病证结合诊治排卵障碍性不孕专题

  • 中西医结合诊治肾虚血瘀型排卵障碍性不孕(不育)优势的探究

    马堃;

    在"肾主生殖"理论指导下,阐述了肾虚血瘀证导致无排卵型异常子宫出血、多囊卵巢综合征、高催乳素血症、未破裂卵泡黄素化综合征、黄体功能不足、早发性卵巢功能不全6种排卵障碍性不孕的机制。系列研究证实其能提高卵巢对促性腺激素的反应性,改善卵巢功能[显著调节雌二醇(E_2)、泌乳素(PRL)的作用,降低卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕激素(P),睾酮(T)];能够促进卵泡发育、排出和同步子宫内膜生长,而提高排卵率及妊娠成功率。中西医结合诊治肾虚血瘀型排卵障碍性不孕,以"病-证-症"的研究模式,突出"以证统病"的中医诊治思维模式和"辨病与辨证相结合"的特色优势,诠释了中医"异病同治"治疗原则。

    2021年11期 v.46 2623-2628页 [查看摘要][在线阅读][下载 858K]
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  • 马堃教授以肾虚血瘀论治高泌乳素血症所致不孕病案举隅

    马堃;刘晓倩;陈燕霞;王洁楠;

    该文探讨马堃教授以肾虚血瘀论治高泌乳素血症导致排卵障碍性不孕的理论依据及组方原则。中医理论"肾-天癸-冲任-胞宫轴"为主导女性生殖生理功能的根基,其中肾为最关键的一环:肾主生殖,充沛的肾阴肾阳是肾-天癸-冲任-胞宫轴的物质基础和能量来源。马堃教授认为肾虚能够直接促使高泌乳素血症导致的不孕症,肾虚血瘀是高泌乳素血症导致排卵障碍性不孕的发病基础。作为病理结果,血瘀在其发病的过程贯穿始终,亦是高泌乳素血症病程进展的促成因素。在此基础上,马堃教授以补肾活血法为治疗高泌乳素血症导致排卵障碍性不孕的原则,根据月经周期气血变化规律和卵泡生长过程,滋肾阴,温肾阳,阴阳同补,兼以活血化瘀、疏肝理气,组成补肾促卵方,并随症加减治疗高泌乳素血症导致的排卵障碍性不孕,效果显著。该文举例补肾促卵方成功治疗高泌乳素血症导致不孕病案,验证马堃教授以肾虚血瘀论治高泌乳素血症导致不孕的可行性和有效性,可供广大中医妇科医务工作者参考、借鉴。

    2021年11期 v.46 2629-2633页 [查看摘要][在线阅读][下载 984K]
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  • 补肾活血法治疗排卵障碍性不孕在优生优育中的作用探讨

    马堃;田彩蝶;陈燕霞;李敏;宫林娟;

    在新时期新形势下,关注母婴健康,提倡优生优育,可切实有效提高我国的出生人口质量和素质。中医优生优育思想源远流长,内容丰富,是现代优生优育健康服务的理论基础。随着社会发展和人民优生优育意识提高,目前将优生优育的重点逐渐转移到围孕期阶段,注重解决育龄期夫妇基础疾病的前提下指导备孕。不孕症是育龄期女性的常见病和难治性疾病,排卵障碍是不孕症的常见病理机制之一,中医认为肾虚为排卵障碍性不孕的主要病因病机,血瘀是贯穿其始终的重要因素。在临床实践中,运用补肾活血法治疗排卵障碍性不孕疗效确切且安全可靠,主要可通过调节下丘脑-垂体-卵巢轴,改善卵巢功能和宫腔环境,提高配子质量,增加子宫内膜容受等环节进行综合调理,从而促进优质胚胎形成,继而顺利着床并健康发育,最终达到优生优育的目的。因此在优生优育思想的指导下,笔者试探讨补肾活血法治疗排卵障碍性不孕在优生优育中的作用,旨在为后期临床相关研究提供思路和依据,为优生优育健康服务作出贡献。

    2021年11期 v.46 2634-2638页 [查看摘要][在线阅读][下载 1024K]
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  • 马堃教授运用补肾活血法治疗盆腔炎性不孕症的临证经验

    马堃;李敏;

    盆腔炎性疾病已成为女性不孕症的主要原因之一,近年来发病率有升高趋势。现代医学认为盆腔炎性因子会影响卵子的形成、受精、胚胎的植入等环节,对配子的相遇、受精及受精卵向宫腔输送的影响最为重要。治疗包括药物、输卵管通液和造影术、手术以及辅助生殖技术等。马堃教授认为其病位在胞宫胞脉,主要病机为肾虚血瘀,血瘀为病理基础,肾虚为根本病机,多属虚实夹杂,肾虚日久必致血瘀,血瘀又加重肾虚,两者互为因果,使盆腔炎性不孕症缠绵难愈。临证以补肾活血、化瘀通络、调理冲任为基本治则,运用中药口服,配合灌肠、外敷、外洗等治法,在治疗盆腔炎性不孕症中,改善了盆腔微环境,提高妊娠率及妊娠成功率等方面取得了较好的疗效。

    2021年11期 v.46 2639-2643页 [查看摘要][在线阅读][下载 1125K]
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  • 补肾活血促卵方治疗肾虚血瘀型卵巢储备功能低下所致不孕的临床研究

    马堃;吴静娴;张会仙;王凯莉;彭碧辉;

    研究补肾活血促卵方治疗肾虚血瘀型卵巢储备功能低下(DOR)导致不孕症的临床疗效及安全性。选择2017—2020年就诊于中国中医科学西苑医院、中国中医科学院针灸医院、中国中医科学院中医门诊部符合纳入标准的100例DOR患者,按1∶1随机分为试验组和对照组。试验组予补肾活血促卵方,对照组予克龄蒙+克罗米芬,3个月经周期为1个疗程。观察排卵率、妊娠率、妊娠成功率、血清激素水平、中医证候积分及安全性指标的变化。结果显示,试验组总有效率为92.00%,对照组为72.00%,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);试验组在降低FSH、升高AMH水平、改善中医证候、提高妊娠率及妊娠成功率方面优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。安全性指标均未见异常,未发现不良反应。结果表明,补肾活血促卵方治疗肾虚血瘀型卵巢储备功能低下导致不孕临床疗效确切,安全可靠。

