专家述评

  • 协同创新,助力中药安全合理用药

    肖小河;刘昌孝;

    国家近期推出的系列利好政策为中医药的发展注入了强大新动能,中药的安全性和有效性问题也因此备受关注。雷公藤是临床确有疗效又具安全性风险的中药之一,围绕其临床合理用药问题,国内已开展多学科协同创新研究。该专刊主要介绍近2年来该领域所取得的部分进展,内容涵盖雷公藤及其制剂的临床应用、药理毒理、药代动力学、资源与鉴定、分子生药学等方面,对保证中药安全合理用药、促进中药产业健康发展具有重要意义和示范效用。

    2019年16期 v.44 3365-3367页 [查看摘要][在线阅读][下载 109K]
    [引用频次:0 ] |[下载次数:192 ]

综述

  • 雷公藤制剂的化学成分及质量研究现状

    王亚丹;汪祺;张建宝;戴忠;林娜;吴先富;马双成;

    雷公藤制剂具有免疫抑制、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性,在临床上广泛用于治疗类风湿性关节炎、红斑狼疮和肾病综合征等自身免疫性疾病,疗效确切,但同时由于其成分复杂、毒性较大、治疗窗口窄,患者服用后易引起肝、肾、血液、生殖等多系统损伤,不良反应高发。目前由不同企业生产的雷公藤制剂受原料及生产工艺等因素的影响,存在成分差异较大、质量不够稳定等问题,从而导致临床疗效和毒副作用相差较大,而已有的质量标准在指标成分和限量方面存在争议,不能有效的对制剂的质量进行整体控制。该文主要对雷公藤的4种中药制剂,包括雷公藤片、雷公藤总萜片、雷公藤双层片和雷公藤多苷片的化学成分、质量标准现状及质量控制方法研究等方面进行综述,为该类制剂的质量提高提供思路与借鉴。

    2019年16期 v.44 3368-3373页 [查看摘要][在线阅读][下载 205K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:249 ]
  • 雷公藤对免疫系统作用及机制研究进展

    农程;王欣之;江振洲;张陆勇;

    传统中药雷公藤是我国的一种天然植物药,其化学成分复杂,应用历史悠久,早期作为杀虫剂保护农作物,后发现在治疗类风湿关节炎方面有显著疗效,引起广泛的关注。随着研究的深入,发现其具有多种药理活性,在抗癌、神经保护、抗炎及免疫抑制方面都有显著的疗效,能够治愈多种疾病,广泛应用于医疗领域。雷公藤的多种提取物具有独特的免疫抑制功能,通过多靶点多途径发挥免疫作用,在治疗自身免疫性疾病中疗效显著。雷公藤作为一种免疫抑制药物,应用前景十分广阔,值得深入的开发研究。在雷公藤取得良好临床疗效的同时,有关其毒性作用的报道也日益增多,对机体的多个系统产生不良反应,极大地阻碍了临床上的使用。为更深刻全面的了解雷公藤免疫抑制作用,降低或避免毒副作用的产生,现综述近几年国内外雷公藤对免疫器官、细胞、因子的作用和机制研究的进展,以及雷公藤的药理和毒性作用,为其在临床上发挥更广泛的治疗作用,提供科学合理的参考依据。

    2019年16期 v.44 3374-3383页 [查看摘要][在线阅读][下载 202K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:431 ]
  • 雷公藤及其提取物对类风湿关节炎固有免疫系统调节的研究进展

    李剑明;姜泉;唐晓颇;杨卉;周志强;

    类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性、侵蚀性多关节炎为主要表现的自身免疫性疾病,固有免疫(innateimmunity)系统在RA的发病机制中起关键作用。雷公藤及其提取物对固有免疫细胞包括巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞、肥大细胞、NKT细胞等,以及多种固有免疫分子包括细胞因子、黏附分子、模式识别受体(PRR)、补体分子等均具有调节作用,在RA固有免疫参与的发病机制中发挥调节。该文结合近年来国内外以固有免疫参与RA发病机制的研究,综述雷公藤及其提取物调节RA固有免疫的研究现状。

    2019年16期 v.44 3384-3390页 [查看摘要][在线阅读][下载 174K]
    [引用频次:3 ] |[下载次数:563 ]
  • 雷公藤甲素单用及联合用药抗肿瘤的作用及机制研究进展

    石金凤;罗尧尧;李佳鑫;罗锐锋;陈梁;李杰;章津铭;傅超美;

    恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大慢性病,如何有效地控制以及治愈肿瘤是当今医学领域中亟待解决的首要问题之一。目前手术以及放疗化疗仍是其主要治疗方式,其中放化疗带来的毒副作用不容小觑。因此寻找低毒高效并且对肿瘤细胞具有靶向性的新型抗肿瘤药物具有重要的现实意义。随着肿瘤发病率的不断升高,中药抗肿瘤作用日益成为研究热点,雷公藤甲素是一种来源于雷公藤的天然二萜类活性成分,作为雷公藤的高活性成分之一,具有抗炎、免疫抑制、抗肿瘤等多重作用。大量的体内外研究证实其对多种癌症具有良好的抗肿瘤活性,通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞自噬、阻滞肿瘤细胞周期、抑制肿瘤细胞迁移、侵袭和转移、逆转肿瘤多药耐药、介导肿瘤免疫和抑制肿瘤血管生成等方式进而发挥抗肿瘤作用。该文在文献报道的基础上,对雷公藤甲素的抗肿瘤作用及其机制进行综述,并针对目前有关雷公藤甲素的联合应用现状做分析,以促进雷公藤甲素研究的开展及临床上更好的应用。

    2019年16期 v.44 3391-3398页 [查看摘要][在线阅读][下载 311K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:235 ]
  • 近20年来雷公藤肝毒性研究概述

    田雅格;苏晓慧;刘立玲;孔祥英;林娜;

    雷公藤为治疗风湿病常用中药,疗效突出,然而其毒副作用,尤其肝毒性居单味肝损伤中药的首位,是困扰其临床运用的关键,也是阻碍其走向世界的绊脚石。基于此,该文对近20年来关于雷公藤肝毒性相关文献进行查阅,并从肝毒性表现、肝损伤的因素、毒性机制、减毒应对措施等方面对雷公藤的肝毒性研究进行总结,发现:①动物实验中雷公藤的肝毒性在生理状态下较病理状态下更为严重;②雷公藤的肝毒性是其所含有的多种有毒成分综合作用的结果,但生物碱类对肝脏毒性最大;用药剂量过大和累积服药量过大是雷公藤产生肝毒性的主要原因;③氧化应激学说仍是雷公藤肝毒性的重要机制,且Nrf2作为氧化应激的关键调控酶,已成为肝保护药物拮抗雷公藤肝毒性的作用靶点之一;线粒体自噬和肝超敏状态,是雷公藤诱导肝损伤的新机制;④控制用药量、药物配伍、炮制或改变剂型等措施有助于减轻雷公藤的肝毒性。该文旨在明确雷公藤肝毒性的研究现状和不足,以期提出新的研究策略,为合理评价雷公藤的安全性及临床合理用药提供思路。

    2019年16期 v.44 3399-3405页 [查看摘要][在线阅读][下载 197K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:266 ]
  • 近40年雷公藤生殖毒性研究概述

    徐颖;樊媛芳;赵元;林娜;

