研究同时穿过了传统界值和TSA界值,提示试验组的疗效得到进一步肯定。研究表明,在西医常规治疗基础上联合三子养亲汤加味治疗AECOPD患者,可提高临床疗效、改善肺功能、提高PaO_2、降低PaCO_2、安全性较好,但受纳入研究质量的限制,尚需要更多高质量RCT进一步验证。

    2019年10期 v.44 2171-2178页 [查看摘要][在线阅读][下载 554K]
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  • 3种中药注射剂治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的网状Meta分析

    朱秀影;谢惠芳;韩海;高峰;

    该研究系统评价3种中药注射剂(CMI)联合西医常规治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)对肺功能的影响和安全性。计算机检索PubMed、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方(WanFang)和维普(VIP)数据库(检索时限均从建库至2018年7月),搜集有关临床常用的3种中药注射液(喘可治注射液、痰热清注射液、血必净注射液)辅助治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重的随机对照试验。对纳入研究进行质量评价和数据提取,用软件Stata 14做网状Meta分析,用RevMan 5.3作风险偏倚图。最终纳入4个RCTs、20个半随机对照试验,共计579例AECOPD患者。网状Meta分析显示:①3种CMI与对照组第1秒用力呼气容积(FEV1)间均有统计学差异,CMI之间均无统计学差异;②3种CMI联合西医常规治疗AECOPD,根据第1秒用力呼气容积的频率排序结果,痰热清注射液联合西医常规治疗改善FEV1更为显著,其次为血必净注射液联合西医常规治疗、喘可治注射液联合西医常规治疗。基于目前的证据,3种CMI均能在西医常规治疗AECOPD的基础上进一步改善FEV1。另外该研究结论仍需要大量设计合理、方法得当的RCTs给予证实。

    2019年10期 v.44 2179-2184页 [查看摘要][在线阅读][下载 347K]
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  • 漳州片仔癀药业股份有限公司

    <正>漳州片仔癀药业股份有限公司是国有控股上市公司,2003年在上海证券交易所挂牌上市(股票代码600436),现股本6.03亿股,市值超500亿,目前拥有34家控股子公司、8家参股公司,职工2000多人,拥有5大品类,共400多种产品。公司秉持"科技驱动、创新发展"的宗旨,坚寺传承创新,立足中药做精中药,跨出中药做大产业。形成以"传统中药生产为核心,以化妆品、日化产品和保健食品为两翼"的大健康产业发展战略,致力打造科技强企。

    2019年10期 v.44 2185页 [查看摘要][在线阅读][下载 4656K]
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