    2021年11期 v.46 2644-2649页 [查看摘要][在线阅读][下载 1118K]
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  • 基于网络药理学和分子对接研究补肾促卵方治疗多囊卵巢综合征不孕的分子机制

    马堃;宫林娟;陈燕霞;田彩蝶;

    该文运用网络药理学和分子对接的方法,研究补肾促卵方治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)导致不孕的作用机制。首先,通过TCMSP数据库获取补肾促卵方活性成分和药物潜在靶点;应用GeneCards数据库检索PCOS导致不孕的疾病靶点。将药物靶点与疾病靶点经过Uniprot数据库校正后取交集基因。结合STRING数据库和Cytoscape 3.7.2对交集基因进行PPI分析。应用Cytoscape 3.7.2的ClueGO插件对交集基因进行GO富集分析及KEGG信号通路富集分析。最后运用AutoDockVina和MGLtools软件对补肾促卵方关键活性成分与作用靶点进行分子对接验证。结果在补肾促卵方中共获得136个药物活性成分,314个药物靶点,GeneCards数据库获得136个疾病靶点,49个药物与疾病交集基因;GO富集发现,主要涉及肌肉细胞凋亡过程的调节、小分子代谢过程的正调控、核心启动子结合、RNA聚合酶Ⅱ对pri-miRNA转录的调控、跨膜运输的负调控等生物功能;经过KEGG通路富集分析,其主要涉及MAPK、PI3K-Akt、p53、HIF-1等信号通路。分子对接结果显示槲皮素(quercetin)和PTGS2能稳定的结合并通过氨基酸残基THR206、TRP387、ASN382等发生相互作用。该研究初步揭示了补肾促卵方治疗PCOS导致不孕的多成分、多靶点、多途径作用机制,为进一步研究提供依据。

    2021年11期 v.46 2650-2659页 [查看摘要][在线阅读][下载 2049K]
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中药质量标志物研究专题

  • 甘草化学成分和药理作用研究进展及质量标志物的探讨

    邓桃妹;彭灿;彭代银;俞年军;陈卫东;王雷;

    甘草是我国传统常用中草药,其主要含有三萜类、黄酮类、多糖类、香豆素类等化学成分,具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗炎、调节免疫、抗纤维化等多种药理活性。随着甘草在食品、医药及化工等行业的广泛应用,其需求量日益上涨,因此解决甘草的质量问题具有重要的价值和意义。通过总结甘草的化学成分和药理作用并结合质量标志物(Q-marker)的概念,从植物亲缘学及化学成分特有性、传统功效和药性、入血成分、化学成分可测性、不同加工炮制方法等几个方面对甘草质量标志物进行分析,为建立甘草质量评价体系提供参考。

    2021年11期 v.46 2660-2676页 [查看摘要][在线阅读][下载 3869K]
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  • 当归补血汤化学成分、药理作用、临床应用的研究进展及质量标志物的预测分析

    杨飞霞;王玉;夏鹏飞;杨蕊菁;王玉霞;张建;樊秦;赵磊;

    当归补血汤为经典的气血双补名方,主治老疲内伤、气弱血虚、阳浮外越。现代药理学研究表明其具有促进造血、调节免疫、保护心脑血管等作用,临床多用于治疗多种原因所致之贫血等血液系统疾病、心脑血管系统疾病及肿瘤等。该方由黄芪一两、当归二钱组成,芪归用量为5∶1,是现代复方研究补气生血的代表方剂。该文在对当归补血汤的化学成分、药理作用及临床应用研究近况进行综述的基础上,结合中药质量标志物"五原则"——传递与溯源、特有性、有效性、可测性及复方配伍环境对当归补血汤的质量标志物(Q-marker)进行预测分析。结果提示毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芒柄花苷、黄芪甲苷、阿魏酸、藁本内酯可作为当归补血汤的Q-marker,为后续建立完整的当归补血汤质量体系提供参考。

    2021年11期 v.46 2677-2685页 [查看摘要][在线阅读][下载 1653K]
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  • “发汗”前后厚朴质量标志物的预测分析

    刘畅;王潇;刘芳;胡慧玲;刘绍;罗霄;傅超美;邓彬;

    厚朴为临床常用道地中药,历版《中国药典》规定厚朴需经产地加工"发汗"处理,产地加工"发汗"影响其道地性和品质。该文基于中药饮片质量标志物(Q-marker)的概念及研究模式,通过分析厚朴饮片有效成分组,辨别厚朴饮片"发汗"前后发生显著变化的差异成分;结合药效、药动学及药性研究结果,明确其主要药效物质基础,综合研究结果分析预测"发汗"前后厚朴的质量标志物,以期为提高厚朴的质量标准提供参考。

    2021年11期 v.46 2686-2690页 [查看摘要][在线阅读][下载 1846K]
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  • 基于网络药理学及指纹图谱的黄芪质量标志物预测

    张淑娟;张育贵;李东辉;吴红伟;牛江涛;司昕蕾;李越峰;

    黄芪为常用的大宗药材之一,其用药历史悠久,临床应用广泛。近年来,黄芪栽培变异品种及多种掺杂混淆品充斥市场,导致黄芪质量良莠不齐,故其质量控制方法一直是黄芪药材研究的热点,因此找出黄芪药材的质量标志物,对全面评价黄芪质量具有重要意义。该研究通过高效液相色谱法建立15批黄芪药材的指纹图谱,采用化学模式识别方法偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)筛选出造成组间差异的主要标志性成分,结合文献研究及网络药理学分析,利用SwissTargetPrediction和PubChem Compound等数据库分析有效成分的对应靶点和通路并在Cytoscape 3.7.1软件中绘制出"成分-靶点-通路"图,预测出潜在的质量标志物。结果表明,建立的指纹图谱中成功指认出28个共有峰,筛选出3种差异成分可作为潜在质量标志物,依次为黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷。该研究建立的HPLC指纹图谱方法简便可行,筛选出3种可作为黄芪潜在质量标志物的化学成分,有助于黄芪药材质量评价方法的提升,为黄芪质量的全面控制提供参考,同时也为黄芪药效关联物质基础的研究及作用机制的探索奠定基础。