    该文总结了近40年来雷公藤生殖毒性的研究进展,并针对毒性表征、损伤机制及减毒措施等方面进行归纳分析,发现:①雷公藤的生殖毒性涉及雷公藤多苷/甙、雷公藤甲素和雷醇内酯等成分以及雷公藤片和雷公藤多苷片等制剂;②雷公藤制剂对男性生殖系统不良反应主要表现为精子活力下降、少精或无精,生育能力下降或不育等,长期用药还可能导致睾丸萎缩、性欲减退;对女性的不良反应主要表现为月经紊乱、经量减少甚至闭经、性欲减退、不孕等;③雷公藤的生殖毒性与生殖细胞凋亡、精子或卵子生成障碍、生殖靶组织睾丸及卵巢损伤、性腺组织内环境改变(激素、激素合成限速酶及能量代谢)等因素有关;④药物配伍、激素替代、用药时间和剂型改变等措施有助减轻雷公藤对生殖系统的损伤。针对目前研究存在的问题,作者从临床、药理代谢机制,制剂质量标准及新的治疗作用等方面提出了有利于雷公藤临床合理用药的建议。

    2019年16期 v.44 3406-3414页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:146 ]

药理与毒理

  • 基于转录组数据挖掘和生物分子网络分析整合的雷公藤多苷片治疗类风湿关节炎疗效标志的发现研究

    王晓月;王海隆;毛霞;李光耀;郭秋岩;李玮婕;郭敏群;姜泉;张彦琼;林娜;

    基于转录组数据挖掘和生物分子网络分析的整合研究策略,发现雷公藤多苷片治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的候选疗效标志,并构建其疗效预测模型。从临床收集接受雷公藤多苷片治疗的RA患者外周血样本,提取外周血单个核细胞(PBMC),整合全基因组表达谱特征分别获得雷公藤多苷片治疗RA疗效差异mRNA 360个(185个上调,175个下调)、miRNA 24个(7上调,17下调)。基于miRanada和Target Scan数据库共获得206个差异miRNA靶基因,建立miRNAs-靶mRNA共表达调控网络及miRNA介导的基因表达调控网络,并通过网络拓扑特征计算,筛选到3个候选疗效标志miRNAs(hsa-miR-4720-5p,hsa-miR-374b-5p,hsa-miR-185-3p)。基于上述3个候选标志在RA患者外周血样本中的表达量,采用偏最小二乘法,构建雷公藤多苷片治疗RA药效预测模型。通过5轮的交叉验证,该模型对雷公藤多苷片治疗RA的疗效预测准确率(ACC)分别为100. 00%,100. 00%,100. 00%,66. 67%,66. 67%,受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)曲线下面积(AUC)均为1. 00,表明该模型的预测性能良好且稳定。雷公藤多苷片治疗RA的疗效预测模型有助于临床筛选适用雷公藤多苷片治疗的RA患者,为临床制定RA个体化精准治疗方案提供一种新型、高效且无创的辅助工具。

    2019年16期 v.44 3415-3422页 [查看摘要][在线阅读][下载 442K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:297 ]
  • 雷公藤甲素对血管性痴呆大鼠认知功能的影响及对SIRT1/NF-κB信号通路的作用

    姚鹏;陈勇;徐国海;

    为了探讨雷公藤甲素对血管性痴呆大鼠认知功能的影响及对SIRT1/NF-κB信号通路的作用,筛选健康雄性SD大鼠50只,将实验动物随机分为5组:假手术组(Sham组)、血管性痴呆模型组(2VO组)、雷公藤甲素腹腔注射组(TR组)、雷公藤甲素腹腔注射+EX527侧脑室给药组(T+E组)、EX527侧脑室给药组(EX527组)。在建模4周后进行水迷宫实验及新物体认知实验检测大鼠学习和记忆能力;脑组织切片苏木素-伊红(HE)染色后观察各组大鼠海马区形态学变化;化学比色法检测海马区SOD,MDA活性; ELISA法检测海马区IL-6,TNF-α水平; Western blot法检测SIRT1,NF-κB,IκBα,caspase 3蛋白表达。结果显示,与Sham组相比,血管性痴呆模型大鼠学习和记忆能力降低,海马区SOD活性降低,MDA活性、IL-6含量升高,神经元退行性改变明显,SIRT1和IκBα蛋白表达降低,NF-κB和caspase 3表达升高;与2VO组相比,雷公藤甲素处理组海马区SOD活性升高,MDA活性及IL-6含量降低,神经元退行性改变显著减缓,SIRT1和IκBα蛋白表达升高,NF-κB和caspase 3表达明显降低,而同时使用雷公藤甲素和EX527后,SIRT1表达降低,海马区氧化应激水平及神经元退行性改变加重,学习和记忆能力降低。结果表明,雷公藤甲素可改善血管性痴呆大鼠认知功能障碍,其机制可能与SIRT1/NF-κB信号通路有关。

    2019年16期 v.44 3423-3428页 [查看摘要][在线阅读][下载 287K]
    [引用频次:3 ] |[下载次数:283 ]
  • 雷公藤甲素通过PI3K/AKT/m TOR通路诱导卵巢颗粒细胞自噬的实验研究

    白俊;吴也可;吴克明;朱虹丽;李楠;陈梅;刘丽秀;

    研究雷公藤甲素(triptolide,TP)诱导卵巢颗粒细胞(ovarian granulosa cells,OGCs)自噬所需的浓度、时间及对PI3K/AKT/m TOR通路的影响。采用CCK-8法比较不同浓度的TP对原代培养大鼠OGCs的抑制作用并计算IC50; Western blot法检测不同浓度、时间点下TP对OGCs自噬相关因子蛋白表达的影响,同时检测TP、自噬诱导剂(brefeldin A)、PI3K/m TOR抑制剂(NVP-BEZ235)分别干预OGCs对PI3K/AKT/m TOR通路及自噬相关因子蛋白表达的影响。结果显示,不同浓度TP作用于大鼠OGCs的IC50为14. 65μmol·L-1,其中最小抑制浓度为0. 1μmol·L-1(100 nmol·L-1);与空白对照组相比,各组beclin1,LC3Ⅱ蛋白表达水平均升高,LC3Ⅰ及p62蛋白表达水平均下降,其中100 nmol·L-1TP作用于大鼠OGCs 12 h,各指标变化显著(P<0. 05或P<0. 01); TP,brefeldin A,NVP-BEZ235分别处理大鼠OGCs 12 h后,与空白对照组相比,TP可显著促进下游自噬效应分子beclin1,LC3Ⅱ蛋白表达水平并抑制LC3Ⅰ,p62蛋白表达水平(P<0. 05或P<0. 01),且TP组beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达高于brefeldin A组,p62的表达低于brefeldin A组(P<0. 05或P<0. 01)。同时,TP能显著抑制p-PI3K,p-AKT,p-mTOR蛋白表达水平,且TP抑制效果优于NVP-BEZ235组。因此,该研究提示100 nmol·L-1TP作用于离体培养大鼠OGCs12 h,可成功诱导OGCs自噬; TP可能是通过抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路诱导OGCs自噬。

    2019年16期 v.44 3429-3434页 [查看摘要][在线阅读][下载 320K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:495 ]
  • 甘草炮制雷公藤对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠的抗炎及免疫调节作用

    吴昊;章从恩;于小红;马光朝;王伽伯;马致洁;赵奎君;