    2021年11期 v.46 2691-2698页 [查看摘要][在线阅读][下载 1934K]
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  • 基于“干法+湿法”联用技术探究西藏沙棘抗氧化质量标志物

    亓金钗;陈静;李文;李国萍;陈红珊;皮雯敏;高丰;王鹏龙;米玛;雷海民;

    该研究以干法(网络药理学分析)和湿法(高分辨率质谱分析及抗氧化实验)技术交叉联用预测西藏沙棘抗氧化质量标志物。采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨率质谱联用技术(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)对西藏沙棘中的化学成分进行定性分析,随后通过DPPH自由基和超氧阴离子清除实验评价石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4个不同极性部位的抗氧化活性,并利用网络药理学方法进行功能富集和通路分析,筛选抗氧化相关成分并初步阐释作用机制,在此基础上整合多源信息对抗氧化质量标志物进行预测分析。结果表明,从西藏沙棘中共鉴定出51个化学成分,包括黄酮类18个,萜类14个,生物碱类6个,香豆素和苯丙素类各4个,挥发性成分3个,多酚类2个。不同部位的抗氧化能力:乙酸乙酯>正丁醇>水>石油醚。网络药理学分析出西藏沙棘主要通过槲皮素、木犀草素及山柰酚等黄酮类成分作用于PI3K/Akt和FoxO信号通路发挥抗氧化作用。综合干法和湿法结果预测槲皮素、木犀草素和山柰酚为西藏沙棘的抗氧化质量标志物。该研究以西藏沙棘抗氧化质量标志物为例,探讨了一种基于成分、功能和信息学三元体系信息预测质量标志物的研究模式,为西藏沙棘质量评价标准的建立提供科学依据。

    2021年11期 v.46 2699-2709页 [查看摘要][在线阅读][下载 1990K]
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  • 基于层次分析-熵权法的气血和胶囊质量标志物研究

    黄昱曦;陈艳琰;乐世俊;冯利梅;徐顶巧;付瑞嘉;邢黎明;王保安;唐于平;

    气血和胶囊是针对引起妇女疾病的常见原因"气血失和"所研制而成的复方中成药,具有疏肝理气、活血化瘀及止痛的功效。由于其组方药味较多(15味)且具多重功效,对产品的质量控制一直是影响其可持续发展的瓶颈问题。因此,该研究采用课题组前期基于层次分析-熵权法所建立的中药质量标志物量化辨识体系,以气血和胶囊不同功效为切入点,计算整合气血和胶囊化学成分在多重有效性(疏肝理气、活血化瘀和止痛)、可测性及专属性等项目下的评分,同时兼顾复方配伍关系,最终发现阿魏酸、槲皮素、咖啡酸、山柰酚、芦丁、藁本内酯、洋川芎内酯Ⅰ、香草酸、原儿茶酸、绿原酸、迷迭香酸、洋川芎内酯A、没食子酸、延胡索乙素和丁香酚15种活性成分为气血和胶囊综合评分靠前的质量标志物。研究结果为气血和胶囊质量标准提升及标准化深入研究提供了科学证据,同时也为多功效的中药复方质量标志物量化辨识研究提供了方法学参考。

    2021年11期 v.46 2710-2717页 [查看摘要][在线阅读][下载 1646K]
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  • 基于网络药理学和多元统计分析的黄连质量标志物预测分析

    李春霞;何巧玉;刘静;王誉程;薛倍倍;唐千;刘虹;刘二伟;陈晓鹏;

    黄连作为大宗药材,临床上需求量大,真品和伪品、混淆品鱼龙混杂,市场上质量参差不齐,因此建立黄连质量控制体系尤为重要。基于中药质量标志物(Q-marker)的理念,从化学和药理角度分析预测黄连的潜在质量标志物。借助文献检索确定黄连质量标志物的来源定位,通过"成分-靶点-通路"网络可视化,筛选出黄连的潜在质量标志物;采用高效液相色谱法对10批黄连药材建立以指纹图谱为特征的多指标定性定量控制方法,运用有监督模式正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),筛选出造成组间差异的主要标志性成分。结果表明查阅文献锁定生物碱类成分为黄连质量标志物的主要来源范围;成功建立13个共有峰的指纹图谱,筛选出4个差异成分可作为黄连质量标志物分别为小檗碱、巴马汀、黄连碱和表小檗碱并对它们进行了含量测定。基于中药质量标志物的理念,多方面综合考虑可以选择4种成分作为黄连的质量标志物。该研究结果有利于市场上黄连质量评价,也为黄连质量的全面控制提供参考,同时也为日后黄连药效作用机制的探索奠定基础。

    2021年11期 v.46 2718-2727页 [查看摘要][在线阅读][下载 2115K]
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  • 萸连汤的定量“制剂质量标志物”研究

    李涛;赵小亮;沈硕;杜茂波;刘淑芝;

    在萸连汤的定性"制剂质量标志物"的基础上,筛选出其定量"制剂质量标志物",并探讨一法通用策略用于分析中药饮片-制剂-血浆间的移行情况。采用定量分析的HPLC-MS/MS,建立同时测定萸连汤中28种化学成分的方法,并用该方法同时分析萸连汤饮片、萸连汤冻干粉制剂和萸连汤给药后大鼠血浆移行成分。液相色谱分离采用C_(18)反相色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm),流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.2 mL·min~(-1);质谱检测采用电喷雾离子源,正负离子模式同时扫描,多反应监测方式。方法经线性范围、加样回收率、精密度、稳定性和重复性等考察确证适合萸连汤中以上成分的测定。加样回收率为95.48%~103.4%,精密度RSD为0.45%~3.8%,重复性RSD为5.6%~14%。萸连汤冻干粉中化学成分质量分数小檗碱大于5%,木兰花碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀和柠檬苦素质量分数在1%~5%,去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、木香烃内酯和去氢木香内酯质量分数在0.002%~1%;饮片中检测的28种成分有27种可向冻干粉转移,其中11种可在大鼠血浆中发现。结合萸连汤的定性"制剂质量标志物",初步确定定量"制剂质量标志物"15种,分别为小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素、木香烃内酯、去氢木香内酯、木兰花碱、药根碱、非洲防己碱、格兰地新、绿原酸和新绿原酸。建立的HPLC-MS/MS一法通用策略分析中药饮片-制剂-血浆多成分转移是可行的,可为萸连汤定量"制剂质量标志物"的筛选及多指标质量控制提供方法基础。