    为探讨甘草炮制雷公藤后对DSS诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抗炎作用及对肠道免疫系统的调节作用。该研究建立DSS诱导的UC小鼠动物模型,以美沙拉嗪(Mes)为阳性药;通过小鼠疾病活动指数(DAI)、结肠长度、结肠组织病理学评分等分析甘草炮制雷公藤低(PT1)、高(PT2)剂量给药后的药效作用;通过检测小鼠血清中的TNF-α和IL-6细胞因子表达水平,小鼠结肠的免疫组化CD3+T及Fox P3+Treg染色等分析甘草炮制雷公藤对UC小鼠的抗炎及免疫调节作用;研究还通过小鼠肝脏组织HE染色及血清ALT,AST水平分析各剂量甘草炮制雷公藤的肝毒性情况。结果显示,PT1组、PT2组给药后小鼠结肠炎症状减轻,炎症细胞浸润减少,炎症因子表达降低,且分别与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0. 05);甘草炮制雷公藤高、低剂量组肝脏HE染色及ALT,AST水平与正常组相比无显著差异。研究结果显示,甘草炮制雷公藤对UC小鼠具有抗炎及免疫调节作用,同时该剂量未呈现明显的肝毒性。

    2019年16期 v.44 3435-3440页 [查看摘要][在线阅读][下载 456K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:256 ]
  • 雷公藤多苷片抑制实验性类风湿关节炎血管新生的作用研究

    王靖霞;刘春芳;李逸群;苏晓慧;刘立玲;田雅格;王金霞;贾可欣;林娜;

    为了了解雷公藤多苷片对体外血管内皮细胞(HUVEC)管腔形成能力的影响以及对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜血管新生的作用,该研究拟采用20μg·L-1血管内皮细胞生长因子(VEGF)诱导HUVEC体外模型,观察0. 1,1,10mg·L-1雷公藤多苷片作用7 h后对HUVEC管腔形成和管腔分支点数目影响的情况;另外,通过建立CIA大鼠模型,以9,18,36 mg·kg-1·d-1雷公藤多苷片连续给药42 d,采用HE染色法观察CIA大鼠关节滑膜中血管形态和密度,免疫组化和免疫荧光双染法检测滑膜中血管内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)和α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的表达情况,免疫组化和Western blot法观察滑膜组织中低氧诱导因子1α(HIF1α)和血管紧张素(Ang1)的表达水平。结果显示,1,10 mg·L-1雷公藤多苷片可显著降低VEGF诱导的管腔分支点数,0. 1,1,10 mg·L-1雷公藤多苷片可显著降低VEGF诱导的管腔形成面积和长度; 9,18,36 mg·kg-1·d-1雷公藤多苷片能显著降低CIA大鼠炎症关节的滑膜微小血管和血管密度,抑制CD31阳性表达量、CD31+/αSMA-不成熟血管和总血管阳性表达,同时18,36 mg·kg-1·d-1雷公藤多苷片负向调节滑膜中HIF1α和Ang1的含量。提示了雷公藤多苷片对CIA大鼠关节滑膜组织的血管新生和体外HUVEC的管腔形成有抑制作用,且这一作用可能与其调节炎症关节滑膜中失衡的HIF1α/Ang1轴有关。

    2019年16期 v.44 3441-3447页 [查看摘要][在线阅读][下载 698K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:88 ]
  • 雷公藤甲素对艾滋病免疫反应通路影响的生物信息学分析

    李立;何小鹃;张弛;赵宁;吕诚;

    该研究探讨雷公藤甲素对艾滋病(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)免疫反应生物通路的影响。通过在PubChem数据库中检索雷公藤甲素的靶蛋白,同时在Gene数据库中查找AIDS的相关基因,运用生物信息学分析软件对雷公藤甲素靶蛋白和AIDS的相关基因作用的免疫反应通路进行构图和解析。查找到雷公藤甲素的靶蛋白15个,AIDS相关基因258个。通过分子网络构建,发现雷公藤甲素的靶蛋白与AIDS相关基因存在密切的生物互作关系。在生物通路比对分析中,雷公藤甲素及AIDS共同作用于神经炎症信号通路、Th1和Th2激活途径、模式识别受体在细菌和病毒识别中的作用等21条免疫反应通路,IFNγ,JAK2,NOD1,PTGS2,RORC是雷公藤甲素扰动免疫反应通路的主要分子。IFNγ是雷公藤甲素和AIDS唯一共同作用于这些通路的分子,对AIDS分子有直接或间接的调节作用。该文通过解析中药靶标及疾病基因之间的网络关系及生物功能,可以为雷公藤参与AIDS临床治疗提供有益的证据,推断雷公藤甲素可以通过干预21个免疫反应通路以及IFNγ分子对AIDS起到免疫调节作用。

    2019年16期 v.44 3448-3453页 [查看摘要][在线阅读][下载 340K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:54 ]
  • 甘草炮制对雷公藤治疗窗的影响:以变应性接触性皮炎为例

    于小红;董捷鸣;吴昊;王伽伯;马致洁;章从恩;

    确定甘草制雷公藤的"量-毒-效"关系,探索甘草制雷公藤的安全有效的"治疗窗",为甘草制雷公藤临床合理用药提供可靠依据。建立变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)小鼠模型,进行雷公藤及甘草制雷公藤的多种剂量灌胃给药,比较肝脏生化指标(ALT,AST)、相关炎症因子(TNF-α,IL-2)的差异,以及肝脏、肾脏、脾脏、胸腺指数和耳肿胀度的差异,关联毒性指标和药效指标,综合评价在疾病模型上甘草制雷公藤的"量-毒-效"关系。结果显示,与空白对照组相比,模型组血清TNF-α,IL-2含量升高,有显著性差异(P<0. 01),证明疾病模型成功,根据肝生化指标、血清炎症因子及胸腺、脾脏、肝脏、肾脏指数以及耳肿胀度综合判断该实验甘草制雷公藤剂量在3. 12~12. 48 g·kg-1效果较好。研究结果显示,甘草炮制后雷公藤"治疗窗"增宽,达到了"减毒存效"效果,为临床合理安全用药提供依据。

    2019年16期 v.44 3454-3459页 [查看摘要][在线阅读][下载 203K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:56 ]
  • 基于网络药理学的雷公藤效毒作用机制研究

    董一珠;张冰;林志健;张晓朦;

    探讨有毒中药雷公藤中主要成分雷公藤甲素、雷公藤氯内酯醇、雷公藤红素、去甲泽拉木醛、雷公藤春碱、雷公藤新碱的效毒作用机制。采用admet SAR在线评估系统计算雷公藤主要成分的性质,通过多个数据库挖掘并收集成分的潜在靶点,经生物信息学数据库DAVID对潜在靶点进行通路富集。应用Cytoscape软件建立"靶点-通路"网络,并对网络进行拓扑分析。雷公藤主要化学成分均能透过血脑屏障,具有肠渗透性。共预测到靶点65个,富集通路涉及癌症信号通路(pathways in cancer)、乙肝(hepatitis B)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、美洲锥虫病[chagas disease (American trypanosomiasis)]、Toll样受体信号通路(Toll-like receptor signaling pathway)、细胞凋亡(apoptosis)、结肠癌(colorectal cancer)、NF-κB信号通路(NFkappa B signaling pathway)等。雷公藤主要通过调控炎症信号通路、癌症信号通路等发挥免疫性疾病及癌症的治疗作用,其毒性作用可能与细胞凋亡以及对药物代谢酶的作用有关。