    2021年11期 v.46 2728-2736页 [查看摘要][在线阅读][下载 1759K]
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综述

  • 骨碎补化学成分和药理作用研究进展

    谌顺清;梁伟;张雪妹;李霞;詹志来;郭兰萍;黄璐琦;张学敏;高文远;

    骨碎补性温、味苦,归肝肾经,是治疗骨折骨伤的常用中药,其所含化学成分主要包括:黄酮类、三萜类、苯丙素类、以及木脂素类等。现代药理和临床研究表明,骨碎补具有抗骨质疏松、促骨折愈合、肾保护、抗炎、促进牙齿生长、防治氨基糖苷类耳毒性以及降血脂等功效。此外,骨碎补的毒性评价实验也表明其没有明显的毒副作用。柚皮苷是骨碎补药材中的二氢黄酮类成分,众多研究表明,以柚皮苷为主的总黄酮成分在抗骨质疏松、促进骨折愈合、抗炎、促进牙齿生长以及降血脂等多个方面起到重要作用。该研究对近年来有关骨碎补化学成分及药理活性的研究成果进行综述,并对部分作用机制进行梳理总结,以期为骨碎补药材的研究和开发提供参考依据。

    2021年11期 v.46 2737-2745页 [查看摘要][在线阅读][下载 2328K]
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  • 金银花环烯醚萜苷类化学成分和药理活性研究进展

    杨然;陆远;郝昊;张满达;玄静;张永清;

    金银花作为传统中药材,药用历史悠久,其化学成分复杂,主要包括环烯醚萜苷类、黄酮类、三萜类、有机酸类和挥发油类化合物。其中,环烯醚萜苷类化合物占有较高的比例。此外,现代药理学研究发现,已分离鉴定的环烯醚萜苷多具有抗病毒、抗炎、抗肿瘤、护肝和降血糖等多种药理活性。该文通过检索中、英文数据库,拟对目前金银花中已分离鉴定的环烯醚萜苷类化合物及其药理活性进行系统的归纳整理,以期为金银花的深度开发利用和药材质量标准提升提供参考。

    2021年11期 v.46 2746-2752页 [查看摘要][在线阅读][下载 1617K]
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  • 鲜竹沥化学成分及质量控制方法研究进展

    冯绘敏;胡云飞;曾茜垚;仇萍;李元祥;李正;李文龙;

    通过调研国内外大量文献与相关标准,对鲜竹沥的化学成分、现有质量标准及质量控制方法进行系统分析。鲜竹沥中化学成分丰富,主要含有挥发性成分、氨基酸、黄酮类、维生素及微量元素,具有较高的药用、食用价值。其质量控制方法涉及传统的性状鉴别、光谱法、色谱法等,但鲜竹沥现行质量标准较低,缺乏安全性指标,难以有效保障其质量,严重影响了鲜竹沥临床用药的安全性和有效性。因而,建立灵敏度高、专属性强的鲜竹沥质量评价体系尤为重要。该文对鲜竹沥的化学成分及质量标准的研究现状进行综述,以期为进一步完善鲜竹沥的质量评价体系提供依据。

    2021年11期 v.46 2753-2759页 [查看摘要][在线阅读][下载 1816K]
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  • 嗜黏蛋白艾克曼菌的药理作用研究进展

    马文玉;冯世秀;陈乃宏;

    嗜黏蛋白艾克曼菌Akkermansia muciniphila简称AKK菌,于2004年被发现。AKK菌是从人体肠道中被分离出来的一种椭圆形革兰阴性菌,被作为黏液降解菌,广泛存在于人体肠道中,能在肠道黏液层中增殖,并依靠宿主分泌的黏蛋白进行生存。越来越多的研究表明,AAK菌可发挥益生菌作用,在糖尿病、肝脏疾病、心血管疾病、炎症性肠病、神经退行性疾病等疾病中都发现其丰度降低。除此之外,AKK菌可以与中药相互作用治疗疾病,但背后作用机制尚未明确,需要继续进行深入研究。因此该文将综述AKK菌的主要功效及其与中药之间的联系,总结主要存在的问题,为AKK菌的进一步的研究和深入探讨药理作用机制奠定基础。

    2021年11期 v.46 2760-2765页 [查看摘要][在线阅读][下载 1669K]
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  • 基于免疫重塑探讨活血药、益气活血药对肿瘤转移影响差异

    卢泰成;李杰;朱广辉;吴静远;于靖文;朱潇雨;许博文;王贺平;

    肿瘤转移是肿瘤治疗失败的重要原因,其分子机制与肿瘤细胞对免疫细胞及免疫抑制微环境进行重塑,从而塑造出适宜肿瘤细胞侵袭及生长的土壤。活血化瘀是肿瘤治疗中的重要治则之一,但活血药对肿瘤转移的影响一直在临床应用上存在争议。该文通过系统总结近年来活血药及益气活血药在肿瘤转移中的对比研究,从免疫重塑角度对活血药、益气活血药抗肿瘤转移的分子机制差异进行了论述,为临床合理应用活血药、益气活血药提供了科学依据。

    2021年11期 v.46 2766-2772页 [查看摘要][在线阅读][下载 1765K]
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资源与鉴定

  • 基于农艺性状和叶片表型性状的艾种质资源多样性分析

    陈昌婕;罗丹丹;苗玉焕;郭兰萍;刘大会;

    为研究艾种质资源的表型多样性,提高其栽培和育种的效率,该研究收集了来自全国59个地区的100份艾种质资源,并对其20个农艺性状和叶片表型性状进行观测和描述,进行了表型多样性分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析。结果显示:20个性状的遗传多样性指数为0.82~4.37,其中遗传多样性指数最大的是基部叶裂深度,最小的是叶片宽;12个数量性状的变异系数为10.55%~41.47%,变异系数最大的为枯叶高,最小的为叶绿素含量,且除分支夹角外,各个数量性状均趋近正态分布;相关性分析显示有28对性状相关性达到极显著水平(P<0.01),13对性状相关性达到显著水平(P<0.05);根据主成分分析将20个性状简化为9个主成分,其累积贡献率为73.414%,进而筛选出株高、枯叶高、茎径、叶基对称度、托叶、叶尖形状、基部叶裂深度、第二对裂片深度、叶片产量等9个性状为艾种质资源农艺性状和叶片表型性状评价的关键指标;聚类分析在遗传距离为21.2时可将100份艾种质分为3个类群,第Ⅰ类群为矮株粗茎大叶型,第Ⅱ类群为高株宽幅高产型,第Ⅲ类群为矮株细茎阔叶形,可以为艾种质资源的栽培鉴定和品种选育提供基础。

    2021年11期 v.46 2773-2782页 [查看摘要][在线阅读][下载 1960K]
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  • 一株地黄根腐病新病原的分离与鉴定

    李勇;王蓉;陈卉青;魏若凡;刘琨;丁万隆;

    根腐病近年在地黄主产区普遍发生,对地黄产量及品质影响很大。该研究从地黄主产区采集的地黄根腐病样中分离到1株不同于以往报道的新病原,其在PDA培养基上菌落呈灰黑色,菌丝结构致密,气生菌丝欠发达,菌落背面呈黑色。该病菌菌丝粗细不均,直径2~3μm,多有相互缠绕;病菌产孢结构未见,分生孢子小型,近圆形,直径约1μm。将病菌离体接种健康地黄块根,保湿培养数天后接种部位黑褐色腐烂;活体接种健康地黄根部土壤,正常培养数天后地黄苗叶片失水萎蔫,根部黑褐色腐烂,与田间症状一致。病菌基因组DNA经真菌rDNA-ITS通用引物ITS1/ITS4扩增及同源性分析,供试菌株与Heterophoma sp.,Phoma sp.,P.novae-verbascicola及P.herbarum聚为一支,核酸序列同源性为99.21%~99.43%;经tub2基因专用引物Btub2Fd/Btub4Rd扩增及同源性分析,供试菌株与H.verbascicola,H.novae-verbascicola,H.poolensis,P.herbarum,H.sylvatica,H.verbascicola,H.verbasci-densiflori核酸序列同源性为97.00%~98.02%,与H.novae-verbascicola亲缘关系最近;经lsu基因专用引物LR0R/LR7扩增及同源性分析,供试菌株与H.novae-verbascicola聚为一支。结合形态特征观察、核酸序列比对及科赫氏法则验证结果,最终将该病菌鉴定为H.novae-verbascicola。该研究工作对后续开展地黄根腐病理论研究及根腐病田间防治具有重要意义。

    2021年11期 v.46 2783-2787页 [查看摘要][在线阅读][下载 2161K]
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分子生药学

  • 地黄NRT1家族基因的鉴定和表达特性分析

    古力;王丰青;李明杰;林梅桂;王建明;王峰吉;张重义;

    植物中NRT1家族蛋白具有吸收和转运硝酸盐的功能。为了鉴定地黄NRT1家族基因,该研究以11个拟南芥NRT1同源蛋白为探针序列,在地黄转录组数据库中进行BLASTN,对获得的NRT1家族蛋白的分子特征、保守结构域、跨膜结构、亚细胞定位、系统进化树进行分析,并对NRT1家族基因的时空表达模式及其响应逆境胁迫的表达特性进行了系统研究。结果表明,18个地黄NRT1家族基因编码区长度1 260~1 806 bp,分别编码419~601个氨基酸,均具有典型的肽转运蛋白结构域,有7~12个跨膜结构域。大部分蛋白被定位在细胞质膜上,均为疏水性蛋白。同时,进化分析显示获取的NRT1蛋白家族可分为2个亚家族,其中14个NRT1家族基因在进化过程中发生了正向选择,4个基因发生了钝化选择。此外,18个NRT1家族基因在地黄不同组织中的表达模式存在较大差异,其表达量对逆境胁迫的响应特性也有区别,预示着18个NRT1家族蛋白可能在地黄硝酸盐转运中具有明显的功能分化。该研究为解读地黄生长发育对氮素的吸收和转运机制,进一步研究地黄NRT1蛋白在硝酸盐吸收和转运中的分子功能奠定了理论基础。

    2021年11期 v.46 2788-2797页 [查看摘要][在线阅读][下载 2877K]
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  • 灰毡毛忍冬花不同发育阶段的转录组学与代谢组学研究

    潘媛;赵晓;陈大霞;

    为研究灰毡毛忍冬花中次生代谢产物生物合成的调控机制,该文探究了参与其次生代谢产物生物合成调控的关键基因与差异代谢物的作用机制。该研究利用Illumina Hiseq高通量测序技术对不同发育时期的灰毡毛忍冬花进行转录组测序,借助LC-MS/MS技术,对其代谢物进行定性、定量以及合成累积规律研究,并根据差异表达基因筛选出酚酸、黄酮类物质生物合成的关键酶基因。代谢组学及转录组学分析共获得111个差异代谢物和6 653条差异表达基因,二青期的代谢物和关键酶基因与大白期和银花期存在明显差异。在灰毡毛忍冬苯丙氨酸生物合成通路中,绿原酸、柚皮素、槲皮素、芦丁、松柏醇等代谢物的离子丰度随花的发育逐渐降低,阿魏酸、香豆素和紫丁香苷等代谢物的离子丰度随花的发育逐渐升高;关键酶基因CHS、HCT、CCR、FLS、COMT等正向调控下游代谢物,PAL、C4H、4CL等负向调控下游代谢物。该研究为进一步挖掘灰毡毛忍冬花中次生代谢产物生物合成关键酶基因,为利用分子生物学手段调控其次生代谢产物累积量提供候选基因及相应的理论基础。