    2019年16期 v.44 3460-3467页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:709 ]
  • 雷公藤多苷与等量雷公藤甲素所致肝脏毒性差异及分子机制探究

    缪莹莹;罗岚;舒婷;汪豪;江振洲;张陆勇;

    雷公藤多苷是从卫矛科植物雷公藤的去皮根部提取的总苷,临床常用于治疗免疫功能异常相关疾病,但具有多器官毒性,其中肝脏毒性显著。为指导雷公藤多苷的临床合理用药和配伍减毒,需对其肝毒性机制和毒性物质基础进行深入研究。高效液相色谱法测得雷公藤多苷中雷公藤甲素质量分数为0. 008%,设置雷公藤多苷(GTW 100,150 mg·kg-1)和雷公藤甲素(TP 12μg·kg-1,与GTW 150 mg·kg-1中TP等量)组,单次灌胃给予Wistar雌性大鼠24 h后,发现GTW 150 mg·kg-1组显著升高血清ALT,AST,TBA,TBi L,TG水平,致使肝脏胆管增生,甚至肝细胞凋亡,其急性肝脏毒性作用显著强于TP 12μg·kg-1组。GTW可下调BSEP,MRP2,NTCP,OATP mRNA和蛋白表达,致使胆汁酸排泄、重吸收障碍,导致胆汁淤积型肝损伤;并具有一定的肝脏氧化应激诱导损伤作用,表现为SOD1和GPX-1 mRNA表达的显著抑制。MTT法体外筛选结果显示,TP在0. 1μmol·L-1即有显著Hep G2细胞和LO2细胞增殖抑制作用,表明TP具有最强的细胞毒性。大鼠体内TP动态含量测定显示GTW组在各时间点的血浆TP含量始终高于等量TP组,且t1/2和Tmax明显大于TP高剂量组,提示GTW所含组分可能影响TP代谢。于Caco-2细胞上进行p-糖蛋白底物筛选,发现雷公藤晋碱、雷公藤次碱、雷公藤定碱均能显著抑制Rho123外排,提示其可作为p-糖蛋白底物,可能竞争性抑制TP通过p-糖蛋白向胆汁的外排,导致TP于肝内蓄积,是致使雷公藤多苷所致肝毒性显著强于等量雷公藤甲素的原因之一。

    2019年16期 v.44 3468-3477页 [查看摘要][在线阅读][下载 549K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:284 ]
  • 基于高通量转录组测序的菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片致大鼠生殖损伤的机制研究

    张博;苏杭;任献青;李伟霞;丁樱;张霞;翟文生;宋纯东;

    雷公藤多苷片具有较好的抗炎和免疫调节活性,但其生殖损伤显著。课题组前期研究发现,菟丝子黄酮可通过对生精细胞周期、凋亡及相关蛋白表达的调节改善雷公藤多苷片导致的生精细胞损伤,但其基因层面的作用机制尚不清楚。该研究采用Illumina高通量测序平台对菟丝子黄酮和雷公藤多苷片干预后大鼠生精细胞进行转录组测序,筛选出差异表达基因,并进行差异基因的GO富集和KEGG通路分析,探讨菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片所致生殖损伤的作用机制。结果发现,与空白组相比,雷公藤多苷片组筛选出794个上调基因和491个下调基因;与雷公藤多苷片组相比,菟丝子黄酮+雷公藤多苷片组筛选出440个上调基因和784个下调基因。其中,与生殖功能密切相关的基因为DNMT3L。GO功能和KEGG信号通路富集分析显示,上述差异基因主要富集在细胞、细胞过程、催化活性、结合、卵巢类固醇合成和甲状腺激素等功能和通路上。其中甲状腺激素信号通路为2个对比组共同富集通路。总之,菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片所致雄性生殖损伤的作用机制与DNMT3L基因及甲状腺激素信号通路密切相关,发现的多种差异基因为菟丝子黄酮和雷公藤多苷片的配伍减毒增效机制研究提供了有价值的信息。

    2019年16期 v.44 3478-3485页 [查看摘要][在线阅读][下载 210K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:151 ]
  • 雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎雌性大鼠生殖毒性的影响

    樊媛芳;徐颖;苏晓慧;刘立玲;田雅格;赵元;孔祥英;林娜;

    为研究雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)雌性大鼠生殖系统的影响作用,将50只SD大鼠随机分为正常对照组(Con),模型组(CIA)及雷公藤多苷片临床等效剂量1,2,4倍剂量组(9,18,36 mg·kg-1·d-1),每组10只,首次免疫后当天开始灌胃给药,每天1次,给药42 d。分别于第21,42天取材,计算子宫和卵巢脏器指数;光镜下观察子宫和卵巢组织病理形态学改变; ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、17α-羟化酶(CYP17A1)及细胞色素P450 19A1(CYP19A1)的含量变化;免疫组织化学法观察子宫、卵巢凋亡通路相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果表明,与Con组比较,CIA组能降低大鼠子宫腺体数(P<0.05),其他未见明显变化;与CIA组比较,雷公藤多苷片各给药组未改变大鼠子宫和卵巢的脏器指数,对子宫腺体数、卵巢内总卵泡数、成熟卵泡数和黄体数、血管及线粒体分布等有一定的抑制趋势,也有轻度增高闭锁卵泡数的作用,但各组织病理学量化指标均无统计学差异;除了2倍临床剂量的雷公藤多苷片给药42 d后能明显降低血清CYP19A1含量(P<0.05),各给药组对血清性激素E2、FSH、LH及雌激素合成关键酶CYP17A1等均无显著变化;中、高剂量雷公藤多苷片能提高子宫和卵巢组织促凋亡蛋白Bax的表达(P<0.05,P<0.01),所有给药组均能下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001),其中42 d给药比21 d明显。综上表明,4倍和4倍以下临床等效剂量的雷公藤多苷片口服42 d未引起CIA大鼠生殖器官明显的毒性反应,但能不同程度降低血清雌激素合成关键酶CYP19A1水平并影响子宫和卵巢组织中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的含量变化,相关机制有待进一步的研究阐明。

    2019年16期 v.44 3486-3493页 [查看摘要][在线阅读][下载 820K]
    [引用频次:3 ] |[下载次数:107 ]
  • 6个不同厂家雷公藤多苷片致小鼠急性肝损伤的比较研究及机制探索

    刘春芳;张晶璇;李逸群;李春;朱宣萱;贾可欣;王金霞;王靖霞;樊媛芳;徐颖;王停;林娜;