    2021年11期 v.46 2798-2805页 [查看摘要][在线阅读][下载 2171K]
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  • 丹参酮类化合物调控丹参根微生物组的研究

    包丽琼;陈同;靳保龙;李奉胜;李佐君;陈美兰;王铁霖;崔光红;黄璐琦;

    植物根微生物组由根内和根际微生物组成,这些微生物与植物的各项生命活动紧密相关。植物近30%的光合作用产物用于合成根系化合物,已有证据表明它们直接参与调控根微生物的组装。丹参酮类化合物是丹参Salvia miltiorrhiza中主要的脂溶性成分。为了研究该类化合物是否能调控丹参根微生物组,首先鉴定了1株丹参酮含量极低的突变体丹参,突变体中形成丹参酮类母核的第一个关键酶基因SmCPS1的第5个内含子保留,导致基因表达量大幅下降,呈现白根表型。在人工气候室条件下,以种植于营养土和山东丹参基地土的野生型和突变体为研究对象,基于16S rDNA扩增子测序技术,利用多样性分析、组成型分析和网络分析等方法对野生型和突变体根内微生物和根际微生物进行系统比较。结果表明丹参酮类成分显著影响了丹参的根微生物组,且对根内微生物的影响更为显著。野生型和突变体的根内微生物在物种丰富度、优势菌群及菌群共存网络等方面均存在显著差异。丹参酮类化合物对革兰阳性菌如芽孢杆菌纲Bacilli在根内的定殖有一定的排斥作用,而特异吸引革兰阴性菌β变形菌纲Betaproteobacteria和α变形菌纲Alphaproteobacteria的一些特定菌属。该研究从多角度确定了丹参酮类化合物在调控其根微生物组结构的重要作用,为进一步改善丹参微环境从而提高丹参品质及产量提供科学依据。

    2021年11期 v.46 2806-2815页 [查看摘要][在线阅读][下载 2314K]
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制剂与炮制

  • 基于质量源于设计的复方丹参滴丸混合工艺前馈控制方法研究

    李瑶瑶;张凯旋;熊皓舒;赵万顺;韩明月;闫凯境;章顺楠;

    混合工艺是中药固体制剂的关键操作单元之一,混合物料的粒度、密度、黏度等物理属性会直接影响制剂成型工艺性能,进而影响到产品质量,是需要进行控制的关键因素。滴丸剂混合工艺中物料的动力黏度会影响后续滴制工艺性能,进而影响滴丸产品的质量。该文以复方丹参滴丸混合工艺为对象,基于质量源于设计(quality by design, QbD)理念,建立了一种基于原辅料属性的滴丸混合工艺前馈控制方法。首先,通过多批次原辅料属性数据相关分析和工艺机制分析,识别出了关键质量属性(critical quality attribute, CQA)-动力黏度,以及对CQA产生显著影响的关键物料属性(critical material attribute, CMA)-原料复方丹参提取物含水量、辅料聚乙二醇6000平均相对分子质量,以及关键工艺参数(critical process parameter, CPP)-混合工艺温度;随后采用Box-Behnken试验设计,建立CMA、CPP与CMA之间的回归模型(R■=0.972 0,RMSE=16.24),得到设计空间;最后,在设计空间范围内经3批次验证,基于混合中间体动力黏度目标值,可针对原辅料性质相应调整混合工艺温度,动力黏度实际值与目标值的相对偏差低于3.0%,能够达到对动力黏度属性的精准控制。该研究实现了对复方丹参滴丸混合工艺过程的前馈控制,有助于提高混合工艺中间体质量一致性,也为其他中药滴丸产品工艺过程质量控制研究提供参考。

    2021年11期 v.46 2816-2823页 [查看摘要][在线阅读][下载 1939K]
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  • 外泌体装载连翘酯苷A递药系统的制备及体外评价

    余亚辉;吕田田;薛丙权;余海艳;黄海英;

    制备一种高生物相容性和低免疫原性的装载连翘酯苷A的外泌体(FTA-Exos)递药系统,并考察其对人肺上皮腺癌细胞A549细胞迁移能力的影响。该文采用超高速离心法结合超滤法提取纯化A549细胞中的外泌体,超声孵育法制备FTA-Exos,并通过马尔文粒度分析仪、透射电子显微镜和Western blot对FTA-Exos进行表征。激光共聚焦显微镜观察A549细胞对FTA-Exos的摄取,细胞划痕实验考察FTA-Exos对A549细胞水平迁移能力的影响。结果显示制备的FTA-Exos递药体系的平均粒径为(138.90±2.37) nm, PDI为0.291±0.013,平均电位为(-10.1±0.66) mV,FTA-Exos在载药后粒径略有增大。透射电子显微镜观察到FTA-Exos的外观形态上呈类球状,有明显的茶托样双层膜结构。Western blot结果显示,特异性蛋白CD63及Alix在外泌体中均有表达。激光共聚焦结果表明FTA-Exos能够被A549细胞摄取,在4 h时荧光显著增强,且能在细胞内稳定维持4~8 h。划痕实验显示其抑制A549细胞的迁移能力较连翘酯苷A显著增强(P<0.05)。该文初步成功构建了FTA-Exos递药系统,并证明其稳定性良好,制备方法稳定可靠,且具有良好的体外抑制A549细胞迁移作用,为后续深入研究及应用提供重要依据。

    2021年11期 v.46 2824-2829页 [查看摘要][在线阅读][下载 1937K]
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化学

  • 山楂叶中的萜类化合物

    段志文;王双艳;庞旭;张洁;赵晔;郑晓晖;马百平;

    运用多种色谱分离技术从山楂叶(山里红Crataegus pinnatifida var.major干燥叶)的70%乙醇提取物中分离得到15个萜类单体化合物,并主要利用MS和NMR等波谱学技术鉴定了全部化合物的结构,分别为2α,3β,12β,19α-四羟基乌苏烷-13β,28-内酯(1)、蔷薇酸(2)、委陵菜酸(3)、熊果酸(4)、坡模酸(5)、科罗索酸(6)、山楂酸(7)、linalyl rutinoside(8)、(Z)-3-己烯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、(3S, 6S)-cis-linalool-3,7-oxide-β-D-glucopyranoside(10)、pisumionoside(11)、icariside B_6(12)、byzantionoside B(13)、(6R,7E,9R)-9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one 9-O-β-D-glucopyranoside(14)和(6S,7E,9R)-6,9-dihydroxy-4,7-megastigmadien-3-one 9-O-β-D-glucopyranoside(15)。其中,1是个新五环三萜化合物,2、5、6、8、10、13和15为首次从该植物中分离得到。

    2021年11期 v.46 2830-2836页 [查看摘要][在线阅读][下载 2077K]
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  • 赤芍内生真菌Colletotrichum capsici中的1个新酚酸酯成分

    孙彦斌;夏桂阳;夏欢;武玉卓;王玲燕;林生;

    通过MCI柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和反相高效液相色谱等多种分离和纯化方法,从赤芍内生真菌Colletotrichum capsici的大米发酵培养物中分离得到了9个次生代谢产物,经HR-ESI-MS、NMR、UV等多种波谱技术和计算ECD方法分别鉴定为4′-羟基苯乙基4,8(R)-二羟基苯丙酸酯(1)、酪醇(2)、2-(4-羟基苯基)乙酸乙酯(3)、对羟基苯乙酸甲酯(4)、间羟基苯乙酸甲酯(5)、琥珀酸4-羟基苯乙酯(6)、4-羟基苯乙基甲基琥珀酸酯(7)、木霉新醇B(8)和4-羟基苯乙基2-(4-羟基苯基)乙酸酯(9),其中化合物1为新化合物,化合物2~9均为首次从该种内生真菌中分离得到。

    2021年11期 v.46 2837-2842页 [查看摘要][在线阅读][下载 1885K]
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  • 基于一测多评法的淫羊藿质量评价方法研究及验证

    张龙;李珊珊;白雪;李会芳;肖小河;赵旭;牛明;

    基于淫羊藿成分多样,质控单一的问题,建立13个化学成分的一测多评的评价方法,进一步初探不同批次淫羊藿生品以及酒浸品的成分差异以及酒浸对成分的影响,为提升淫羊藿质量评控提供参考。采用超高效液相色谱构建不同批次淫羊藿的指纹图谱来评价其批次间的一致性,通过含量测定结果和热图分析淫羊藿在酒浸过程中的黄酮类成分的变化并初步探讨其变化的原因;然后选择《中国药典》质控成分淫羊藿苷为内参物,考察各化学成分在不同条件下的相对校正因子的稳定性,得到待测成分的相对校正因子,比较一测多评法(QAMS法)和外标法测定结果的差异,验证一测多评法的准确性。结果表明,不同批次淫羊藿药材均符合《中国药典》检测规定,同一产地的淫羊藿药材的指纹图谱的相似度较高,进一步分析发现,异戊烯基黄酮类成分可有效区分淫羊藿生品和酒浸品,可作为潜在的质量识别标志物,同时初步探讨了淫羊藿在酒浸过程中的糖苷水解过程;研究建立的测定淫羊藿中13种化学成分含量的一测多评法含量测定的准确性较高,耐用性较好,且在不同实验条件下重现性良好,2种分析方法所得结果无显著差异,对更加全面、快速、合理地评控淫羊藿的质量具有参考价值。

    2021年11期 v.46 2843-2851页 [查看摘要][在线阅读][下载 2011K]
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  • 培植牛黄中胆红素的测定及含量考察研究

    石岩;魏锋;吕宝俊;靳艳仿;陈楠;丁芳芳;马双成;

    建立培植牛黄中胆红素的定量测定方法,并对15批培植牛黄样品中胆红素成分的含量进行测定和考察。使用10%草酸溶液对培植牛黄进行处理,使其中的非游离型胆红素转化成游离型胆红素,然后通过二氯甲烷进行液液萃取,所得供试品溶液由Agilent TC-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),经乙腈和1%冰醋酸水溶液(95∶5)作为流动相,在流速为1.0 mL·min~(-1)进行洗脱,450 nm下进行测定。结果15批培植牛黄中胆红素为21.9%~41.7%,平均含胆红素32.4%。该研究方法准确可靠,适用于培植牛黄中胆红素成分的测定及其质量评价及控制。

    2021年11期 v.46 2852-2856页 [查看摘要][在线阅读][下载 1913K]
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药理

  • 白首乌C21甾苷通过TLR4通路防治大鼠肝肾纤维化的作用研究

    庄子锐;王明亮;彭蕴茹;沈明勤;

    采用硫代乙酰胺(thioacetamide, TAA)和结扎单侧输尿管法(unilateral ureteral ligation, UUO)建立SD大鼠肝肾纤维化复合模型,模型建立的同时开始分组给药。造模大鼠随机分为3组,即模型组和白首乌C21甾苷低、高剂量组,另设空白组,连续给药4周。4周后取血清检测肝肾功能的生化指标,取尿液进行尿蛋白、尿肌酐检测,取肝、肾组织样本进行HE和Masson染色及羟脯氨酸含量测定,利用Western blot法检测纤维化相关指标、炎症因子和TLR4通路相关蛋白的表达情况,观察白首乌C21甾苷对肝肾纤维化的防治作用,并探索其分子机制。4周后模型组大鼠血清生化结果显示肝、肾功能受到严重损伤,并且病理切片显示肝、肾组织炎症细胞浸润、实质细胞减少、间质纤维化增多,肝肾纤维化复合模型建立成功;而白首乌C21甾苷低、高剂量(150,300 mg·kg~(-1))组表现出对肝肾纤维化进程明显的干预作用,与模型组相比白首乌C21甾苷可明显降低组织内胶原沉积、减轻肝肾纤维化的病变程度;同时实验发现模型组大鼠肝、肾组织中TLR4和MYD88信号通路蛋白表达显著上升,NF-κB信号通路蛋白大量向核内迁移,而白首乌C21甾苷低、高剂量组TLR4和MYD88信号通路蛋白表达以及NF-κB向核内迁移被显著抑制。因此推测白首乌C21甾苷可通过抑制TLR4/MYD88/NF-κB信号通路防治肝肾纤维化。