    为了比较6个不同厂家雷公藤多苷片致小鼠急性肝损伤的表现,并从氧化应激和细胞凋亡角度探索初步毒性机制,该实验将小鼠随机分为7组,正常组以及浙江、湖南、湖北、上海、江苏和福建6个不同厂家雷公藤多苷片给药组,雌雄各半。以300 mg·kg-1(16倍临床等效剂量)雷公藤多苷片一次性灌服各给药组小鼠,24 h后取材,计算脏脑系数,HE染色法观察肝脏组织病理状态,TUNEL法检测肝细胞凋亡情况,肝组织匀浆检测氧化应激指标水平,Western blot法分析肝组织相关因子的蛋白表达。HPLC检测雷公藤多苷片中指标性成分。结果显示:①给药24 h内,江苏和浙江组分别有6只雄性、2只雌性小鼠濒死;与正常组小鼠相比,浙江、上海、江苏和湖南组肝系数明显升高,前二者胸腺系数尚显著降低,福建组肺系数明显降低,余未见异常变化;②除湖北外,5个厂家给药组均可引起小鼠血清AST、ALT或ALP含量升高,但对TBi L含量没有影响; 6个给药组均可导致小鼠肝脏组织病理学改变和肝细胞凋亡,严重度依次为江苏、浙江、上海、湖南、湖北和福建;③6个给药组均能升高小鼠肝组织中MDA并降低T-SOD、CAT或GSH含量,同时抑制Nrf2、HO-1和Bcl-2并提高Bax(湖南除外)的蛋白表达水平;④雷公藤多苷片中雷公藤甲素含量江苏最高,湖北和福建组检测不到,雷公藤内酯甲含量上海和湖北最高,浙江和江苏最低。上述结果提示6个不同厂家雷公藤多苷片均可引起正常小鼠肝功能损伤和肝脏组织病理学改变,其中江苏最重、湖北和福建最轻,相关机制可能与其抑制Nrf2/HO-1氧化应激通路、激活Bax/Bcl-2凋亡途径,从而介导脂质过氧化反应、诱导肝细胞凋亡有关;雷公藤甲素可能是雷公藤多苷片导致药源性肝损伤的主要毒性成分之一。由于该实验是针对正常小鼠超大剂量用药的研究,相关结果仅供借鉴和参考。

    2019年16期 v.44 3494-3501页 [查看摘要][在线阅读][下载 425K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:102 ]
  • 雷公藤多苷片和雷公藤片对CIA模型大鼠干预的量毒效比较研究

    刘立玲;田雅格;苏晓慧;樊媛芳;李春;朱宣萱;曹炜;刘婷;王海林;徐颖;孔祥英;林娜;

    从量-效-毒角度观察并比较雷公藤多苷片和雷公藤片口服后对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠的干预作用。将SD大鼠随机分为8组:正常组,模型组,雷公藤多苷片给药组(1倍等效剂量0. 009 g·kg-1,4倍等效剂量0. 036 g·kg-1,16倍等效剂量0. 144 g·kg-1)和雷公藤片给药组(1倍等效剂量0. 007 5 mg·kg-1,4倍等效剂量0. 030 mg·kg-1,16倍等效剂量0. 120 mg·kg-1)。首次免疫后当天开始灌胃给药,每天1次。二次免疫后观察大鼠关节红肿和畸形症状,评价关节炎临床积分,分别在第21,42天取材并进行相关观察:HE和Masson染色法检查关节组织病理学变化; ELISA法检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体Ig G的表达量;常规检测血液成分;血清酶学方法检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBi L)、肌酐(CRE)和尿素(UREA)含量;光镜评估附睾中精子畸形率,HE染色法分析睾丸及卵巢组织的损伤程度。结果显示,雷公藤多苷片和雷公藤片高、中、低剂量均能不同程度改善CIA模型大鼠炎症关节的红、肿和畸形症状,降低临床积分,抑制关节滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏的病理变化,降低血清Ig G含量,且有一定的剂量依赖关系,其中同倍剂量组相比,4倍雷公藤多苷片的效果明显优于雷公藤片(P<0. 05),16倍更显著(P<0. 01)。雷公藤多苷片和雷公藤片高剂量能明显升高CIA大鼠肝和脾脏的脏器系数(P<0. 01)并降低RBC和HGB,严重者可致死亡,其中雷公藤多苷片比雷公藤片作用更显著(P<0. 01); 2种制剂高、中、低剂量给药均未见大鼠胃黏膜损伤以及肝肾形态学变化,但4倍和16倍能明显升高血清ALT和GGT并降低CRE水平(P<0. 05或P<0. 01); 2种制剂均可不同程度造成CIA雄性大鼠精子畸形率并损伤睾丸曲细精管,其严重度随剂量和时间增加而增加,其中16倍雷公藤多苷片比同倍量雷公藤片作用更显著。雷公藤多苷片和雷公藤片口服均能有效延缓CIA大鼠发病并降低疾病严重度,但同时也能造成雄性生殖损伤,高剂量尚影响造血功能,极高剂量可致死,2种制剂均具有量-效-毒依赖关系,其中,雷公藤多苷片抗类风湿关节炎药效更好,高剂量毒性反应也更明显。相关结论为雷公藤制剂的临床合理用药提供实验参考,也有待进一步的临床研究去证实。

    2019年16期 v.44 3502-3511页 [查看摘要][在线阅读][下载 387K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:115 ]
  • 雷公藤配伍甘草减毒作用动物实验的系统评价

    李慧珍;刘斌;舒海洋;袁瑞丽;纪鑫毓;胡晗;孟乡;刘玉祁;史楠楠;王燕平;吕诚;

    系统评价雷公藤配伍甘草在动物实验中的减毒作用,为雷公藤减毒的基础研究提供依据。检索PubMed,EMbase,Web of Science,CBM,CNKI和万方数据库,检索时限均为建库至2018年8月31日。由2名研究者独立筛选文献,提取数据,并采用SYRCLE动物实验偏倚风险评估工具评价纳入研究的偏倚风险,利用Rev Man 5. 3软件进行Meta分析。共纳入10篇文献31个研究,对15个研究进行Meta分析。慢性肝损伤动物模型纳入4个研究:实验组34例,雷公藤甲素给药剂量0. 09~0. 1 mg·kg-1·d-1,甘草酸给药剂量90~100 mg·kg-1·d-1,连续给药2周;对照组34例,以等量生理盐水代替甘草酸。急性肝损伤动物模型纳入11个研究:实验组66例,甘草酸给药剂量75~480 mg·kg-1·d-1,连续给药7 d,7 d后停用甘草酸,给予雷公藤甲素0. 6~1. 0 mg·kg-1,每24 h或48 h给药1次,共给药1~2次;对照组66例,以等量生理盐水或相应溶剂代替甘草酸。Meta分析结果显示,急性和慢性肝损伤模型实验组转氨酶水平均低于对照组(P<0. 05)。对纳入急性肝损伤的研究进行的亚组分析结果显示,甘草酸75 mg·kg-1,实验组转氨酶水平与对照组差异无统计学意义,其余亚组实验组转氨酶水平均低于对照组,但就各亚组分别合并后的均数差(MD)及置信区间(CI)来看,各亚组中实验组转氨酶水平下降程度并无明显差别。低剂量甘草酸(90~100 mg·kg-1)对雷公藤甲素(0. 09~0. 10 mg·kg-1)诱发的慢性肝损伤有减毒作用,中、高剂量甘草酸(120~480 mg·kg-1)对雷公藤甲素(0. 6~1. 0 mg·kg-1)诱发的急性肝损伤有减毒作用,但无明显量效关系。

    2019年16期 v.44 3512-3519页 [查看摘要][在线阅读][下载 566K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:279 ]

临床

  • 雷公藤甲素通过调控VEGFA,SDF-1,CXCR4通路改善强直性脊柱炎患者血小板活化的机制

    方妍妍;万磊;董文哲;文建庭;刘健;