    2021年11期 v.46 2857-2864页 [查看摘要][在线阅读][下载 2391K]
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  • 红景天苷调控CXCL16抗肝纤维化的机制研究

    叶倩男;赵长青;平键;徐列明;

    通过体内、体外实验研究红景天苷抑制肝纤维化与CXC趋化因子配体16(CXC chemokine ligand 16,CXCL16)的关系。45只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组、模型组和红景天苷组,每组15只。模型组和红景天苷组以15%四氯化碳(carbontetrachloride, CCl_4)橄榄油溶液腹腔注射建立肝纤维化模型,正常组予等剂量橄榄油腹腔注射,红景天苷组以100 mg·kg~(-1)红景天苷灌胃,正常组和模型组均以等体积双蒸水灌胃,连续灌胃5周后处死。采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肝脏病理变化,天狼猩红染色观察肝纤维化程度;Western blot法检测肝组织Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤连蛋白(fibronectin, FN)、CXCL16、磷酸化Akt(p-Akt)、Akt蛋白表达。体外培养肝星状细胞系JS 1,分为对照组、模型组(100μg·L~(-1) CXCL16)、红景天苷组(100μg·L~(-1) CXCL16+1×10~(-5) mol·L~(-1)红景天苷),采用细胞划痕法检测细胞迁移情况,RT-PCR法检测ColⅠ和α-SMA mRNA表达,Western blot法检测p-Akt和Akt蛋白表达。与正常组相比,模型组小鼠肝组织ColⅠ,α-SMA,FN,CXCL16,p-Akt表达显著升高,红景天苷能降低上述指标的表达(P<0.05或P<0.01)。体外研究显示,CXCL16可促进JS 1迁移,促进JS 1中ColⅠ和α-SMA mRNA高表达及Akt磷酸化(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,红景天苷能够抑制CXCL16诱导的JS 1迁移(P<0.05)和细胞内ColⅠ和α-SMA mRNA高表达及Akt的磷酸化(P<0.05)。综上所述,红景天苷能减轻CCl_4诱导的小鼠肝纤维化,其机制可能与抑制CXCL16诱导的肝星状细胞迁移、活化及Akt磷酸化有关。

    2021年11期 v.46 2865-2870页 [查看摘要][在线阅读][下载 2129K]
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  • 半夏泻心汤对右旋葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群的影响

    陈健;张梁坤;谷文超;张新生;李灵;韩涛;刘西建;黄海量;

    观察半夏泻心汤对右旋葡聚糖硫酸钠诱导建立的溃疡性结肠炎(DSS-UC)小鼠模型炎症因子及肠道菌群的影响,从菌群紊乱角度探讨其治疗溃疡性结肠炎的作用机制。将40只C57BL/6J小鼠随机分为空白组10只、模型组15只和半夏泻心汤组15只,采用2.5%DSS诱导溃疡性结肠炎模型,第8天开始每日对应给予生理盐水、生理盐水、半夏泻心汤14 d后,HE染色法观察结肠组织病理学变化,ELISA法检测血清炎症因子含量,运用16S rRNA测序技术检测小鼠粪便肠道菌群的变化。与空白组比较,模型组小鼠结肠组织损伤严重,血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著升高(P<0.05);与模型组比较,半夏泻心汤组小鼠结肠损伤减轻,血清IL-6和TNF-α含量显著下降(P<0.05);造模后,肠道微生物在门水平上Patescibacteria丰富度显著增加(P<0.05);在属水平上Faecalibaculum(P<0.01)、norank_f_Muribaculaceae(P<0.01)丰富度显著减少,Turicibacter(P<0.01)、Romboutsia(P<0.01)、Clostridium_sensu_stricto_1(P<0.01)丰富度则显著增加。半夏泻心汤干预后,在门水平上Patescibacteria明显减少(P<0.05);在属水平上,Lactobacillus(P<0.01)、Clostridium_sensu_stricto_1(P<0.01)、Enterorhabdus(P<0.01)、Candidatus_Saccharimonas(P<0.05)、Eubacterium_fissicatena_group(P<0.05)显著减少,而Dubosiella、Bacteroides、Allobaculum则显著增加。综上所述,半夏泻心汤可以显著改善DSS-UC小鼠症状,降低IL-6和TNF-α含量;并可在门水平上降低Patescibacteria丰富度,属水平上降低Clostridium_sensu_stricto_1、Candidatus_Saccharimonas、Eubacterium_fissicatena_group丰富度,提高Bacteroides、Bifidobacterium丰富度,进而起到减轻肠道炎症和治疗溃疡性结肠炎的作用。

    2021年11期 v.46 2871-2880页 [查看摘要][在线阅读][下载 2244K]
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药代动力学

  • 基于UPLC-Q-Exactive MS技术的高血压前期肝火亢盛证非靶向代谢组学研究及生物标志物筛查

    王宇;李淑敏;李超;杨雯晴;李运伦;

    该研究选择高血压前期肝火亢盛证患者为研究对象,基于UPLC-Q-Exactive MS技术,采用非靶向代谢组学研究方法分析高血压前期肝火亢盛证患者和健康志愿者的血浆样本,并结合多元统计学及代谢通路分析方法,筛选高血压前期肝火亢盛证患者的差异代谢标志物和代谢通路。分析鉴定得到雄酮、溶血磷脂酰胆碱等33个潜在生物标志物和甾类激素、脂质代谢等16条相关代谢通路,并初步构建了中医证候的代谢组学PLS判别模型:Y=-0.070X_(13)-0.006X_8+0.040X_5-0.152X_1+0.131X_(10)+0.036X_(11)+0.043X_(23)+0.076X_(16)+0.132X_(20)+0.081X_(19)-0.101X_(31)+0.082X_(15)-0.038X_9+0.079X_(24)。模型预测值为88.1%,解释能力为88.4%。该研究采用代谢组学方法能区分并揭示高血压前期肝火亢盛证的特征性代谢模式,PLS判别模型的初步构建为高血压前期的中医证候辨识提供了客观的辨证依据,为从小分子层面及整体水平探究中医证候的生物学基础提供了思路与方法。

    2021年11期 v.46 2881-2888页 [查看摘要][在线阅读][下载 2218K]
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