    通过体外实验研究雷公藤甲素(triptolide,TP)对VEGFA,SDF-1,CXCR4通路的影响,探讨其改善强直性脊柱炎(AS)患者血小板活化的机制。外周血单核细胞(PBMC)用于实验。分为4组:正常组(NC)、模型组(MC)、雷公藤甲素组(TP)、AMD3100组。MTT法检测TP最佳浓度。ELISA法检测TNF-α,IL-1β,IL-4,IL-10,VEGFA,VEGFR的表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测SDF-1,CXCR4,VEGFA的表达,Western blot法检测SDF-1,CXCR4,VEGFA,VEGFR蛋白的表达,免疫荧光法检测CD62p,CD40L,PDGFA的表达水平。MTT结果显示中剂量TP在24 h时对细胞抑制作用最强。ELISA及PCR法结果显示TP可抑制IL-1β,TNF-α,VEGFA,VEGFR,SDF-1,CXCR4,VEGFA mRNA的表达; Western blot结果说明TP可抑制SDF-1,CXCR4,VEGFA,VEGFR蛋白的表达;免疫荧光结果说明TP可抑制CD62p,CD40L,PDGFA的表达。TP可能通过下调SDF-1,CXCR4,VEGFA,VEGFR mRNA,进而下调IL-1β,TNF-α,上调IL-4,IL-10细胞因子的表达,从而调节血小板活化。

    2019年16期 v.44 3520-3525页 [查看摘要][在线阅读][下载 296K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:195 ]
  • 基于数据挖掘研究雷公藤多苷片联合中药对类风湿关节炎患者免疫炎症肝肾功能的影响

    董文哲;刘健;忻凌;方妍妍;文建庭;

    该文旨在研究雷公藤多苷片联合中药内服对类风湿关节炎(RA)患者免疫炎症指标的影响,探讨中医药治疗类风湿关节炎的配伍模式。通过收集安徽中医药大学第一附属医院风湿病科2012年6月至2017年12月RA住院患者的病历资料,设置使用雷公藤多苷片联合中药内服为实验组,单纯使用雷公藤多苷片为对照组。利用SPSS 21. 0分析2组RA患者一般情况、免疫炎症代谢指标的变化,利用SPSS Clementine 14. 2软件Apriori模块进行关联规则分析,利用ORACLE 10g工具进行随机行走模型评价。结果显示:共计1 220例类风湿关节炎患者符合该研究要求,其中实验组322例,对照组898例。治疗前,2组患者在年龄、病程等方面,差异无统计学意义。2组RA患者Ig A,Ig G,Ig M,RF,CCP-AB,hs-CRP,ESR治疗前后差值均降低,且实验组在降低Ig A,Ig G,RF,CCP-AB,hs-CRP,ESR方面优于对照组,对照组在降低Ig M方面优于实验组,差异有统计学意义(P<0. 01或P<0. 05);与治疗前相比,2组RA患者治疗后ALT,AST,ALP,GGT,CREA,BUN,b-MG,MA,TRU,Ig U均上升,差异有统计学意义(P<0. 01)。2组RA患者治疗后UA均降低,差异有统计学意义(P<0. 01)。实验组在降低UA方面优于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05或P<0. 01)。1 220例患者处方中药物的使用均以健脾化湿药、活血化瘀药、祛风通络药、清热解毒药4类为主。关联规则分析结果提示雷公藤多苷片、内服中药与免疫炎症、肝肾功能指标的改善均有明显关联关系。随机行走模型分析结果提示实验组Ig M,hs-CRP在随机波动最大值、行走正向增长率、综合评价指标递增率、综合改善率、综合评价指标记录次数、期望改善值等方面均优于对照组。该研究结果显示,雷公藤多苷片能有效改善类风湿关节炎患者的免疫炎症代谢指标,且雷公藤多苷片联合中药内服改善RA患者免疫炎症指标及降低肝肾功能损害方面优于单纯内服雷公藤多苷片,雷公藤多苷片联合中药组Ig M,hs-CRP的综合评价改善优于雷公藤多苷片组,2组患者综合评价指标和接受的干预措施存在长程关联。

    2019年16期 v.44 3526-3532页 [查看摘要][在线阅读][下载 195K]
    [引用频次:3 ] |[下载次数:265 ]
  • 雷公藤多苷(甙)片单用或联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎临床表现改善作用的Meta分析

    王晓月;李泰贤;薛志鹏;吕诚;李慧珍;樊媛芳;李逸群;田雅格;杨俊;陈文佳;郭敏群;王靖霞;吴红艳;张彦琼;林娜;

    系统评价雷公藤多苷(甙)片(TGT)单用或联合甲氨蝶呤(MTX)对类风湿关节炎(RA)临床症状和体征的改善作用,为TGT的临床合理用药提供依据。该研究通过系统检索了CNKI、万方、维普、PubMed、EMbase、Cochrane Library 6个文献数据库,根据纳入及排除标准,应用Rev Man 5. 3软件将文献录入,对每篇纳入的文献进行结局指标水平的风险偏倚评估。共纳入18篇文献,分类结果显示:单独用药方面,对比MTX,TGT单独用药减少RA患者的关节肿胀数(MD=0. 18,95%CI[-1. 06,1. 42],P=0. 78)、关节压痛数(MD=-0. 06,95%CI[-1. 69,1. 56],P=0. 94)与MTX的作用相当;联合用药方面,TGT联合MTX比MTX单独使用对减少RA晨僵时间(MD=18. 24,95%CI[12. 64,23. 84],P<0. 000 01)、关节压痛数(MD=2. 65,95%CI[1. 85,3. 44],P<0. 000 01)和关节肿胀数(MD=3. 01,95%CI[2. 09,3. 93],P<0. 000 01)具有优势。现有临床证据表明TGT单独用药对RA患者的关节压痛数和关节肿胀数改善作用与MTX相当,TGT联合MTX对RA患者临床表现的改善优于MTX单独使用。

    2019年16期 v.44 3533-3541页 [查看摘要][在线阅读][下载 581K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:225 ]
  • 雷公藤多苷(甙)片单用或联合甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎实验室指标改善作用的Meta分析

    李泰贤;王晓月;薛志鹏;吕诚;李慧珍;樊媛芳;李逸群;田雅格;杨俊;陈文佳;郭敏群;王靖霞;吴红艳;陈卫衡;张彦琼;林娜;

    系统评价雷公藤多苷(甙)片(TGT)单用或联合甲氨蝶呤(MTX)对改善类风湿关节炎(RA)实验室检验指标的作用,为临床应用TGT治疗RA提供指导。该研究通过系统检索CNKI、万方、维普、PubMed、EMbase及Cochrane数据库,收集TGT单用或联合MTX治疗RA的随机对照试验,应用风险评估工具进行研究质量评价,采用Rev Man 5. 3软件对纳入文献提取的实验室指标进行Meta分析。共检索到1 709篇文献,最终纳入25篇,总样本量2 507例。Meta分析结果显示:TGT单独用药与MTX单独用药对照:MDESR=-2. 66,95%CI[-8. 17,2. 86],P=0. 35; MDCRP=-2. 38,95%CI[-9. 01,4. 24],P=0. 48; TGT联合MTX治疗与MTX单独用药对照:MDESR=8. 74,95%CI[6. 72,10. 76],P <0. 000 01; MDCRP=5. 37,95%CI[3. 71,7. 03],P <0. 000 01; SMDRF=1. 05,95%CI[0. 51,1. 60],P=0. 000 1。表明TGT单独用药对RA患者的CRP和ESR的改善作用与MTX相当; TGT联合MTX对CRP,ESR,RF的改善作用优于MTX单独使用。TGT无论是单用还是联用MTX均有改善RA患者实验室检验指标的作用,值得临床推广应用。由于受纳入文献质量的限制和临床异质性的影响,研究结果尚有待临床实践验证。

    2019年16期 v.44 3542-3550页 [查看摘要][在线阅读][下载 523K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:162 ]
  • 雷公藤多苷片联合地氯雷他定治疗慢性荨麻疹疗效和安全性的Meta分析

    石岩硕;王祁民;邱学佳;庞国勋;

    Meta分析雷公藤多苷片联合地氯雷他定对比单用地氯雷他定治疗慢性荨麻疹的疗效和安全性,以期为临床治疗提供循证参考。计算机检索PubMed、CBM,Wan Fang、VIP及CNKI数据库、中国期刊全文数据库、中文科技期刊全文数据库、万方数,收集雷公藤多苷片联合地氯雷他定(试验组)对比单用地氯雷他定(对照组)治疗慢性荨麻疹的疗效和安全性的随机对照试验(RCT),对符合纳入标准的临床研究进行资料提取和质量评价后(共纳入15项RCTs,合计1 411名患者),采用RevMan 5. 3软件进行Meta分析。Meta分析结果显示,试验组患者总有效率(RR=1. 28,95%CI[1. 22,1. 35],P<0. 000 01)和生活质量改善率(RR=1. 49,95%CI[1. 33,1. 66],P<0. 000 01)优于对照组,复发率(RR=0. 29,95%CI[0. 21,0. 40],P<0. 000 01)显著低于对照组,差异有统计学意义;不良反应发生率(RR=1. 02,95%CI[0. 68,1. 53],P=0. 92)等方面,与对照组相比,差异均无统计学意义。现有临床研究表明,雷公藤多苷片联合地氯雷他定治疗慢性荨麻疹的疗效优于单用地氯雷他定,且安全性相当。但受RCT质量不高、缺少大规模多中心研究等局限,该结果还有待临床进一步验证。

    2019年16期 v.44 3551-3557页 [查看摘要][在线阅读][下载 520K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:216 ]
  • 雷公藤多苷片联合中药对儿童成年后生育能力影响的远期随访

    姜淼;韩珊珊;张霞;任献青;宋纯东;翟文生;郭庆寅;张建;杨濛;丁樱;

    探讨儿童时期服用雷公藤多苷片(TGT)联合中药对儿童成年后生育能力及对女性月经的影响。选择1998年1月—2010年12月河南中医药大学第一附属医院儿科收治过敏性紫癜(HSP)、紫癜性肾炎(HSPN)患者,对其中服用TGT时年龄小于18岁、现年龄超过18岁(含18岁)的患者进行随访,内容包括是否结婚、结婚年龄、生育情况及未婚女性月经情况,对未婚女性患者服药年龄、临床分型、中医证型、初始服用剂量等可能影响月经的相关因素数据用SPSS 17. 0软件进行Logistic回归分析。该研究共随访到符合标准患者195例,结婚满1年的患者26例,其中1例因现患有类风湿性关节炎暂无生育计划,其余患者均已生育或尚在孕期;未婚患者169例,其中女性患者89例,4例拒绝回答月经情况,72例月经正常(84. 7%),13例月经异常(15. 3%),无闭经患者。Logistic回归分析结果表明影响月经异常的因素与服药年龄、西医分型、中医证型及TGT初始用量无关。结果表明,儿童时期服用雷公藤多苷联合中药对成年后生育能力未见影响。

    2019年16期 v.44 3558-3561页 [查看摘要][在线阅读][下载 110K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:58 ]

药代动力学

  • 基于UPLC-Q-TOF-MS的雷公藤红素的代谢组学研究

    张婷;王义坤;赵琦;肖雪蓉;李飞;

    采用质谱技术的代谢学方法系统地对雷公藤红素的代谢开展了研究,筛选了雷公藤红素的代谢产物,并考察雷公藤红素对内源性代谢物水平的影响。通过灌胃给予小鼠雷公藤红素后,收集给药后血、粪和尿样品。采用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)对雷公藤红素的代谢产物及其影响的内源性代谢物进行分析。运用质量亏损过滤策略筛选雷公藤红素的代谢产物,运用多元变量统计分析确定它显著影响的内源性代谢物。结果显示,在小鼠的粪便和尿液中检测到雷公藤红素的原型和8个代谢产物,其中5个代谢产物为首次报道;在鼠肝微粒体和人肝微粒代谢中发现雷公藤红素可以转化生成2个羟化产物,进一步的重组酶孵育揭示CYP3A4是催化其形成羟化产物的主要代谢酶。尿液代谢组学揭示雷公藤红素可以影响hippuric acid,phenylacetylglycine,5-hydroxyindoleacetic acid,urocanic acid,cinnamoylglycine,phenylproplonylglycine,xanthurenic acid的排泄,这些代谢物与肠道菌代谢密切相关。上述研究结果有助于阐明雷公藤红素在体内的代谢处置过程及其潜在的药理作用机制。

    2019年16期 v.44 3562-3568页 [查看摘要][在线阅读][下载 240K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:310 ]
  • 基于微透析技术的雷公藤白芍微乳凝胶皮肤和血液药物动力学研究

    杜清;罗晶;管咏梅;肖芳;臧振中;金晨;陈丽华;

    为进一步探究雷公藤白芍微乳凝胶在体内的代谢情况,该研究建立了雷公藤白芍凝胶中雷公藤甲素和芍药苷的LCMS/MS含量测定方法;采用浓度差法(增量法和减量法)测定了血液探针体外回收率。同时建立了雷公藤甲素和芍药苷皮肤和血液微透析方法,并通过微透析技术联合LC-MS/MS定量分析技术对雷公藤白芍微乳凝胶的在体皮肤和血液的药物动力学进行了研究。研究结果显示,雷公藤白芍凝胶中雷公藤甲素和芍药苷成分分析方法在要求范围内线性良好,色谱的专属性、回收率、精密度等均符合微透析样品的研究要求;且冻融稳定性,残留效应均符合生物样品方法学考察标准。在体外回收率试验中,增量法和减量法测得的探针回收率基本一致;芍药苷皮肤和血液微透析回收率分别为(30. 60±1. 09)%,(28. 01±1. 75)%,雷公藤甲素皮肤和血液微透析回收率分别为(26. 79±2. 78)%,(25. 39±1. 86)%,且探针日内回收率在11 h内稳定。药代动力学研究中雷公藤甲素皮肤和血液的Cmax分别为(148. 03±41. 51),(76. 77±15. 27)μg·L-1,Tmax分别为(2. 33±0. 29),(3. 00±0) h,AUC0-11 h分别为(2 814. 05±1 070. 37),(1 580. 63±208. 27)μg·h·L-1,MRT0-11 h分别为(4. 20±0. 33),(4. 54±0. 34)h,T1/2分别为(4. 61±4. 11),(1. 07±0. 13) h。芍药苷皮肤和血液的Cmax分别为(991. 88±152. 22),(407. 02±120. 06)μg·L-1,Tmax分别为(2. 00±0),(2. 83±0. 29) h,AUC0-11 h分别为(18 430. 27±3 289. 35),(6 338. 59±1 659. 32)μg·h·L-1,MRT0-11 h分别为(4. 29±0. 16),(4. 00±0. 05) h,T1/2分别为(2. 16±0. 43),(1. 78±0. 48) h。药代动力学研究结果提示微乳凝胶经皮渗透有形成皮肤储库的作用,在提高药物透皮效率的同时能够使药物持续缓慢、控制释放,形成长效作用。

    2019年16期 v.44 3569-3575页 [查看摘要][在线阅读][下载 189K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:237 ]
  • 基于HPLC-MS/MS检测雷公藤甲素在体微透析方法的建立

    管咏梅;刘佳;余雅婷;朱卫丰;陈丽华;金晨;臧振中;

    为了检测雷公藤甲素皮肤给药后皮肤和关节内的药物浓度,该研究拟建立雷公藤甲素HPLC-MS/MS检测法和皮肤、关节在体微透析方法。采用三重四极杆(AB QTRAP4500)和Phenomenex-C18(4. 6 mm×150 mm,5μm,luna)色谱柱,流动相乙腈-0. 1%甲酸(65∶35),流速0. 7 m L·min-1,采用ESI源正离子多反应监测(MRM)扫描,雷公藤甲素监测离子对m/z 361. 1→145. 0,建立HPLC-MS/MS检测法,并对该方法进行考察。通过增量法和减量法,考察灌流液[Ringer's,PBS(p H 7. 4),30%乙醇生理盐水],流速,浓度的不同对探针回收率的影响及回收率和损失率的关系。用在体微透析减量法,考察10 h内探针体内回收率的稳定性。结果显示,HPLC-MS/MS检测法的方法学考察结果均符合生物样品要求。灌流液选回收率最高的30%乙醇生理盐水; 0. 5~2. 5μL·min-1内,探针的回收率随流速增加而下降,综合考虑数据的时效性和检测的准确性,将灌流速度均确定为1μL·min-1,采样间隔0. 5 h; 10~200μg·L-1内皮肤、关节探针的回收率和损失率近似相等且均不受浓度的影响,故可用探针的损失率代替探针的回收率;探针在大鼠体内10 h内的损失率维持相对稳定。该研究建立的HPLC-MS/MS检测法和雷公藤甲素皮肤和关节微透析方法可用于雷公藤甲素皮肤给药后皮肤和关节内药代动力学研究。

    2019年16期 v.44 3576-3581页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K]
    [引用频次:2 ] |[下载次数:147 ]

资源与鉴定

  • 独脚金内酯类似物GR24对雷公藤悬浮细胞中二萜类次生代谢产物累积的影响

    吴晓毅;张睿;马允;孟令嘉;屠李婵;胡添源;高伟;

    雷公藤中的主要生物活性成分为萜类等次生代谢产物,但一些萜类成分在植物中的含量相对较低,因此,该研究结合生物技术手段和超高效液相色谱——三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS/MS),以雷公藤悬浮细胞为材料,研究新型植物激素——独脚金内酯类似物GR24对雷公藤甲素、雷公藤福啶、雷酚内酯和雷公藤宁B 4种二萜类次生代谢产物累积的影响,以期为雷公藤萜类次生代谢产物的外源性调控提供参考依据。实验结果显示,100μmol·L-1GR24诱导雷公藤悬浮细胞240 h后,雷公藤甲素、雷公藤福啶、雷酚内酯和雷公藤宁B的累积量均被不同程度地抑制,其累积量分别为空白对照组的96. 59%,63. 80%,61. 02%,33. 59%,其中,雷公藤宁B的累积被显著性地抑制,而诱导后120 h为GR24对部分二萜类次生代谢产物发挥抑制调控的关键时间点。该研究首次系统探讨了GR24对雷公藤悬浮细胞中雷公藤甲素、雷公藤福啶、雷酚内酯和雷公藤宁B共4种二萜类次生代谢产物的诱导效应,并对其诱导后的动态累积规律进行了总结分析,为今后深入研究GR24诱导雷公藤中二萜类次生代谢产物的化学应答机制奠定了基础。

    2019年16期 v.44 3582-3587页 [查看摘要][在线阅读][下载 191K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:97 ]

分子生药学

  • 雷公藤中一个合成香茅醇的单萜合酶基因的克隆与表征

    尹艳;郭思远;向安娅;李桂林;高伟;张夏楠;

    雷公藤是临床常用于治疗类风湿性关节炎的药用植物,又有抗肿瘤和肥胖症治疗等药理活性。雷公藤中的已知活性成分以萜类为主,但是含量都非常低,因此对雷公藤中萜类化合物生物合成途径的解析成为解决雷公藤资源问题的一大研究热点。而萜类合酶(TPS)是催化形成多种多样的萜类骨架的关键酶。该研究从雷公藤中克隆到一条ORF长度为1 785 bp的基因片段Tw MES,利用NCBI的BLASTP,ProtParam,Interpro在线工具以及MEGA 6. 0软件对序列进行了生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR检测了该基因对茉莉酸甲酯的响应,同时采用原核表达和体外酶促的方法对其体外催化功能进行了验证。生物信息学分析表明,该基因编码的氨基酸序列同时具有萜烯合酶N-末端结构域、萜环化酶样1 C-末端结构域,以及萜类合酶家族class I的DDxx D保守结构域。在与已知同源萜类合酶序列构建的邻接树中,Tw MTS与TPS-b亚家族聚为一支。RT-PCR结果显示50μmol·L-1的MeJA 12 h能导致Tw MTS的表达量上升到对照组的735倍,24 h达到1 644倍。此外,体外酶促反应结果显示Tw MTS能催化GPP生成β-香茅醇,表明Tw MTS是一个单萜合酶。以上研究结果为雷公藤萜类成分的生物合成学研究提供了新的元件,为未来生物合成研究奠定了基础。

    2019年16期 v.44 3588-3593页 [查看摘要][在线阅读][下载 285K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:68 ]
  • 雷公藤CYP450生物信息学及组织分布分析

    高杰;张逸风;周家伟;吴晓毅;高伟;黄璐琦;

    细胞色素P450家族是一种广泛存在于自然界中的生物催化剂,它具有催化植物次生代谢产物生物合成、调节植物修复等多种功能。该研究基于对雷公藤蛋白组数据的分析,利用多种生物信息学分析的方法对雷公藤CYP450基因进行了初步分析和预测,文章结果显示,使用茉莉酸甲酯诱导雷公藤悬浮细胞表达后,获取到雷公藤蛋白组数据并对其进行分析,最终筛选出10条雷公藤CYP450蛋白;通过分析与拟南芥家族CYP450基因构建得到的系统进化树,将这10条CYP450蛋白聚类归为6个不同的CYP450家族,各个家族CYP450蛋白质的理化性质存在一定差异,二级结构主要以不规则卷曲为主要构成元件,其中8条CYP450蛋白亚细胞定位结果为叶绿体,其余为质体;随后,通过对多重序列比对结果进行分析,找到了CYP450基因共有的保守结构域(亚铁血红素活性位点);最后,通过分析雷公藤转录组数据,初步确认了其在不同组织中的表达分布,从而验证了其与雷公藤活性物质生物合成具有相关性,为雷公藤有效活性成分生物合成途径解析提供了重要的基因资源。

    2019年16期 v.44 3594-3600页 [查看摘要][在线阅读][下载 1079K]
    [引用频次:1 ] |[下载次数:123 ]
  • 下载本期数据